飼料中添加不同脂肪源對克氏原螯蝦營養物質、脂肪酸組成的影響

楊旭紅， 黃 凱 ， 王丹丹， 曹鑫盛， 羅雨蕭， 于 凱， 黃 嬌

（1.廣西大學動物科學技術學院，廣西南寧 530004； 2.天津贊蘭科技有限公司，天津 300000；3.廣西壯族自治區水產科學研究院，廣西南寧 530000）

克氏原螯蝦（Procambarus clarkii），俗稱小龍蝦，屬我國四大淡水主養蝦類之一，其分類屬甲殼綱（Crustacea）、十足目（Decapoda）、螯蝦科（Cambarus）、原螯蝦屬（Procambarus）（Shen 等，2014；蔡鳳金等，2010）。 2019 年以來，克氏原螯蝦養殖規模擴增， 其年產量均已超過200 萬t （劉敏等，2021），高性價比飼料的需求也逐步增大。目前，國內外克氏原螯蝦的研究報道主要有育種 （宋亮，2012）、養殖模式（程小飛等，2021）、病害防控（霍詩天等，2022；Cai 等，2022）、 食品加工 （孔金花等，2022；Ye 等，2022）等領域，在飼料脂質需求方面多為對脂肪水平的研究（莫翠琴等，2022；徐維娜等，2011）， 而對克氏原螯蝦飼料的適宜脂肪源的使用研究較少。

脂肪是水產動物生長發育不可或缺的營養物質，是體組織的組成成分，為機體提供能量來源，補充必需脂肪酸、激素和維生素等（Xu 等，2013）。魚油含有大量高不飽和脂肪酸， 且二十碳五烯酸（EPA）、二十二碳六烯酸（DHA）含量豐富，是水產飼料主要脂肪源（李愛杰，1996）。全球水產養殖業的快速發展， 魚油產量逐漸不能滿足水產飼料的需求，且價格波動較大。因此，尋找新脂肪源，減少魚油的使用量，可降低飼料成本（New 等，2002）。而植物油替代魚油則是一種有效途徑。 相關研究發現，植物油對吉富羅非魚（Genetic Improvement of Farmed Tilapia，GIFT）（李新等，2016）、 泥鰍（Misgurnus anguillicaudatus）（高堅等，2016）、日本沼蝦（Macrobrachium nipponense）（羅娜等，2017）等水產動物生長有較好的促進作用。 但也有相關研究表明， 亞麻籽油和大豆油替代魚油顯著影響了大菱鲆（Psetta maxima）肌肉的氣味、口感等品質（Regost 等，2003）；大豆油替代魚油后，金頭鯛（Sparus aurata）和丁鯛（Tincatinca）肌肉中的醛類物質含量升高且產生泥土味 （Turchini 等，2007；Izquierdo 等，2005）。與相應的單一脂肪源相比，混合油更具有良好的生長效應。 陳家林等（2011）研究表明， 飼料中魚油與椰子油、 玉米油或亞麻油1∶1 混合后使用提高了異育銀鯽 （Carassius auratus gibelio）的生長。 Lin 等（2007）研究發現，當飼料中只添加魚油和玉米油時， 魚油與玉米油混合顯著增強了石斑魚（Epinephelussp）的非特異性免疫反應。因此，本試驗配制不同脂肪源的等氮等脂飼料飼養克氏原螯蝦， 對營養成分和脂肪酸進行分析，以評價不同脂肪源的利用效果，為篩選克氏原螯蝦適宜的飼料脂肪源提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 克氏原螯蝦仔蝦來自廣西大學水產養殖基地， 試驗飼料通過在相同基礎飼料中分別添加豬油（LO）、豆油（SO）、魚油（FO）、混合油（MO，FO 和SO 1：1 混合）配制而成，試驗組依次標記為LO、SO、FO 和MO 組，飼料組成及營養水平見表1 。

表1 飼料組成及營養水平（干物質基礎）%

1.2 試驗分組與管理 從孵化的仔蝦暫養馴餌池中共挑選600 尾20 ~ 25 日齡體格健壯、 規格均勻、初始體質量（3.50±0.50）g 的克氏原螯蝦仔蝦進行分組。將仔蝦隨機分配至LO 組、SO 組、FO組和MO 組4 個試驗養殖池，每組設3 個平行組，每個平行放50 尾仔蝦， 試驗養殖周期為60 d；每日投喂2 次（06：00 和19：00），日投喂量約為蝦體質量的3%。 養殖池水環境狀況見表2 。

表2 養殖試驗條件的主要參數

1.3 樣品采集與測定方法 試驗結束后，對克氏原螯蝦禁食24 h 處理。 測定蝦體質量、肝胰臟質量和肌肉質量，并計算出肉率（肌肉質量與蝦體質量的比值）和肝胰臟指數（肝胰臟質量與蝦體質量的比值）。

物性分析采用TMS-pro 型物性分析儀中Texture profile Analysis（TPA）模式對各組去殼腹部肌肉樣品進行測定。水分、粗蛋白質、粗脂肪、粗灰分含量依次根據《GB 5009.3-2016 食品中水分的測定》直接干燥法、《GB 5009.5-2016 食品中蛋白質的測定》凱氏定氮法、《GB 5009.6-2016 食品中脂肪的測定》和《GB 5009.4-2016 食品中灰分的測定》進行測定；脂肪酸采用GC Smart（GC-2018）氣象色譜儀和氣質聯用法測定。

1.4 數據分析 試驗數據均用SPSS 26.0 軟件進行統計分析， 采用單因素方差分析 （one-way ANOVA）與Duncan’s 多重檢驗進行比較，所有數據值均由“平均值±標準差”表示，P＜0.05 表示差異顯著。

2 試驗結果與分析

2.1 飼料脂肪源對克氏原螯蝦肌肉與肝胰臟質量比及質構的影響 由表3 可知， 飼料脂肪源對克氏原螯蝦末體質量、出肉率、肝胰臟指數無顯著影響（P＞0.05）；肌肉與肝胰臟的質量比存在顯著差異（P＜0.05），其中MO 組和FO 組質量比顯著大于LO 組。

表3 飼料脂肪源對克氏原螯蝦出肉率、肝胰臟指數及其比值的影響

由表4 結果可知，試驗各組克氏原螯蝦肌肉硬度、彈性、凝聚性、回復性及咀嚼性無顯著差異（P＞0.05）；膠黏性存在顯著差異，其中MO 組和FO 組顯著大于LO 組（P＜0.05）。

表4 飼料脂肪源對克氏原螯蝦肌肉物性分析指標的影響

2.2 飼料脂肪源對克氏原螯蝦肌肉和肝胰臟營養成分的影響 由表5 可知，各組克氏原螯蝦肌肉中水分、粗蛋白質、粗脂肪、粗灰分無顯著差異（P＞0.05）；克氏原螯蝦肝胰臟粗蛋白質、粗灰分和粗脂肪存在顯著差異，LO 組粗蛋白質和粗灰分含量低于SO 組、FO 組和MO 組 （P＜0.05），FO組粗脂肪含量低于其他各試驗組（P＜0.05）。

表5 飼料脂肪源對克氏原螯蝦肌肉和肝胰臟營養成分的影響%

2.3 飼料脂肪源對克氏原螯蝦肌肉脂肪酸組成的影響 由表6 可知， 試驗各組間肌肉中C18：2和C18：3 無顯著差異 （P＞0.05）。 試驗FO 組（13.44%）ARA 含量顯著大于LO 組（11.21%）、SO組（11.50%）和MO 組（12.12%）（P＜0.05）。 試驗MO 組 （9.89% ）EPA 含量顯著大于LO 組（6.99%）、SO 組 （7.64%） 和FO 組 （8.73%）（P＜0.05）。試驗FO 組（5.15%）DHA 含量顯著大于LO組（2.05%）、SO 組（3.26%）和MO 組（4.03%）（P＜0.05）。 試驗FO 組（47.31%）和MO 組（45.15%）∑PUFA 含量顯著大于LO 組 （37.54%） 和SO 組（39.95%）（P＜0.05）。

表6 飼料脂肪源對克氏原螯蝦肌肉脂肪酸組成的影響%

2.4 飼料脂肪源對克氏原螯蝦肝胰臟脂肪酸組成的影響 由表7 可知，試驗各組間肝胰臟中C18：2、C18：3 無顯著差異（P＞0.05）。 試驗FO 組（4.09%）和MO 組（3.76%）ARA 含量與LO 組（2.31%）和SO（3.43%） 存在顯著差異 （P＜0.05）。 試驗FO 組（2.23%）EPA 含量顯著大于LO 組（1.06%）、SO 組（1.18%）和MO 組（1.79%）（P＜0.05）。 試驗FO 組（5.12%）DHA 含量顯著大于LO 組（2.97%）、SO 組（3.66%）和MO 組（4.55%）（P＜0.05）。 試驗FO 組（38.55%）和MO 組（36.95%）∑PUFA 含量顯著大于LO 組（30.33%）和SO 組（33.51%）（P＜0.05）。

表7 飼料脂肪源對克氏原螯蝦肝胰臟脂肪酸組成的影響%

3 討論

3.1 飼料脂肪源對克氏原肌肉螯蝦質構特性的影響 本試驗結果表明， 魚油組和混合油組克氏原螯蝦肌肉的膠黏性顯著高于豬油組。 胡芬等（2011）和李艷青等（2012）等在研究魚肉質構特性中發現， 肌肉的質構特性與蛋白質和脂肪有關。Hatae 等（1990）在研究不同種類魚體肌肉蛋白質的膠原物質對肉質影響中指出， 魚肉硬度和膠原物質含量呈正相關。 Srinivasan 等（1997）和Bhat等（2009）的研究則進一步表明，羥基氧化可破壞蛋白結構的完整性， 發生變性的蛋白不能再形成穩定的界膜而致使蛋白與脂肪交聯的能力下降，蛋白質的氧化影響了肌原纖維蛋白間交聯從而阻礙凝膠形成。

3.2 飼料脂肪源對克氏原螯蝦營養成分的影響本試驗結果表明， 飼料脂肪源對克氏原螯蝦肌肉的粗蛋白質、粗脂肪和粗灰分無顯著差異，這與異育銀鯽（陳家林等，2011）及紅羅非魚（Oreochromis spp）（陳濤等，2017）研究上結果相似。但也有相關研究表明， 在彭澤鯽 （Carassius auratus var Pengze） （ 丁立云等，2021） 及西伯利亞鱘（Acipenser baerii）（周章等，2023） 肌肉中粗蛋白質及粗脂肪含量有較大差異性， 造成這種差異的原因可能與魚蝦種類、 飼料的營養水平和不同生境有關。

本試驗結果發現， 飼料脂肪源對克氏原螯蝦肝胰臟中粗蛋白質、 粗脂肪和粗灰分含量有顯著影響，這與郭楓（2019）、趙娟等（2013）和王恒等（2019） 分別研究脂肪源對黃鱔 （Monopterus albus）、擬穴青蟹幼蟹（Scylla paramamosain）、羅氏沼蝦（Macrobrachium rosenbergii）的體組成影響結果相似。 克氏原螯蝦肝胰臟粗脂肪含量以豬油最高。 這可能與豬油中含有更低的不飽和脂肪酸有關， 因為不飽和脂肪酸能起到降低體脂沉積的作用（朱大世，2005；趙華等，2004）。

3.3 飼料脂肪源對克氏原螯蝦肌肉和肝胰臟脂肪酸的影響 研究顯示， 機體脂肪酸的組成受飼料脂肪源的直接影響 （Shapawi 等，2008；Ng 等，2004）。 本試驗結果顯示，豬油、豆油、魚油和混合油對克氏原螯蝦肝胰臟和肌肉的脂肪酸組成有顯著影響。 李思萌等（2015）和王健懿等（2017）的研究結果也表明， 動物機體脂肪酸組成的差異性主要是與魚油、 豆油和豬油等脂肪源中的脂肪酸組成有關，結合本試驗結果，說明豆油中單不飽和脂肪酸及魚油中多不飽和脂肪酸影響了克氏原螯蝦的脂肪酸組成。

多不飽和脂肪酸具有參與動物體內細胞膜流動性的調節和促進幼體生長等作用，而甲殼動物自身合成不飽和脂肪酸的能力較弱，所以需要從食物攝入（田娟等，2017；Cossins 等，1998）。 魚油相對于豆油和豬油，多不飽和脂肪酸中的EPA 和DHA 含量相對豐富。 本試驗結果表明，魚油組克氏原螯蝦肌肉和肝胰臟的EPA 和DHA 等多不飽和脂肪酸含量顯著高于其他試驗組。這說明魚油滿足了幼蝦生長的脂肪酸需求和促進蝦體肌肉及肝胰臟等部位的EPA 和DHA 等多不飽和脂肪酸的積累。

豆油與魚油和豬油相比， 富含有油酸、 亞油酸、亞麻酸等必需脂肪酸，具有促進蝦類生長和脂肪酸代謝等重要功能（Merican 等，1996； 徐學良等，1992）。試驗結果顯示，豆油組克氏原螯蝦中油酸（C18：1）和棕櫚油酸（C16：1）等單不飽和脂肪酸含量顯著高于其他試驗組。 這可能與飼料脂肪源中亞麻酸和亞油酸比值影響去飽和酶有關，因為去飽和酶會影響油酸和棕櫚油酸等不飽和脂肪酸的生成過程。 與Blanchard 等（2008）在歐亞鱸魚上的研究結果類似。Xu 等（2002）通過體外示蹤試驗證實了這個說法。與單一脂肪源相比，混合油富含有EPA 、DHA、油酸、亞油酸和亞麻酸等不飽和脂肪酸。 飼料中搭配合理的不飽和脂肪酸比例能夠降低飼料系數。 飼料中C18：1n9、 亞油酸、EPA、DHA，其中任何一種含量較低時都會提高飼料消耗，不利于降低飼養成本（林向東等，2011）。

不同脂肪酸在不同組織中的沉積率有所不同， 肌肉中C18∶0 與C22∶0 含量高于它們在肝胰腺中的含量， 肌肉中單不飽和脂肪酸含量比相對應的飼料中的含量要低， 這表明了這些脂肪酸是根據各個組織的需要和功能進行選擇性沉積。 肌肉中C18∶2n-6 和C18∶3n-3 含量遠遠低于它們在肝胰腺中的含量，而C20∶4n-6、EPA、DHA 含量在肌肉中的含量高于它們在肝胰腺中的含量。 這些結果表明C18∶2n-6 和C18∶3n-3 在肝胰腺沉積率較大，而HUFA 則在肌肉中沉積率較大。 有研究發現，碳鏈延長的酶系存在于肝細胞的微粒系統和線粒體內（周順伍，2004），Kanazawa 等（1979）和任澤林等（1994）發現，C18∶2n-6、C18∶3n-3 可以通過去飽和作用以及碳鏈延長轉化為HUFA。本試驗結果表明，C18∶2n-6 和C18∶3n-3 在對蝦肝胰腺內通過去飽和和碳鏈延長作用在對蝦體內轉化為HUFA運送至肌肉組織中與上述結果相一致。

4 結論

本試驗結果顯示，4 種脂肪源均能影響蝦體中肌肉與肝胰臟營養物質和脂肪酸組成。 但豬油含有高飽和脂肪酸，不易消化；而豆油缺乏EPA和DHA，不能滿足機體需要；魚油富含機體所需的必需脂肪酸，但市場價格昂貴。而魚油+豆油1：1 在基礎營養物質和脂肪酸組成均與魚油相近。故推薦魚油+豆油1：1 作為克氏原螯蝦的飼料脂肪源。