血清S-CD105、periostin、TK1水平與非小細胞肺癌根治術后復發的關系研究

黃光俊,呂增波,張朝青（.貴州省盤州市人民醫院,貴州 盤州 553000;.云南省曲靖市第一人民醫院,云南 曲靖 655000）

非小細胞肺癌（NSCLC）是肺癌最常見的病理類型，早中期NSCLC以手術治療為首選，但是癌組織極易形成微轉移，導致腫瘤復發，且早期不易發現[1]。NSCLC術后復發可導致全身癌細胞擴散，預后較差，中位生存期為11.4-17.7個月[2]。因此探尋預測NSCLC根治術后復發的生物學指標十分重要。可溶性CD105（SCD105）是CD105的可溶性形式，CD105在內皮細胞上表達上調，調控新生血管形成，是癌癥預后的潛在生物指標[3]。骨膜素（periostin）是一種多功能的細胞外基質蛋白，可通過激活PI3K/Akt信號通路促進癌細胞轉移，與腫瘤發生進展密切相關[4]。胸苷激酶（TK1）是一種參與嘧啶代謝的胞質酶，可催化γ-磷酸基團添加到胸苷，TK1在惡性腫瘤中過表達，且與預后不良有關[5]。本研究旨在探討血清S-CD105、periostin、TK1水平與NSCLC根治術后復發的關系，為NSCLC根治術后復發診治提供參考依據，報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2019年1月-2021年6月我院收治的127例NSCLC患者，納入標準：①均接受肺癌根治手術和淋巴結系統清掃，經術后病理證實為NSCLC，符合《中華醫學會肺癌臨床診療指南（2018版）》[6]中NSCLC診斷標準；②術后定期接受隨訪，至少6個月；③患者及家屬對研究內容知情同意并簽署同意書。排除標準：①合并其他惡性腫瘤；②術前CT、MRI、骨掃描等影像檢查已證實腫瘤細胞已發生遠處轉移；③隨訪失聯。本研究已獲得我院倫理委員會批準。

1.2 實驗室檢查 所有NSCLC患者術后48h內采集靜脈血，檢測血清S-CD105、periostin、TK1水平。血標本處理：采集外周靜脈血3ml注入干燥試管，待血液凝固后取上層血清離心（2000rpm，半徑15cm，時間10min），然后取上清液冷凍保存。采用UniCel DxI 800化學發光免疫分析儀（美國貝克曼庫爾特公司）檢測血清TK1水平，采用ST-360型96孔板多功能全自動酶標免疫檢測儀（濟南巴艾貝斯生物工程有限公司）運用酶聯免疫吸附試驗檢測S-CD105、periostin水平，試劑盒購自美國賽默飛公司。

1.3 臨床資料收集 收集患者年齡、性別、吸煙史、組織學分型（鱗癌、腺癌、其他）、分化程度（高分化、中分化、低分化）、腫瘤直徑（≥3cm、＜3cm）、T分期（T1、T2、T3）、縱隔淋巴結轉移、手術方式（全肺切除、肺葉切除、肺葉袖式切除）、腫瘤標志物[采用酶聯免疫吸附試驗檢測血清癌胚抗原（CEA）、神經元特異性烯醇化酶（NSE）水平]。

1.4 隨訪 從手術結束后隨訪至患者復發或隨訪期滿，隨訪期為24個月，每3個月門診復查一次，接受CT、PET-CT、超聲、纖支鏡、MRI、骨掃描、血清腫瘤標志物等檢查，確定復發情況，根據術后是否發生復發將患者分為復發組和無復發組。

1.5 統計學分析 使用SPSS25.00進行數據分析，經Kolmogorov–Smirnov檢驗的計量資料符合正態分布以（）表示，采用獨立樣本t檢驗。計數資料以[例（%）]表示，采用χ2檢驗。多因素Logistic回歸分析NSCLC術后復發的危險因素。受試者工作特征曲線（ROC）分析S-CD105、periostin、TK1以及聯合預測NSCLC術后復發的價值。檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 兩組臨床資料以及血清S-CD105、periostin、TK1水平比較隨訪期間53例復發，復發率41.73%。復發組年齡、中低分化、T3、縱隔淋巴結轉移、血清S-CD105、periostin、TK1、CEA、NSE水平高于無復發組（P＜0.05），兩組性別、吸煙史、組織學分型、腫瘤直徑、手術方式比較，無統計學差異（P＞0.05），見表1。

表1 復發組和無復發組基線資料、血清S-CD105、periostin、TK1水平差異[,n(%)]

表1 復發組和無復發組基線資料、血清S-CD105、periostin、TK1水平差異[,n(%)]

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2.2 影響NSCLC術后復發的危險因素分析 建立Logistic回歸方程，以年齡、分化程度、T分期、縱隔淋巴結轉移、S-CD105、periostin、TK1、CEA、NSE為自變量，NSCLC術后復發為因變量（賦值：0=否，1=是），ENTER法篩選變量（入=0.05，出=0.10）。結果顯示，縱隔淋巴結轉移、高水平S-CD105、高水平periostin、高水平TK1是NSCLC術后復發的危險因素（P＜0.05），見表2。

表2 影響NSCLC術后復發的危險因素分析

2.3 血清S-CD105、periostin、TK1預測NSCLC術后復發的價值血清S-CD105、periostin、TK1預測NSCLC術后復發的曲線下面積分別為0.700、0.717、0.718，其中periostin、TK1曲線下面積高于CEA（Z=2.141、2.086，P= 0.032、0.037），S-CD105與CEA比較，無統計學差異（Z=1.747，P=0.081），S-CD105、periostin、TK1曲線下面積均高于NSE（Z=2.766、3.139、2.905，P=0.006、0.002、0.004）。聯合S-CD105、periostin、TK1預測NSCLC術后復發的曲線下面積為0.892，高于單獨S-CD105、periostin、TK1（Z=4.358、3.848、3.611，P=0.000、0.000、0.000），見表3和圖1。

表3 S-CD105、periostin、TK1預測NSCLC術后復發的效能

3 討論

早期預測NSCLC根治性手術后復發有助于指導臨床治療，為臨床術后聯合放化療提供依據。常規血清腫瘤標志物檢測方便、經濟，但是靈敏度和特異性不理想，在腫瘤復發評估中應用較為局限，因此有必要探討更為敏感的生物標志物。

CD105又稱內皮糖蛋白，是一種I型同源二聚體整合跨膜糖蛋白和輔助轉化生長因子-β（TGF-β）受體，主要表達于血管內皮和基質細胞，在增殖的內皮細胞上特異性高度表達，誘導內皮細胞活化和增殖，促使新生血管生成，與惡性腫瘤發生和進展有關[7]。S-CD105作為S-CD105的可溶性形式，與細胞中S-CD105表達有密切相關性。本研究發現S-CD105與NSCLC根治術后復發也存在密切關系，復發組血清S-CD105水平明顯高于無復發組，S-CD105水平增高是NSCLC術后復發的危險因素，說明S-CD105水平增高可能促使NSCLC術后腫瘤復發。分析可能的機制為：CD105通過TGF-β1信號轉導促使內皮細胞增殖分化，基質內內源性血管生長因子（VEGF）的合成，誘導新生血管和血管網絡形成[7]，導致NSCLC增殖、遷移和復發。

periostin是一種由信號肽組成的多模塊蛋白質，在骨膜、成纖維細胞、富含膠原蛋白的結締組織中表達，periostin的FAS1域和N端EMI域與細胞外基質蛋白結合調節細胞增殖分化，促進骨發育，參與組織修復和上皮-間充質轉換過程[8]。研究[9]表明，periostin與NSCLC也存在密切關系，NSCLC癌癥相關成纖維細胞的periostin表達增高，且與NSCLC病理分期、惡性程度和淋巴結轉移有關。本研究結果發現periostin與NSCLC根治術后復發亦有關，periostin水平增高是NSCLC術后復發的危險因素，表明periostin可作為NSCLC術后復發的預測指標。上皮間質轉化與肺癌術后復發有關，periostin可能通過p38/細胞外信號調節激酶信號通路促使Snail和Twist表達，促使上皮間質轉化，增加細胞遷移潛力[10]，導致腫瘤復發。

TK1是一種DNA補救途徑酶，在胞質溶膠內轉化為單磷酸鹽形式（dTMP），dTMP被胞質溶膠內連續酶轉化為三磷酸形式的脫氧胸苷三磷酸（dTTP），dTTP再通過核孔復合物被動輸入細胞核，參與DNA合成和轉錄[11]。有研究[12]顯示，TK1水平與乳腺癌復發、轉移均存在正相關關系。本研究發現TK1與NSCLC患者根治術后復發亦存在密切關系，TK1水平增高是NSCLC術后復發的危險因素，提示TK1參與NSCLC術后腫瘤復發過程，推測可能的機制為MAP激酶途徑激活上調TK1表達，TK1被轉錄因子MAZ轉錄上調，TK1通過誘導生長和分化因子15表達促進肺癌細胞生長，增加癌細胞侵襲性和轉移能力[13]，導致腫瘤復發。

本研究ROC分析結果顯示S-CD105、periostin、TK1預測NSCLC術后復發的曲線下面積高于常規腫瘤標志物CEA、NSE，說明S-CD105、periostin、TK1在NSCLC預后預測中具有較高的價值。聯合S-CD105、periostin、TK1后預測效能較單獨指標明顯增高，提示聯合檢測可提高預測效能，為臨床NSCLC根治術后復發的預判提供更可靠的信息。回歸分析還顯示縱隔淋巴結轉移與NSCLC根治術后復發有關，臨床可結合高危因素和血清學標志物識別高復發風險患者，強化術后放化療，以控制病情，預防腫瘤復發。

總之，NSCLC根治術后復發患者血清S-CD105、periostin、TK1水平均增高，S-CD105、periostin、TK1水平增高是NSCLC患者術后復發的危險因素，可作為復發風險的預測指標。