草魚中獸藥殘留硝基呋喃代謝物檢測的研究

◎ 饒玲玲

（湖南省分析測試中心有限公司，湖南 長沙 410000）

水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的迅猛發(fā)展，為我國農(nóng)村經(jīng)濟的進步提供關鍵性支撐。在養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展進程中，因養(yǎng)殖密度、環(huán)境污染等因素，導致各類水產(chǎn)品病害嚴重，獸藥的科學應用能夠有效降低水產(chǎn)養(yǎng)殖的發(fā)病率及死亡率，保障養(yǎng)殖者的利益。然而，因部分養(yǎng)殖者缺乏相關用藥知識及科學的指導，出現(xiàn)抗生素、藥物添加劑濫用的問題，導致水產(chǎn)品獸藥殘留嚴重，成為社會大眾關注的焦點。獸藥殘留是指動物產(chǎn)品的可食用部分中所有與藥物有關的物質(zhì)殘留，是藥物原型或其所有代謝物的總和[1-4]。水產(chǎn)品在使用藥物之后，包括藥物原型在內(nèi)的相關產(chǎn)物、雜質(zhì)等，都會在水產(chǎn)品的組織、細胞及各種器官中進行積累，不僅不利于生態(tài)環(huán)境，也會通過食物鏈進入人體，引發(fā)人類身體健康問題。獸藥濫用的問題非常普遍，嚴重影響了我國水產(chǎn)品食用的安全性。因此，對水產(chǎn)品中的藥殘進行檢測在保障食品安全方面意義重大[5]。魚類是CS 地區(qū)重要的食用水產(chǎn)品，尤其是草魚，受到當?shù)厝嗣竦膹V泛喜愛。因此，強化對草魚水產(chǎn)品安全的監(jiān)管，對于當?shù)亟?jīng)濟、產(chǎn)業(yè)、新農(nóng)村建設、提升當?shù)剞r(nóng)民收入，具有重要現(xiàn)實意義。基于此，本研究依據(jù)GB 31656.13—2021 《食品安全國家標準 水產(chǎn)品中硝基呋喃類代謝物多殘留的測定 液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法》，對草魚中的4 種硝基呋喃代謝物的含量進行了測定，同時開展了測定方法的評價，期望可以為水產(chǎn)品農(nóng)殘的測定提供一定參考依據(jù)。

1 實驗部分

1.1 實驗材料

（1）材料。實驗用草魚：來自SC 水產(chǎn)養(yǎng)殖基地。

（2）試劑。4 種硝基呋喃代謝物標準和內(nèi)標物質(zhì)；甲醇、乙酸乙酯、乙酸銨、二甲亞砜、2-硝基苯甲醛（以上均為色譜純）；鹽酸、無水磷酸氫二鉀；水（超純水）。

（3）實驗儀器。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配電噴霧離子源（ESI）；組織搗碎機；恒溫振蕩器等；分析天平；氮吹儀；離心機；渦旋混合器。

1.2 樣品前處理

參照GB 31656.13—2021 《食品安全國家標準水產(chǎn)品中硝基呋喃類代謝物多殘留的測定 液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法》。

1.3 儀器條件

1.3.1 色譜條件

色譜柱：Waters C18（Xbridge BEH 2.5 μm）；柱溫：30 ℃；進樣量：10μL；流速：0.35 mL·min-1；流動相：溶劑A 為2 mmol·L-1的乙酸銨溶液，溶劑B 為甲醇。梯度洗脫程序見表1。

表1 流動相及梯度洗脫程序表

1.3.2 質(zhì)譜條件

離子源：EI（ESI+）；掃描方式：SRM；離子噴霧電壓：4 500 V；離子傳輸管溫度：300 ℃；蒸汽溫度：350 ℃；鞘氣流速：30 Arb；輔助氣流速：15 Arb。

2 試驗分析

2.1 標準工作曲線

配制了6 個點的標準溶液，濃度分別為 0.50、1.00、2.00、5.00、10.0、20.0 ng·mL-1，內(nèi)標濃度為 2.00 ng·mL-1，建立標準工作曲線，得到線性回歸方程和相關系數(shù)，見表2。

表2 4 種硝基呋喃代謝物的線性方程及R2 值表

由表2 可見，在0.5～20.0 ng·mL-1線性范圍內(nèi)，4 種硝基呋喃代謝物的標準線性方程相關系數(shù)處于0.999 2～0.999 8，說明其線性關系表現(xiàn)良好。

2.2 加標回收實驗

各稱取草魚樣品2 g，分別添加硝基呋喃代謝物（AHD、AOZ、SEM、AMOZ）標準物質(zhì)0、5、5、10 ng，并定容至1 mL，計算其分析結果及回收率，具體見表3。

表3 硝基呋喃代謝物加標回收實驗結果表

由表3 可知，4 種硝基呋喃代謝物的加標回收率處于91.8%～107%，代表該檢測方法具備較高的準確度，可以滿足檢測要求。

2.3 樣品檢測及結果

依據(jù)上述方法對草魚樣品中含有的4 種硝基呋喃代謝物進行檢測，檢測結果見表4。

表4 草魚樣品中硝基呋喃代謝物檢測結果表

由表4 可知，通過對SC 水產(chǎn)養(yǎng)殖基地選取的具有代表性的3 個養(yǎng)殖點中的草魚開展檢測。結果顯示，該養(yǎng)殖基地的草魚樣品中除SEM 未檢出外，樣品中均有AMOZ、AOZ、AHD 殘留，其中AMOZ 含量處于5.28～5.38 μg·kg-1，AOZ 含量處于2.52～2.58 μg·kg-1，AHD 含量處于2.56～2.59 μg·kg-1，且檢出值均高于該檢測方法的定量限（0.50 μg·kg-1）。

3 結果與討論

本研究在對儀器的工作條件進行優(yōu)化后，開展了硝基呋喃代謝物加標回收實驗。結果顯示，4 種代謝物處于0.05～20.0 ng·mL-1濃度范圍內(nèi)時，其線性關系表現(xiàn)良好，相關系數(shù)處于0.999 2～0.999 8，4 種代謝物加標回收率處于91.8%～107%。結果表明，該檢測方法準確度較高、簡單、可靠，能滿足草魚中不科學應用硝基呋喃類藥物的檢測監(jiān)控要求，為相關人員開展水產(chǎn)品硝基呋喃類藥殘檢測提供方法參考。

水產(chǎn)品中檢測出的硝基呋喃代謝物，不僅源自養(yǎng)殖者在飼養(yǎng)過程中不科學地使用藥物，也與環(huán)境污染具有較大的關系。對于本實驗樣品草魚中檢測出來的AMOZ、AOZ、AHD 3 種硝基呋喃代謝物，其來源還有待進一步研究。