◎ 彭紹忠,伍柏堅,朱煥容,黃曉丹
(1.廣州王老吉藥業(yè)股份有限公司,廣東 廣州 510000;2.廣東省名優(yōu)中成藥與涼茶企業(yè)重點實驗室,廣東 廣州 510000)
蟲草飲由蛹蟲草、枸杞、龍眼肉、黃精等本草原料根據(jù)中醫(yī)藥理論配伍組方,并采用現(xiàn)代生產(chǎn)工藝制備而成的植物飲料。因此,本文從細胞免疫功能、體液免疫功能、免疫細胞功能方面探討蟲草飲的調(diào)節(jié)免疫功能,旨在為其廣泛應用提供理論基礎。
蟲草飲,250 mL/罐,罐裝,液體,常溫保存,人體推薦日服量為2 罐/d,以成人體重60 kg 計,推薦量為8.33 mL·kg-1BW。本試驗采用濃縮樣品(濃縮倍數(shù)為33.9 倍)進行實驗,由廣州王老吉藥業(yè)股份有限公司提供。
本研究中使用的實驗動物為SPF 級昆明種雌性小鼠,周齡為6~8 周,體重范圍在18~22 g 之間。小鼠由廣東省醫(yī)學實驗動物中心提供,合格證號為SCXK(粵)2013—0002,質(zhì)量合格證編號為44007200021570。實驗室的室溫控制在20~26 ℃,濕度維持在40%~70%。
CO2培養(yǎng)箱、SOFTmaxPRO 酶標儀、超凈工作臺、紫外分光光度計、CASY?DT 型細胞計數(shù)儀、倒置顯微鏡、保溫箱、游標卡尺;RPMI1640 培養(yǎng)基、MTT和ConA、綿羊紅細胞等。
在實驗室條件下,動物經(jīng)過3 d 的檢疫期后,被隨機分配到4 個批次中,每個批次包含40 只動物。隨機分為4 組,以進行不同劑量的處理,分別設定為低劑量組、中劑量組和高劑量組,劑量分別為41.7、83.3、250.0 mL·kg-1BW,折算為濃縮樣品的劑量為1.23、2.46、7.37 mL·kg-1BW,相當于人體推薦量的5、10、30 倍,此外,研究設置了1 個陰性對照組,由10只動物組成。實驗期間,每日通過灌胃方式給予受試物,給藥量根據(jù)動物每周體重的變化進行調(diào)整。整個實驗的持續(xù)時間為4 周。根據(jù)《保健食品功能檢驗與評價方法(2023 年版)》中的免疫功能檢測程序,在實驗中,對小鼠進行了以下一系列的免疫學試驗:遲發(fā)型變態(tài)反應試驗、ConA 誘導的脾淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗、血清溶血素滴度測定、脾細胞抗體生成試驗、碳廓清試驗、腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞試驗,以及NK 細胞活性測定。
通過比較各劑量組在不同時間點的體重、臟器與體重的比值與對照組的數(shù)據(jù),發(fā)現(xiàn)差異不具有統(tǒng)計學意義(見表1)。這一結(jié)果表明,蟲草飲并未對小鼠的體重增長、脾臟重量及胸腺重量,產(chǎn)生顯著影響。

表1 蟲草飲對小鼠體重、脾臟重量和胸腺重量的影響表
在小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應實驗中,中劑量組和高劑量組的足跖增厚值明顯高于對照組,且這種差異具有統(tǒng)計學意義(見表2)。這一結(jié)果表明,蟲草飲對小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應產(chǎn)生了陽性影響。同時,在ConA誘導的小鼠脾淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗中,低劑量組、中劑量組和高劑量組的光密度差值,均超出了對照組的數(shù)值,差異同樣具有統(tǒng)計學意義(見表2)。這些發(fā)現(xiàn)表明,蟲草飲促進了小鼠脾淋巴細胞的轉(zhuǎn)化,呈現(xiàn)陽性結(jié)果。綜合上述實驗數(shù)據(jù),可以得出結(jié)論,蟲草飲具備增強小鼠細胞免疫功能的效果。
表2 蟲草飲對小鼠細胞免疫功能的影響表()

表2 蟲草飲對小鼠細胞免疫功能的影響表()
注:* 與對照組比較,P <0.05
在小鼠血清溶血素半數(shù)溶血值的影響試驗中,各劑量組的血清溶血素半數(shù)溶血值均高于對照組,且這種差異具有統(tǒng)計學意義(見表3)。這一結(jié)果表明,蟲草飲對小鼠血清溶血素試驗產(chǎn)生了陽性影響。同時,在小鼠脾細胞抗體生成水平的影響試驗中,各劑量組的脾細胞抗體生成水平均高于對照組,差異同樣具有統(tǒng)計學意義(見表3)。這些發(fā)現(xiàn)表明,蟲草飲促進了小鼠脾細胞抗體的生成,呈現(xiàn)陽性結(jié)果。綜合上述實驗數(shù)據(jù),可以得出結(jié)論,蟲草飲具備增強小鼠體液免疫功能的效果。
表3 蟲草飲對小鼠體液免疫功能的影響表()

表3 蟲草飲對小鼠體液免疫功能的影響表()
注:* 與對照組比較,P <0.05
在小鼠碳廓清吞噬功能的影響試驗中,中劑量組和高劑量組的碳廓清吞噬指數(shù)明顯高于對照組,且這種差異具有統(tǒng)計學意義(見表4)。這一結(jié)果表明,蟲草飲對小鼠的碳廓清吞噬功能產(chǎn)生了陽性影響,但巨噬細胞吞噬功能實試呈陰性。根據(jù)《保健食品功能檢驗與評價方法(2023 年版)》,可以得出結(jié)論,蟲草飲具備增強小鼠單核-巨噬細胞功能的效果。
表4 蟲草飲對小鼠單核-巨噬細胞功能的影響表()

表4 蟲草飲對小鼠單核-巨噬細胞功能的影響表()
注:* 與對照組比較,P <0.05
中劑量組和高劑量組的NK 細胞活性明顯高于對照組,且這種差異具有統(tǒng)計學意義(見表5)。這一結(jié)果表明,蟲草飲對小鼠的NK 細胞活性產(chǎn)生了陽性影響,其具有增強NK 細胞活性的作用。
表5 蟲草飲對小鼠NK 細胞活性的影響表(n=10,)

表5 蟲草飲對小鼠NK 細胞活性的影響表(n=10,)
注:*與對照組比較,P <0.05
本實驗結(jié)果顯示,蟲草飲在細胞免疫功能、體液免疫功能、NK 細胞活性方面呈陽性,依據(jù)《保健食品功能檢驗與評價方法(2023 年版)》增強免疫力功能評價標準判斷,蟲草飲具有增強免疫力功能作用。國內(nèi)外文獻研究發(fā)現(xiàn),蛹蟲草有促進脾淋巴細胞增殖,提高巨噬細胞功能,增強遲發(fā)性變態(tài)反應,提高免疫功能等作用;枸杞不但能明顯地增強機體特異性免疫的作用,并且能夠提高非特異性免疫的作用[1];龍眼肉能夠刺激脾淋巴細胞增殖、增強巨噬細胞吞噬功能[2];黃精可改善免疫功能低下,延緩運動疲勞的發(fā)生,提高體液免疫和細胞免疫功能[3-5]。蟲草飲由蛹蟲草、枸杞、龍眼肉和黃精等天然草藥組成,該產(chǎn)品以補氣養(yǎng)陰、健脾潤肺為主要功效,通過協(xié)同作用來輔助改善免疫低下癥狀。本研究初步證實了蟲草飲具有增強免疫力的作用,但其具體的免疫增強機制尚待進一步研究探討。