飼糧中添加膨化亞麻籽和微藻對湖羊血清抗氧化指標和肌肉脂肪酸含量的影響

魏宗友，王偉，周麗雅，徐哲，張陽陽，陳為紅

(1. 太倉市農(nóng)業(yè)農(nóng)村科技服務中心，江蘇 太倉 215400；2. 太倉市畜牧獸醫(yī)站，江蘇 太倉 215400；3. 蘇州健雄職業(yè)技術(shù)學院，江蘇 太倉 215400；4. 太倉市東林生態(tài)養(yǎng)殖專業(yè)合作社/江蘇省企業(yè)研究生工作站，江蘇 太倉 215400)

功能性脂肪酸是指對人體具備特殊營養(yǎng)價值或作用的多不飽和脂肪酸(PUFA)，如n-3系PUFA。 PUFA可對諸多關(guān)鍵性的生理活性具有調(diào)控作用，包括預防心血管疾病、調(diào)控機體脂質(zhì)代謝、促進生長發(fā)育等[1]。n-3系列的PUFA和人類健康具有密切聯(lián)系，對多種慢性病具有防治作用，包括心腦血管疾病、糖尿病、肥胖等[2]。此系列的PUFA以α-亞麻酸(C18：3n-3，ALA)，二十碳五烯酸(C20：5n-3，EPA)和二十二碳六烯酸(C22：6n-3，DHA)為主。1994年，美國衛(wèi)生部提出，多食魚肉制品尤其是n-3 PUFA含量高的魚油能夠改善必需脂肪酸的平衡。改善肉品的脂肪酸(FA)平衡有助于人類的營養(yǎng)保健。亞麻籽又稱胡麻籽，富含油脂、蛋白質(zhì)和氨基酸等營養(yǎng)成分，同時含有木酚素、黃酮和植物甾醇類等抗氧化物質(zhì)[3]。此類油料籽實的ALA含量極高。利用亞麻籽作為飼料原料生產(chǎn)富含n-3 PUFA的肉品已有很多報道，但試驗動物主要以雞、牛[4]和山羊[5-7]為主。Hemant 等[8]研究發(fā)現(xiàn)，亞麻籽所含n-3系PUFA(ALA、EPA與DHA等)可削弱動物機體肝臟與心臟的炎癥。近幾年，動物營養(yǎng)研究開始涉足海洋資源。微藻是一種分布廣泛且營養(yǎng)物質(zhì)含量高、光合能力強的自養(yǎng)植物，富含有大量的細胞色素，其中包括β-胡蘿卜素、葉黃素、蝦青素等。微藻能合成多種擁有特殊生物活性的化合物，還能提高動物的生長性能、增強機體免疫機能、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、解決畜牧業(yè)的環(huán)境污染問題，同時還可減輕食品與飼料以及燃料工業(yè)之間的競爭[9]，在醫(yī)藥、畜禽飼料、食品與保健食品等方面廣泛應用。陳秀麗等[10]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加裂殖壺菌粉能夠增加蛋中n-3 PUFA和DHA含量，降低n-6/n-3 PUFA比值。吳永保等[11]報道，飼糧中添加微藻和亞麻籽均可提高蛋黃中n-3 PUFA含量，降低n-6 PUFA 含量，并降低n-6/n-3 PUFA比值，可生產(chǎn)n-3 PUFA雞蛋。但關(guān)于在飼糧中添加膨化亞麻籽和微藻對湖羊血液抗氧化指標和肌肉脂肪酸組成的影響還未見報道，本試驗為此開展研究，為采用調(diào)整飼糧的方法生產(chǎn)富含n-3 PUFA 的功能性羊肉提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

膨化亞麻籽購自武漢山川生物科技有限公司；微藻采用裂殖壺藻粉，發(fā)酵工藝，購自挪亞圣諾太倉生物科技有限公司。

谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)檢測試劑盒(批號：20221108)，超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒(批號：20221106)，丙二醛(MDA)檢測試劑盒(批號：20221108)，過氧化氫(H2O2)檢測試劑盒(批號：20221108)均購自南京建成生物工程研究所。

1.2 試驗設(shè)計與日糧

試驗在江蘇現(xiàn)代肉羊產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系太倉推廣示范基地東林生態(tài)養(yǎng)殖專業(yè)合作社進行。選擇4月齡健康湖羊45只，體重(18.60±0.62)kg，隨機分為3組，每組3個重復，每個重復5只。對照組飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧；試驗A組飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧+10%膨化亞麻籽；試驗B組飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧+5%膨化亞麻籽+5%微藻粉。基礎(chǔ)日糧由精料補充料和粗飼料組成，膨化亞麻籽和藻粉在精料補充料中添加。基礎(chǔ)日糧配方和營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎(chǔ))

每日定量飼喂基礎(chǔ)日糧，粗飼料自由采食，自由飲水，每日清理食槽，打掃羊舍，保持羊舍清潔衛(wèi)生，通風狀況良好。常規(guī)飼養(yǎng)管理和免疫。

1.3 樣品采集

樣品采集前1 d，對試驗羊進行半天禁食處理，第2 天早上空腹頸靜脈采血5 mL，置于含有無抗凝劑成分的一次性真空采血管內(nèi)。經(jīng)過120 min，血液自然凝固，3 000 r/min離心15 min，吸取上層血清，存放于-20 ℃冰箱中待用。

待試驗結(jié)束，各組隨機選取6只湖羊進行屠宰試驗。立即對左側(cè)胴體背最長肌取樣，通過磷酸鹽緩沖液于4 ℃下充分漂洗處理，裝袋，編號，液氮速凍，于-20 ℃冰箱凍存，用以檢測肌肉中脂肪酸的含量。

1.4 測定指標與方法

1.4.1 抗氧化指標

測定血清中GSH-Px、SOD、MDA、H2O2含量，相關(guān)操作參考試劑盒說明書，檢測機構(gòu)為南京邁博昊成公司。

1.4.2 肌肉脂肪酸含量

委托有資質(zhì)第三方公司浙江國正檢測技術(shù)有限公司進行測定，根據(jù)GB 5009.124—2016 《食品安全國家標準 食品中脂肪酸的測定》，在背最長肌樣品解凍后，提取肌肉脂肪酸，經(jīng)由氣相色譜儀(GC-2014C型，島津)測定肌肉內(nèi)24類FA含量。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

由Excel 2013完成數(shù)據(jù)庫的構(gòu)建，數(shù)據(jù)統(tǒng)計由SPSS 24.0完成，顯著性分析所用方法為One-way ANOVA(單因素方差分析)，LSD法開展組間多重對比，試驗數(shù)據(jù)以“平均數(shù)±標準誤”表示，P<0.05為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧中添加膨化亞麻籽和微藻對湖羊血清抗氧化指標的影響

由表2可以看出，飼糧中添加膨化亞麻籽和微藻顯著影響湖羊血清內(nèi)GSH-Px、SOD、H2O2和MDA指標。與對照組相比，試驗A組GSH-Px活性顯著下調(diào)28%(P<0.05)，試驗B組下調(diào)18%(P>0.05)；試驗A組和B組SOD活性分別顯著下調(diào)了19%和20%(P<0.05)；H2O2含量分別顯著增加了44%和21%(P<0.05)；MDA含量分別顯著增加79%和45%(P<0.05)。

表2 飼糧中添加膨化亞麻籽和微藻對湖羊血清抗氧化指標的影響

2.2 飼糧中添加膨化亞麻籽和微藻對湖羊肌肉脂肪酸組成的影響

由表3可以看出，飼糧中添加膨化亞麻籽和微藻對湖羊背最長肌中n-3 PUFA組成產(chǎn)生較大差異。與對照組相比，試驗A組和B組湖羊背最長肌中n-3 PUFA含量顯著提高，分別提高1.14、3.33倍(P<0.05)，顯著降低n-6/n-3 PUFA比值，分別降低48%和82%(P<0.05)；在ALA含量上，試驗A組和B組分別上調(diào)了116%(P<0.05)和21%(P<0.05)；試驗B組EPA和DHA顯著提高，分別提高了3.91、30.57倍(P<0.05)。同時，添加膨化亞麻籽和微藻對肌肉中飽和脂肪酸(棕櫚酸、十七烷酸和硬脂酸)產(chǎn)生不同程度影響。

表3 飼糧中添加膨化亞麻籽和微藻對湖羊肌肉脂肪酸組成的影響 %

3 討論

3.1 飼糧中添加膨化亞麻籽和微藻對湖羊血清抗氧化指標的影響

3.2 飼糧中添加膨化亞麻籽和微藻對湖羊肌肉脂肪酸組成的影響

湖羊在國家一級保護地方畜禽品種之列，屬于稀有白色羔皮羊品種，其所具備的優(yōu)良性能包括早熟、改良后產(chǎn)肉性能理想、四季發(fā)情每胎多羔、生長發(fā)育迅速、泌乳性能好等優(yōu)點。羊肉內(nèi)含幾十種FA，含油酸量最大，棕櫚酸、硬脂酸、亞油酸、豆蔻酸、花生四烯酸、棕櫚油酸和十七烷酸次之，上述FA含量皆在1%以上，其中多數(shù)為PUFA。在含量1%以下的脂肪酸中，α-亞麻酸含量最高。日糧的脂肪酸組成直接影響其肌肉脂肪酸組成，李晨萱等[16]研究表明，與添加大豆油相比，添加棕櫚油、棉籽油或豬油顯著增加肉雞腿肌飽和脂肪酸含量，顯著降低肉雞胸肌和腿肌多不飽和脂肪酸含量。Wang等[17]研究發(fā)現(xiàn)，TMR日糧缺乏α-亞麻酸是引起其脂肪代謝和羊肉脂肪酸組成變化的主要原因之一。因此，通過補充富含α-亞麻酸的亞麻油，對改善舍飼絨山羊羊肉脂肪酸組成具有重要的意義。但是，亞麻油的補充對瘤胃發(fā)酵、微生物區(qū)系、纖維降解和生產(chǎn)性能可能產(chǎn)生負面影響，這會降低其對動物產(chǎn)品脂肪酸組成的改善效果，并且在生產(chǎn)中的使用也受到了一定限制。

目前，各國及相關(guān)組織對n-6/n-3 PUFA比值的推薦值不盡相同，世界衛(wèi)生組織(WHO)與聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)的推薦值為(5～10)∶1，加拿大推薦值為6.25∶1，中國營養(yǎng)學會推薦值為(4～6)∶1。Artemis[18]研究發(fā)現(xiàn)，不同脂肪酸只有在適宜的n-6/n-3 PUFA 范圍內(nèi)才能發(fā)揮有益機體健康的作用。魏永生等[19]研究表明，當前，我國人民食用植物油主要有大豆油、花生油、菜籽油和玉米胚芽油，其在FA組成方面，n-6 PUFA系列的亞油酸水平較高，可達脂肪酸總量的一半以上，從而導致n-6/n-3 PUFA 比值嚴重超出中國營養(yǎng)學會推薦水平。羊肉作為膳食FA的一大來源，其FA構(gòu)成的合理性極大有助于人類健康。本試驗通過在湖羊飼糧中添加膨化亞麻籽，將n-6/n-3 PUFA比值降至WHO與FAO的推薦范圍；通過添加膨化亞麻籽+海藻粉組合方式，將n-6/n-3 PUFA比值降至遠遠低于中國營養(yǎng)學會推薦范圍。

綜上，飼糧中適當添加亞麻籽與微藻，顯著影響湖羊血清抗氧化活性，且可提高肌肉內(nèi)n-3 PUFA水平，下調(diào)n-6/n-3 PUFA比例。建議生產(chǎn)實際中亞麻籽和微藻混合添加效果更優(yōu)，各自比例5%為宜。