嬰幼兒配方乳粉中維生素檢測關鍵點的探究

劉寧　侯廣月　周莉莉　杜營　孔寒　張笑珊

關鍵詞：嬰幼兒配方乳粉，維生素，檢測

DOI編碼：10.3969/j.issn.1002-5944.2024.01.037

0 引言

母乳是嬰兒最理想的食物，母乳中脂肪酸、乳糖、水、氨基酸的配比更適合嬰兒的消化，還能將母體的抗體傳遞給嬰兒，提高嬰兒的免疫力。從各方面看母乳優于配方奶粉，但母乳喂養會因為各種原因停止或中斷。嬰幼兒配方乳粉便是人類“模擬母乳”的偉大發明。但由于一些無良商家造假謀利、產品保存環境不當、運輸過程不當等原因，會使乳粉產生如營養成分含量不達標、微生物指標不合格、生物毒素超標等問題。不合格的嬰幼兒配方乳粉會產生極壞的影響。2008年“三鹿奶粉事件”因含有化工原料三聚氰胺，導致食用奶粉的嬰兒患上腎結石，此事件使中國國民長期不敢食用國產奶粉；2020年“郴州奶粉事件”以固體飲料代替配方奶粉，導致嬰兒嚴重營養不良。這些事件警示我們，嬰幼兒配方乳粉的營養成分和有害物質檢測的準確性至關重要。本文對嬰幼兒配方乳粉中維生素的檢測標準、種類、功能作用進行論述。結合日常的檢測經驗，概括了維生素檢測難點，提出解決方法并根據參考文獻，延伸出維生素的優化檢測方法。以期為進一步研究嬰幼兒配方乳粉中的維生素提供思路。

1 我國嬰幼兒配方乳粉的標準現狀

1.1 嬰幼兒配方乳粉的國家標準

我國于1983年發布首個嬰幼兒配方乳粉的行業標準，與國外的相關研究相比起步較晚，直到1997年發布《嬰幼兒配方粉及嬰幼兒補充谷粉通用技術條件》，我國有關嬰幼兒配方乳粉的標準才達到國際水平。目前，使用2021年最新發布的GB 10765-2021、GB 10766-2021、GB 10767-2021分別對0～6、6～12、12～36月齡嬰幼兒食用配方食品的原料、感官、營養成分、污染物限量、真菌毒素限量、微生物限量進行了要求，其中營養成分包括必需和可選擇成分兩大類。必需成分有蛋白質、脂肪、碳水化合物、維生素、礦物質；可選擇成分有牛磺酸、葉黃素等，生產企業在符合國家相關規定下可自行決定是否添加。

必需成分對嬰兒的生長發育至關重要。蛋白質、脂肪與碳水化合物為生命體提供了80%以上的能量，是生命體的主要供能物質。維生素和礦物質雖然不提供能量，但在維持細胞的生長和正常代謝、生理功能上具有重要作用[1]。不同維生素在人體中發揮不同的作用，缺乏時會出現不同的癥狀，詳見表1。

1.2 嬰幼兒配方乳粉的檢測標準

維生素可分為脂溶性維生素和水溶性維生素兩大類。脂溶性維生素包括維生素A、D、E、K，攝入過多，會引起積累中毒；水溶性維生素包括維生素C和B族維生素，會隨尿液排出，過量攝入對生物體不會產生危害。2023年國家食品安全監督抽檢實施細則對13種維生素項目的相關檢測方法做出規定，詳見表1。

2 嬰幼兒配方乳粉中維生素的檢測難點與分析

嬰幼兒配方乳粉生產工藝主要分為干法、濕法和干濕法復合三種工藝。與干法工藝相比較，濕法工藝生產的奶粉源頭可控、營養均衡，因此市場上的產品大多采用濕法工藝。李琳瑤等[5]通過實驗對嬰幼兒配方乳粉中維生素的衰減進行了分析，發現光照、溫度、pH等條件對維生素的穩定性影響較大。因此實驗過程需要控制好這些環境因素。從表1中可以看出目前國家監管中檢測維生素A、D、E、K1、B1、B2、B6和煙酸采用高效液相色譜技術進行。綜合日常檢測過程，本文重點對上述8種維生素的檢測關鍵點進行研究。

2.1 脂溶性維生素的檢測難點與分析

脂溶性維生素實驗過程萃取復雜，條件要求嚴格，主要問題是回收率差、檢測結果低；在檢測時，注意以下問題：（1）檢測維生素A、D、E時，針對回收率低、檢測結果低的問題。采取實驗前做好標液標定、皂化后加標提高回收率、適當調整皂化液使用量和皂化時間來解決問題[6-7]。本文在實驗過程中發現VA標準溶液的穩定性較差。VD與VE的標液相對穩定。乳粉中不含淀粉不需酶解直接皂化，乳粉中VA的添加形式大多數是是醋酸視黃脂，當標準品是視黃醇時，質量控制可以選擇在皂化后添加，可以有效將VA的回收率從65%提高到80%，VD、VE也可使用此方法提高回收率；筆者選擇15 mL氫氧化鉀來進行皂化。相應的，在洗滌步驟需要清洗4次，才能至中性，這有效保護了色譜柱，延長色譜柱的使用壽命。

（2）針對維生素K1回收率的問題，筆者根據標準和文獻資料[8]，檢測過程中使用脂肪酶0.6 g、酶解時間2 h，1.0 g K2CO3進行皂化反應并使用飽和氯化鈉溶液水洗一次，此前處理能達到回收率80%～90%；流動相不再使用對人體有害的四氫呋喃，使用含有0.03%冰醋酸、1.5 g/L氯化鋅、0.5 g/L無水醋酸鈉的100 %甲醇，峰型理想，分離度較好。

2.2 水溶性維生素的檢測難點與分析

水溶性維生素檢測過程中，在調節pH時容易出現基質中含有的營養素與目標物發生反應，導致實驗中目標物含量偏低；標準方法簡單，而樣品基質復雜，容易存在雜質干擾。在檢測時，要注意以下問題：

（1）實驗過程中，與標準相比，本文結合文獻資料[9]在檢測維生素B1的過程中使用氫氧化鈉調節pH為5～6，使用1.0 g/L的堿性鐵氰化鉀衍生液來進行衍生。此步驟可將樣品回收率提高到85%；維生素B2的檢測按照標準方法，當檢測羊奶粉時需添加酸性磷酸酶，此步驟能提高維生素提取率。

（2）煙酸在反向色譜柱中保留時間靠前，雜質干擾目標峰，標準中通過調節pH來沉淀蛋白質。結合文獻資料[10]，本文采用標準的前處理方法，使用分離度更高的Atlantis T3（5μm 4.6×250 mm）色譜柱，使用甲醇和20 mmol/L乙酸銨為流動相，梯度洗脫。結果表明煙酸的峰型好，且能避開前3分鐘的雜質峰，分離度較好。

（3）國標方法中維生素B6實驗過程較簡單，目標峰附近干擾較多。參考標準和文獻資料[11]，本文使用標準方法對樣品進行前處理，優化色譜條件選用Atlantis T3（5μm 4.6×250 mm）色譜柱，流動相使用甲醇和20 mmol/L乙酸銨梯度比例，最終目標物峰型好、分離度較好且能避開前3分鐘的雜質峰，可滿足對嬰幼兒配方乳粉中維生素B6的定性定量分析。

3 維生素新檢測方法的探討

在檢測維生素A、D、E時，國家標準方法操作步驟復雜，實驗結果不夠理想，檢測行業一直在尋找更方便、高效的檢測方法。目前主要有二維液相色譜法[12]和在線固相萃取-二維液相色譜法[13]這兩種。二維液相色譜法與標準方法相比簡化了VD的正向半制備過程并能同時檢測維生素A、E，方法簡便、靈敏性高、準確度高。在線固相萃取-二維液相色譜法在二維液相色譜法的基礎上，簡化了國標中的提取、洗滌和濃縮步驟，樣品皂化后即可上機檢測，此法大大減少了實驗過程中的損失，提高了樣品回收率。

4 總結

本文對嬰幼兒配方乳粉中常見的維生素的種類、功能、缺乏危害及檢測關鍵點進行了研究。現階段，嬰幼兒配方乳粉中維生素的測定還存在許多難題。相信隨著科學技術的進步和研究人員的不斷努力，終能攻克難關，實現嬰幼兒配方乳粉中維生素準確、快速測定，為嬰幼兒健康成長保駕護航。

作者簡介

劉寧，本科，工程師，研究方向為食品檢驗檢測。

侯廣月，通信作者，理學博士，高級工程師，主要從事產品質量檢驗與科研工作。

（責任編輯：袁文靜）