食品中菌落總數能力驗證結果分析

摘 要：目的：為了加強食品中菌落總數檢驗能力，促進實驗室內部質量控制，本實驗室參加了中國檢驗檢疫科學研究院測試評價中心組織的ACAS-PT1582（2023）食品中菌落總數計數能力驗證。方法：依據《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數測定》（GB 4789.2—2022）和能力驗證作業指導書對兩個樣品進行檢測。結果：樣品A812菌落總數為1.4×103 CFU·mL-1，樣品Y109菌落總數為5.0×103 CFU·mL-1。經評價，兩個考核樣品的|Z|值均小于2，結果滿意。結論：實驗室具備食品中菌落總數的檢測能力。

關鍵詞：能力驗證；菌落總數；計數；食品

Analysis of Validation Results for Total Bacterial Count in Food

YUAN Weidao， FENG Chenyun， CHEN Caixia， WANG Xueyin

（Hainan Academy of Inspection and Testing， Haikou 570203， China）

Abstract： Objective： In order to strengthen the ability to detect total bacterial count in food and promote internal quality control in the laboratory， our laboratory participated in the ACAS-PT1582 （2023） validation of the ability to count total bacterial count in food organized by the Testing and Evaluation Center of the Chinese Academy of Inspection and Quarantine Sciences. Method： Two samples were tested according to the GB 4789.2—2022 and the capability verification operation manual. Result： The total colony count of sample A812 was 1.4×103 CFU·mL-1， and the total colony count of sample Y109 was 5.0×103 CFU·mL-1. After evaluation， the |Z| values of both assessment samples are less than 2， and the results are satisfactory. Conclusion： The laboratory has the ability to detect the total number of bacterial colonies in food.

Keywords： proficiency testing; aerobic plate count; count; food

隨著我國居民生活質量的持續提高，食品安全與衛生問題逐漸成為了公眾關注的焦點[1-2]。在此背景下，食品檢驗工作面臨著更高的要求和更嚴峻的挑戰，這要求相關檢測單位必須更加努力提升食品檢驗的準確性和可靠性，確保公眾的飲食安全與健康。在食品檢測領域，菌落總數是食品衛生狀況的重要評估指標，反映了食品是否符合衛生要求及受細菌污染的程度[3-6]。

為驗證實驗室具備相關技術能力[7]，本實驗室積極參加了ACAS-PT1582（2023）食品中菌落總數檢測能力驗證，在實驗過程中加入質控樣品，通過對不同人員和方法的檢測結果進行比較分析，確保了實驗結果的準確性。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

中國檢驗檢疫科學研究院測試評價中心（ACAS）提供了兩份能力驗證樣品，原始編號分別為23-A812和23-Y109，在本實驗中分別用A812和Y109表示。此次能力驗證樣品是人工污染的食品樣品，采用西林瓶真空包裝，鋁蓋密封。菌落總數質控樣品（QC-FD-001），來自ACAS。氯化鈉，汕頭市西隴科學有限公司；菌落總數測試片和平板計數瓊脂培養基（PCA），廣東環凱微生物科技有限公司。

1.2 儀器與設備

PL-1001L電子天平（梅特勒）；BSC-1000IIB2生物安全柜（蘇州安泰）；HVA-85高壓蒸汽滅菌器（HIRAYAMA）；LRH系列生化培養箱（上海一恒）。

1.3 實驗方法

1.3.1 檢測方法

依照ACAS-PT1582（2023）食品中菌落總數檢測能力驗證作業指導書和《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數測定》（GB 4789.2—2022）進行檢測。

1.3.2 樣品前處理

在生物安全柜內開啟西林瓶，立即加入5 mL生理鹽水進行再水化，待溶解后，將液體吸出至無菌瓶中，并用余下的55 mL生理鹽水清洗西林瓶內壁2～3次，將全部液體收集到無菌瓶中，即為待測樣品原液。

1.3.3 樣品稀釋

從樣品原液中吸取1 mL液體至9 mL稀釋液中，充分混勻，即為1∶10的樣品勻液。按此方法分別制備1∶100、1∶1 000、1 ∶10 000的樣品勻液。包括樣品原液，每個稀釋度分別吸取1 mL樣品勻液于無菌培養皿中，每個梯度做2個平行樣[8]。同時分別吸取1 mL稀釋液加入2個無菌平皿中，作為空白對照。培養基融化并冷卻至46 ℃左右，每個平皿傾注培養基約20 mL，轉動并使其混合均勻。

1.3.4 培養

按照GB 4789.2—2022要求，待瓊脂凝固后，在36 ℃培養箱中培養48 h，觀察并記錄結果。紙片法操作參照上述稀釋方法，分別吸取不同稀釋度的樣品勻液1 mL，裝入2個測試紙片中，正面向上水平放置在36 ℃環境中培養24 h，取出紙片進行菌落總數計數，計算平均值[9]。

2 結果與分析

2.1 菌落總數結果對比

檢驗人員A獨立采用平板計數法和紙片法測定菌落總數，結果見表1。可以看出，2種檢測方法所得結果基本一致，說明紙片法在菌落總數能力驗證檢測過程中同樣適用。

2.2 不同人員比對結果

為了確保檢驗結果的客觀準確性，由3位檢驗人員單獨完成實驗。通過比較不同人員的檢測結果，有助于減少可能存在的人員操作誤差，確保檢測工作的規范性和計數結果的準確性。人員對比實驗結果見表2。可以看出，菌落總數計數結果與稀釋度倍數成反比，且相同稀釋度下的兩個平板菌落數基本接近，這表明實驗結果相對準確。空白對照無菌落生長，說明實驗過程沒有受到污染，檢測結果是有效的。

2.3 能力驗證結果與分析

紙片法菌落總數計數結果略高于平板計數法，因此最終上報的數據以平板計數法為準。

在實驗中采用了3人獨立操作，因此每個樣品都有3個檢測結果，但3個結果之間差異不大，最終以人員A的檢測結果作為能力驗證的上報結果。則樣品A812的菌落總數為1.4×103 CFU·mL-1，樣品Y109的菌落總數為5.0×103 CFU·mL-1。具體見表3。

綜合上述檢測結果可知，3個人員質控樣品的檢驗結果均在區間內（質控樣品QC-FD-001菌落總數的特征值區間為950～3 500 CFU·mL-1），人員比對結果滿意，數據可靠。從能力驗證組織方提供的報告中獲悉，在菌落總數項目中，全國共有92家實驗室參與，其中78家結果滿意，滿意率達到了84.8%。每個實驗室收到兩個菌落總數樣品，全國共184個樣品，滿意結果數164個，滿意率為89.1%。本實驗室樣品A812和Y109的Z值分別為-1.2和-1.1，結果評價均為滿意，表明本實驗室具備檢測食品中菌落總數的能力[10]。

3 結論與討論

雖然此次能力驗證結果均為滿意，但也存在一些不足之處，如兩個樣品的菌落總數檢測結果Z值均偏低、平板上菌落分布不夠均勻、計數時發現霉菌蔓延覆蓋等。影響能力驗證結果準確性的因素很多，但人為因素尤為關鍵。微生物檢驗工作非常注重人員操作規范性，應當加強相關培訓，提高檢驗檢測人員的操作技能，同時也要從思想上高度重視每一次微生物檢驗工作。為了不斷改進和提高檢驗工作質量，確保檢驗數據的準確真實，應對影響檢驗結果的人員、設備、材料、檢測方法、環境條件以及測量因素等進行全面控制[11-12]。

通過參加能力驗證，不僅可以加強實驗室質量控制，增進客戶信任、提升實驗室核心競爭力，對實驗室的生存和發展也具有長遠的現實意義[13-16]。實驗室應該積極參與、認真對待每次能力驗證，并對能力驗證結果進行總結，不斷提升實驗室的管理水平和檢測能力[17-18]，確保實驗室檢測結果的真實可靠，從而更好地為人們的食品安全保駕護航。

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作者簡介：袁維道（1985—），男，陜西興平人，碩士，工程師。研究方向：藥品、食品、化妝品微生物檢驗。