洛索洛芬鈉膠囊溶出曲線研究方法的建立及實踐

陳雨蕉 付金鳳 許 直 劉曉強

洛索洛芬鈉為苯丙酸類非甾體消炎藥，具有較好的鎮痛消炎作用，臨床多用于腰痛癥、類風濕性關節炎、肩關節周圍炎、骨性關節炎、頸肩腕綜合征和手術后、外傷后、拔牙后的鎮痛消炎，以及急性上呼吸道炎的解熱鎮痛[1-3]。其具有起效快（口服30 min內血藥濃度即達峰值）、安全有效（臨床鎮痛效果明顯，不良反應小且少）等特點，臨床應用廣泛[4-5]。膠囊劑較片劑溶出時間更短，對胃腸道刺激小，且服用時可以避免藥物的特殊氣味對患者造成的影響，因此膠囊劑臨床應用廣泛。體外溶出曲線常用來預測體內的崩解、溶出和吸收情況，同時藥物體外溶出行為能夠在一定程度上反映制劑的質量[6-7]。同時采用合理的體外溶出曲線方法可以分析不同生產企業間制劑處方、工藝以及原輔料質量差異，有助于更全面剖析市售藥品質量[8-9]。

1 儀器、試劑與方法

1.1 儀器

美國 LOGAN 860DLA型自動溶出儀（12杯位），METTLER TOLEDO XP205 型電子分析天平，島津LC-20AD型高效液相色譜儀。

1.2 試劑與藥品

冰醋酸、鹽酸、醋酸鈉、磷酸二氫鉀、氫氧化鈉和三乙胺均為分析純；甲醇為色譜純；溶出介質均采用經脫氣裝置41 ℃真空脫氣30 min的純化水。針頭過濾器（水系）：材質：PES；規格：0.45 μm×25 mm；來源：Agilent Technologies。洛索洛芬鈉，中國食品藥品檢定研究院，批號：100638-202104，含量：87.5%。

洛索洛芬鈉膠囊，生產企業A，批號：221211、220813；生產企業B，批號：221104；生產企業C，批號：2212022。

1.3 方法

1.3.1溶出方法方法a：照溶出度與釋放度測定法（中華人民共和國藥典2020年版四部通則0931第一法）測定，以水900 ml為溶出介質，轉速為100轉/min，依法操作，經5、10、15、20、30、45、60 min時，取溶出液濾過，取續濾液作為供試品溶液；方法b：照溶出度與釋放度測定法（中國藥典2020年版四部通則0931第一法）測定，以水900 ml為溶出介質，轉速為50轉/min，依法操作，經5、10、15、20、30、45、60 min時，取溶出液濾過，取續濾液作為供試品溶液；方法c：照溶出度與釋放度測定法（中華人民共和國藥典2020年版四部通則0931第二法）測定，以水900 ml為溶出介質，轉速為50轉/min，依法操作，經5、10、15、20、30、45、60 min時，取溶出液濾過，取續濾液作為供試品溶液。

取生產企業A所生產的洛索洛芬鈉膠囊（批號：221211）進行預實驗（取12粒平行進行實驗），依據預實驗結果選擇合適的溶出條件依次取生產企業A、B、C所生產的洛索洛芬鈉膠囊（生產企業A，批號：220813；生產企業B，批號：221104；生產企業C，批號：2212022）依次在介質pH1.0鹽酸溶液、pH4.0醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液、水中分別進行實驗。

1.3.2液相方法以Shim-Nex CS C18（4.6×150 mm，5 μm）為色譜柱，流動相為甲醇-水-冰醋酸-三乙胺（600∶400∶1∶1），檢測波長為222 nm，柱溫為35 ℃，流速為1.0 ml/min，進樣量為20 μl。

1.3.3 對照品溶液的制備取洛索洛芬鈉對照品約17 mg，精密稱定，置100 ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 ml置50 ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。

1.3.4溶出介質的配制方法1）pH1.0鹽酸溶液：量取鹽酸9 ml溶解于1 000 ml脫氣純化水中，攪勻，即得。2）pH4.0醋酸鹽緩沖液：精密稱取乙酸鈉1.22 g，加水溶解，加入2 mol/L醋酸溶液20.5 ml，加水稀釋至1 000 ml，攪拌溶解，搖勻，即得。3）pH6.8磷酸鹽緩沖液：取0.2 mol/L磷酸二氫鉀溶液250 ml，加0.2 mol/L氫氧化鈉溶液118 ml，用水稀釋至1 000 ml，搖勻，即得。4）水：取純化水，脫氣，即得。

2 結果

2.1 預實驗結果

生產企業A所生產的洛索洛芬鈉膠囊在方法a、方法b、方法c中均在15 min時溶出度達平臺期，且方法a、方法b、方法c在5 min時溶出度的相對標準偏差（RSD）值均較大，其中方法b在5 min、10 min及15 min時溶出度的RSD值均較大。見圖1。

圖1 預實驗結果

2.2 各廠家溶出曲線

生產企業A所生產的洛索洛芬鈉膠囊在介質pH1.0鹽酸溶液、pH4.0醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液、水中溶出量均在15 min時達平臺期，其中在介質pH4.0 醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液、水中溶出曲線基本一致，在介質pH1.0鹽酸溶液中溶出量受限。見圖2。

圖2 洛索洛芬鈉膠囊溶出曲線（生產企業A）

生產企業B所生產的洛索洛芬鈉膠囊在介質pH1.0鹽酸溶液、pH4.0醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液、水中累計溶出量依次上升，在介質pH6.8磷酸鹽緩沖液、水中15 min時達平臺期，在介質pH4.0醋酸鹽緩沖液20 min時達平臺期，在介質pH1.0鹽酸溶液中溶出量明顯受限。見圖3。

圖3 洛索洛芬鈉膠囊溶出曲線（生產企業B）

生產企業C所生產的洛索洛芬鈉膠囊在介質pH1.0鹽酸溶液、pH4.0醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液、水中溶出量均在15 min時達平臺期，其中在介質pH4.0醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液、水中溶出曲線基本一致，在介質pH1.0鹽酸溶液中溶出量輕微受限。見圖4。

圖4 洛索洛芬鈉膠囊溶出曲線（生產企業C）

3 討論

本溶出曲線方法的確定基于多個因素的考慮，具體如下。1）基于化合物本身特性：洛索洛芬屬生物藥劑學分類系統（BCS）Ⅰ類藥物，即高溶解性-高滲透性藥物，因此，選擇取樣時間點依次為5、10、15、20、30、45、60 min。2）基于各制劑自擬標準及其實驗結果：所涉及的3家生產企業生產的洛索洛芬鈉膠囊的溶出度檢驗標準分別為1.漿法，以水900 ml為溶出介質，轉速為50轉/mim，依法操作，經30 mim時，取續濾液；2.漿法，以水1 000 ml為溶出介質，轉速為100轉/mim，依法操作，經45 mim時，取續濾液；3.籃法，以水600 ml為溶出介質，轉速為75轉/mim，依法操作，經30 mim時，取續濾液。同時參考國家藥品監督管理部門發布的普通口服固體制劑溶出度試驗技術指導原則等確定了洛索洛芬鈉膠囊溶出曲線研究的3種方法。洛芬鈉膠囊在筆者所采用的3種溶出條件下均能迅速釋放，到達平臺期的時間均約為15 min，無明顯差異，基于上述實驗結果，上述3種溶出條件均可以選擇。3）基于該藥物的適應證；該藥物的適應證為類風濕性關節炎、骨性關節炎、腰痛癥、肩周炎、頸肩臂綜合征的消炎和鎮痛；手術后、外傷后及拔牙后的鎮痛和消炎；急性上呼吸道炎的解熱和鎮痛[10-11]。合并有上述癥狀的患者其生理功能一定程度受影響，100轉/min的轉速不符合臨床實際，故考慮舍去條件a。4）基于洛索洛芬鈉片參比制劑的檢驗標準：溶出條件為照溶出度測定法（中華人民共和國藥典2010年版二部附錄XC第二法），以水900 ml為溶出介質，轉速為50轉/min，依法操作。目前洛索洛芬鈉膠囊尚未公布其參比制劑，片劑和膠囊均屬于口服固體制劑，體內藥物代謝動力學過程具有一定的相似性，采用與洛索洛芬鈉片參比制劑相同的溶出條件可以比較市售洛索洛芬鈉膠囊之間的質量差異，也可以分析其與原研制劑之間的質量差異。基于上述多種因素，最終確定的溶出曲線條件為方法c。

上述3家生產企業生產的洛索洛芬鈉膠囊在介質水及pH6.8磷酸鹽緩沖液中均溶出迅速，在15 min時均迅速達到平臺期。生產企業A及生產企業C生產的洛索洛芬鈉膠囊在介質pH4.0醋酸鹽緩沖液中溶出情況與介質水及pH6.8磷酸鹽緩沖液一致，但生產企業B生產的洛索洛芬鈉膠囊在介質pH4.0醋酸鹽緩沖液中溶出速率低于介質水及pH6.8磷酸鹽緩沖液，同時上述3家生產企業生產的洛索洛芬鈉膠囊在介質pH1.0鹽酸溶液中溶出量均受限，其中生產企業B生產的洛索洛芬鈉膠囊累計溶出量受限最嚴重，這與洛索洛芬鈉片參比制劑在4種溶出介質中的溶出行為基本一致相差較遠。基于上述實驗數據并結合該制劑的服用方式“飯后服用”，生產企業A及生產企業C生產的洛索洛芬鈉膠囊可能質量更優。

但須指出，上述3家企業所生產的洛索洛芬鈉膠囊在介質pH1.0鹽酸溶液、pH4.0 醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液、水中達到平臺期前各取樣時間點溶出量RSD值均較大，提示上述3家企業樣品在達到平臺期前各取樣時間點溶出量批內差異較大，建議上述生產企業就各自產品在介質pH1.0鹽酸溶液中溶出受限以及達到平臺期前各取樣時間點溶出量批內差異較大開展相關研究，采用更優質的原輔料，優化制劑處方及工藝，進一步提升產品質量。

因國家藥品監督管理部門目前尚未公布洛索洛芬鈉膠囊的參比制劑，且洛索洛芬鈉片原研生產廠家日本第一三共制藥有限公司僅持有洛索洛芬鈉片、洛索洛芬鈉顆粒以及洛索洛芬鈉貼劑3個劑型，在筆者查詢的多種國外藥典版本中均未查詢到洛索洛芬鈉膠囊這一劑型的檢驗標準。同時，市售洛索洛芬鈉膠囊溶出度標準均不一致，且彼此間差異顯著，最終溶出曲線方法的確定參考洛索洛芬鈉片參比制劑的溶出度方法。因此，該方法具有一定的局限性。