微酸性電解水對空腸彎曲菌的殺滅特性及機制

宋欣坤，龐柳欣，牛玲玲，岳 婷，牛際涵，張春玲

（西北農林科技大學食品科學與工程學院，陜西 楊凌 712100）

空腸彎曲菌是革蘭氏陰性微需氧菌，主要存在于家禽和野禽體內，是一種人畜共患的細菌病原體，會引發腹瀉、流產、不育、乳房炎以及傳染性肝炎等疾病[1]。人類可通過與動物及其生活環境接觸，食用未煮熟的肉類、農產品或飲用受污染的乳品、水等感染空腸彎曲菌。空腸彎曲菌具有耐藥性，在不利環境中會進入可存活但不可培養狀態，難以被完全殺滅，存在食品安全隱患[2-3]。空腸彎曲菌可引發人類腸胃炎、發燒、血便等，甚至可引發米勒-費希爾綜合征和格林-巴利綜合征[4]。世界衛生組織已將空腸彎曲菌定義為常見的食源性致病菌之一[5]。通常屠宰多采用物理或化學方法去污除菌，主要包括身體清潔、物理和化學脫毛以及用熱水或化學物質（次氯酸鈉）漂洗等傳統方法，不僅存在清潔程度較低的缺陷，還可能會對禽肉的質量產生負面影響。所以，進行補充干預去污十分必要，如脈沖光、超聲波、冷大氣等離子體、臭氧、二氧化氯、電解水等補充干預手段，它們具有毒性更低、形式更穩定、對產品質量影響更小等優點，是屠宰加工領域替代次氯酸鈉等傳統凈化方法的候選方法，上述部分方法在實際應用中仍存在商業化難、能耗多等缺陷，而電解水由于制取方便、綠色高效的特點受到廣泛關注。

微酸性電解水（slightly acidic electrolyzed water，SAEW）是在無隔膜電解槽中電解稀鹽或稀鹽酸溶液而生成的具有特殊理化性質的水溶液[6]。SAEW的pH值為5.0～6.5，有效氯成分主要是次氯酸（HClO），其殺菌能力是ClO-的80～150 倍。SAEW具有殺菌高效廣譜、腐蝕性低、安全環保、pH值更加溫和等優點，已在食品行業中廣泛應用[7]。研究表明SAEW對大腸桿菌、單核細胞增生李斯特菌（以下簡稱單增李斯特菌）、金黃色葡萄球菌、蠟狀芽孢桿菌等多種食源性致病菌具有良好殺滅效果[8-11]。

本研究以空腸彎曲菌作為研究對象，考察SAEW對純培養空腸彎曲菌的殺滅效果，以及有機質對殺菌效果的影響，同時對SAEW殺滅多代空腸彎曲菌的效果進行評估，以確保SAEW殺菌方式的安全性；最后，對SAEW殺滅空腸彎曲菌的特性和機制進行研究，以期為SAEW對食品中空腸彎曲菌的殺滅提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

空腸彎曲菌（Campylobacter jejuni）ATCC 33560來源于美國模式菌株收集中心。

次氯酸鈉 天津市致遠化學試劑有限公司；哥倫比亞血瓊脂、脫纖維羊血、微需氧袋、培養罐 青島海博生物有限公司；牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）北京天勤一和生物科技有限公司；Live/Dead BacLight細菌細胞活性測定試劑盒L7012 美國賽默飛世爾科技公司；Bradford蛋白濃度測定試劑盒和ATP檢測試劑盒 上海碧云天生物技術有限公司；其他有機溶劑均為國產分析純。

1.2 儀器與設備

InfiniteTMM200 PRO酶標儀、victorX3多功能酶標儀瑞士帝肯集團公司；PTH027有效氯測量計 英國百靈達有限公司；FE28 pH/氧化還原電位（oxidation reduction potential，ORP）計 瑞士梅特勒-托利多儀器有限公司；Harmony-II SAEW生成設備 北京睿安德科技有限公司；Vortex-2渦旋儀 上海滬析實業有限公司；S-3400N場發射掃描電子顯微鏡 日本日立公司；DM5000B熒光顯微鏡 德國Leica公司；GHX-9050B-2細菌培養箱 上海福瑪實驗設備有限公司。

1.3 方法

1.3.1 SAEW的制備

本研究選用Harmony-II為電解水生成設備，制備pH值為5.0～6.5，有效氯質量濃度（available chlorine concentration，ACC）為10、20、30、40 mg/L和50 mg/L的SAEW，制備完成后立即檢測其理化指標。SAEW的ACC由有效氯測定儀測定；pH值和ORP由雙標度pH/ORP計測量。用相應ACC的NaClO溶液及無菌去離子水作為對照。本研究所用處理溶液的理化參數如表1所示。

表1 SAEW和NaClO溶液的理化指標Table 1 Physicochemical parameters of SAEW and NaClO solution

1.3.2 菌液制備

用無菌接種環將凍存管內的空腸彎曲菌接種于哥倫比亞血瓊脂上進行活化，42 ℃微需氧條件（5% O2、10%CO2和85% N2）培養48 h。挑取單菌落劃線于哥倫比亞血瓊脂平板，42 ℃微需氧條件下純化培養24 h。挑取單菌落于含有5%脫纖維羊血的Bolton肉湯中，42 ℃微需氧培養48 h后離心重懸，置于4 ℃保存備用。

1.3.3 SAEW對空腸彎曲菌的殺滅效果

分別將菌懸液與不同ACC（10、20、30、40 mg/L和50 mg/L）的SAEW按照1∶9（V/V）的比例混合處理1、2、5 min和10 min，以1∶1（V/V）的比例取反應液與5 g/L Na2S2O3溶液中和劑混合終止殺菌，涂布后置于42 ℃細菌培養箱中，微需氧條件培養48 h后用平板菌落計數法檢測空腸彎曲菌的存活率，使用NaClO和無菌去離子水作為對照。同時，取殺菌時間為2 min的樣品置于4 ℃保存，備用于后續實驗。

1.3.4 蛋白質對SAEW空腸彎曲菌殺滅效果的影響

參照邴珊[12]的方法，將BSA制成質量濃度為3、10 g/L及30 g/L的干擾物，4 ℃保存備用。取9 mL ACC為30 mg/L的SAEW處理1 mL菌懸液，處理后的菌液與不同質量濃度的BSA等比例混合，處理2 min；取9 mL ACC為10、20、30、40 mg/L和50 mg/L的SAEW處理1 mL菌懸液，處理后的菌液與10 g/L的BSA等比例混合，處理2 min；取9 mL ACC為30 mg/L的SAEW處理1 mL菌懸液，處理后的菌液與10 g/L的BSA等比例混合，處理不同時間（1、2、5、10 min）。以1∶1（V/V）的比例取反應液與5 g/L的Na2S2O3溶液中和劑混合終止殺菌反應，涂布置于42 ℃細菌培養箱中，微需氧條件培養48 h后計數，使用NaClO和無菌去離子水作為對照。

1.3.5 SAEW多代殺菌效果的測定

參照梁鐸[13]的方法，取菌液與10 mg/L SAEW按1∶9（V/V）比例混合，渦旋振蕩充分后終止殺菌。平板涂布后42 ℃微需氧培養48 h。計數后挑選稀釋度合適的平板，挑取菌落加入Bolton肉湯培養基，相同條件培養48 h，再次進行殺菌實驗。每次殺菌實驗為一代，重復此過程即為多代殺菌。結果以殺菌率表示，計算公式為：

1.3.6 SAEW處理對空腸彎曲菌細胞膜完整性的影響

參照Wang Yao等[14]的方法，使用Live/Dead BacLight細菌細胞活性測定試劑盒L7012進行熒光染色。將處理后的菌液離心、漂洗、重懸。加入3 μL 1∶1（V/V）混合的SYTO-9和碘化丙啶（propidium iodide，PI）染料，室溫避光孵育15 min，用熒光顯微鏡觀察并拍照。

1.3.7 掃描電子顯微鏡觀察細菌形態變化

參照Shi Chao等[15]的方法通過電子顯微鏡觀察細菌形態變化：將SAEW處理后的菌液離心，磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered saline，PBS）漂洗2 次，2.5%戊二醛溶液固定過夜，PBS漂洗3 次，不同體積分數（30%、50%、70%、80%、90%和100%）乙醇溶液梯度洗脫樣品。固定樣品，脫水后鍍金，通過掃描電子顯微鏡觀測拍照。

1.3.8 SAEW處理對空腸彎曲菌細胞膜損傷的影響

1.3.8.1 SAEW處理后空腸彎曲菌細胞內DNA的泄漏情況

參照Cao Shuo等[16]的方法測定細胞內DNA的泄漏：處理后菌液離心，PBS漂洗后收集上清液，過濾，使用多功能酶標儀在260 nm波長處測量濾液的光密度（OD260nm）值。

1.3.8.2 SAEW處理后空腸彎曲菌細胞內蛋白質的泄漏情況

采用Bradford蛋白濃度測定試劑盒測定細胞內蛋白質的質量濃度：處理后菌液離心，PBS漂洗后收集上清液，使用酶標儀在570 nm波長處測定OD570nm值。依據使用的樣品體積計算出蛋白質量濃度。

1.3.8.3 SAEW處理后空腸彎曲菌細胞內ATP的泄漏情況

參照Sánchez等[17]的方法測定細胞ATP濃度：處理后菌液在冰上超聲，離心后收集上清液置于冰上備用，使用ATP檢測試劑盒測定細胞內ATP含量，使用多功能酶標儀測定熒光強度。依據測定的標準曲線計算細胞內ATP的濃度。

1.4 數據處理

本研究的數據均是獨立實驗重復3 次獲得，并采用SPSS對數據進行統計學分析，以的形式表示數據（n＝3），采用Duncan’s ANOVA對結果進行顯著性分析比較（以P＜0.05表示差異顯著）。

2 結果與分析

2.1 不同ACC的SAEW對空腸彎曲菌的殺滅效果

采用不同ACC的SAEW和NaClO溶液對空腸彎曲菌進行2 min殺滅處理。由圖1可以看出，隨著ACC的增加，SAEW對空腸彎曲菌的殺滅效果逐漸增強，呈濃度依賴性。相同ACC時，SAEW處理后空腸彎曲菌的減少量顯著大于NaClO處理（P＜0.05），表明SAEW殺滅作用更強。有研究表明，ACC為20 mg/L的SAEW處理1 h或2 h后，空腸彎曲菌減少1.5～1.7（lg（CFU/g）），抑制作用顯著大于相同ACC的酸性電解水處理組[18]。Yang Gaoji等[19]研究也發現，相同ACC時，SAEW比NaClO對蠟樣芽孢桿菌的殺滅效果更好。對單增李斯特菌的殺滅研究中也發現與150 mg/L的NaClO溶液相比，ACC約為60 mg/L的SAEW具有相同或更高的殺菌功效[20]。

圖1 不同ACC的SAEW和NaClO對空腸彎曲菌的殺滅效果Fig.1 Bactericidal effects of SAEW and NaClO at different ACC levels on C.jejuni ATCC 33560

2.2 SAEW處理不同時間對空腸彎曲菌的殺滅效果

采用ACC為30 mg/L的SAEW對空腸彎曲菌分別進行1、2、5 min和10 min的處理，結果如圖2所示。隨著處理時間的延長，SAEW和NaClO對空腸彎曲菌的殺滅效果均逐漸增強，并且不同處理間具有顯著性差異（P＜0.05）。研究表明，ACC為60 mg/L的SAEW處理10 min后可以完全殺滅腸炎沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌和大腸桿菌[21]，并且SAEW對蠟樣芽孢桿菌的滅活效果在很大程度上取決于ACC水平和暴露時間以及菌株和生長條件[11]。在SAEW和NaClO處理1 min內空腸彎曲菌減少速度最快，分別減少了5.42（lg（CFU/mL））和4.72（lg（CFU/mL）），當處理時間為10 min時，SAEW處理和NaClO處理的空腸彎曲菌減少量均達到最大，分別為6.23（lg（CFU/mL））和5.22（lg（CFU/mL））。結果表明，相同處理時間條件下SAEW比NaClO的殺菌效果更好。

圖2 SAEW和NaClO處理不同時間對空腸彎曲菌的殺滅效果Fig.2 Bactericidal effects of treatment time of SAEW and NaClO treatments on C.jejuni ATCC 33560

2.3 蛋白質對SAEW殺滅空腸彎曲菌的影響

2.3.1 不同蛋白質量濃度SAEW對空腸彎曲菌的殺滅效果

在不同質量濃度BSA干擾下，采用ACC為30 mg/L的SAEW處理空腸彎曲菌2 min，結果如圖3所示。隨著蛋白質量濃度增加，SAEW對空腸彎曲菌的殺滅效果逐漸減弱，BSA為0 g/L時，SAEW處理組空腸彎曲菌減少量為5.72（lg（CFU/mL）），BSA為30 g/L時，SAEW處理組為3.41（lg（CFU/mL）），與BSA質量濃度為0 g/L時相比下降了40.38%，不同蛋白質量濃度對SAEW殺菌效果的影響有顯著差異（P＜0.05）。相同蛋白質量濃度下，NaClO處理組殺滅效果弱于SAEW處理組。有研究發現SAEW殺菌效果會隨著蛋白質濃度的增加而減弱[22]。Ni等[23]研究也發現，SAEW處理大腸桿菌、腸炎沙門氏菌和金黃色葡萄球菌的殺菌效率隨著ACC的增加而增加，隨著BSA質量濃度的增加而降低，并且增加蛋白質濃度可以加速SAEW的ACC的降低[24]。以上研究表明，蛋白質會顯著影響SAEW和NaClO的殺滅效果，蛋白質量濃度越高，SAEW的殺菌效果越差，因此在SAEW的實際應用中應降低接觸蛋白質的濃度，保證SAEW的殺滅效果。

圖3 不同蛋白質量濃度干擾下SAEW和NaClO處理對空腸彎曲菌的殺滅效果Fig.3 Bactericidal effects of SAEW and NaClO treatments on C.jejuni ATCC 33560 under different BSA concentration

2.3.2 蛋白質存在時不同ACC的SAEW對空腸彎曲菌的殺滅效果

在10 g/L蛋白質存在時，采用ACC分別為10、20、30、40 mg/L和50 mg/L的SAEW和NaClO溶液處理菌液2 min，結果如圖4所示。隨著ACC的增加，SAEW對菌液的殺滅效果逐漸增加，當ACC小于20 mg/L時，SAEW處理組和NaClO處理組的殺菌效果無顯著差異（P＞0.05），推測蛋白質在一定程度上干擾了ACC較低時SAEW中游離氯的作用，當ACC大于20 mg/L時，即使存在蛋白質干擾，SAEW的殺菌效果也強于NaClO，表明當ACC小于20 mg/L時，蛋白質消耗了大部分有效氯，導致殺菌效果大大減弱。在電解水應用于肉類工業的研究中發現，有機物存在時，與NaClO的殺菌效果相比，SAEW的殺菌效果更穩定[24]。因此在處理肉類等含有蛋白質的樣品時，應選取合適ACC的SAEW處理樣品。

圖4 蛋白質存在時不同ACC的SAEW和NaClO處理對空腸彎曲菌的殺滅效果Fig.4 Bactericidal effects of SAEW and NaClO treatments at different ACC levels against C.jejuni ATCC 33560 in the presence of exogenous protein

2.3.3 蛋白質存在時SAEW處理不同時間對空腸彎曲菌的殺滅效果

在10 g/L蛋白質干擾下，采用ACC為30 mg/L的SAEW處理空腸彎曲菌1、2、5 min和10 min，結果如圖5所示。隨著處理時間的延長，SAEW對空腸彎曲菌的殺滅效果增強，當SAEW處理10 min時，空腸彎曲菌減少數量達到最大值（4.12（lg（CFU/mL））），低于相同ACC的SAEW處理空腸彎曲菌純培養液時的最大值（6.23（lg（CFU/mL）））。SAEW和NaClO處理1 min內空腸彎曲菌減少速率最快，1 min后趨于穩定。有研究發現，在模擬洗滌的過程中，與蔬菜產品相比，肉類消耗有效氯更快[22]。Park等[25]的研究也發現，隨著蛋白質的增加，游離的有效氯含量降低。SAEW殺菌效率的不斷降低是有機質不斷消耗有效氯導致的。雖然蛋白質會減弱殺菌作用，但是SAEW殺菌效果仍然強于NaClO，因此在食品工業中應用SAEW時應考慮不同食品中蛋白質的數量和類型，合理選擇處理時間，從而優化殺菌條件和效果。

圖5 蛋白質存在時SAEW和NaClO處理不同時間對空腸彎曲菌的殺滅效果Fig.5 Effect of treatment time of SAEW and NaClO on inactivation of C.jejuni ATCC 33560 under protein interference

2.4 SAEW多代殺菌效果

采用ACC為10 mg/L的SAEW對多代培養的空腸彎曲菌處理2 min，考察SAEW的殺滅效果，結果如圖6所示。SAEW對第一代菌的殺菌率為26.3%，之后每代的殺菌率均在24.95%～29.80%，且差異較小。梁鐸[13]通過連續多代處理，分析SAEW對單增李斯特菌的多代殺菌效果，第一代殺菌率為56.33%，之后每代的殺菌效果均在47.71%～82.75%之間，且差異不顯著（P＞0.05），這表明單增李斯特菌在10 代之內對SAEW不產生耐藥性。由實驗結果可知，10 代以內空腸彎曲菌不會對低濃度SAEW產生耐受性而降低殺菌效果，因此，可以采用SAEW殺滅空腸彎曲菌。

圖6 SAEW對空腸彎曲菌的多代殺菌效果Fig.6 Comparison of multi-generational inactivation effects of SAEW on C.jejuni ATCC 33560

2.5 SAEW處理對空腸彎曲菌細胞活力的影響

通過熒光顯微鏡觀察SAEW和NaClO處理對空腸彎曲菌細胞活力的影響，結果如圖7所示。SYTO9是一種可滲透細胞的核酸染料，PI僅穿透膜受損的細菌，具有完整細胞膜的細菌被染成綠色熒光，膜受損的細菌顯示紅色熒光。由圖7A可知，無菌去離子水處理的空腸彎曲菌多數為強綠色熒光，紅色熒光數較少，表明對照組細胞膜幾乎完好無損。隨著ACC的增加，紅色熒光數大幅增加，表明SAEW、NaClO對細胞膜完整性的破壞與濃度呈正相關，且相同ACC條件下NaClO處理組（圖7b～f）的紅色熒光明顯少于SAEW處理組（圖7B～F），表明SAEW對細胞膜的損傷程度更強。有研究使用SAEW處理腐敗鏈球菌和腐生鏈球菌，也發現SAEW會破壞細胞膜完整性[26]。用ImageJ軟件對熒光圖片進行定量分析，結果如圖8所示。隨著ACC的增加，紅色熒光與綠色熒光比值逐漸增加，表明細胞膜破壞程度加深，與熒光圖片結果一致。當ACC大于等于40 mg/L時，SAEW處理和NaClO處理的紅色熒光與綠色熒光的比值存在顯著性差異（P＜0.05），表明此時SAEW對細胞膜的破壞作用明顯強于NaClO處理。以上研究表明，SAEW可能通過損害細胞膜完整性殺滅空腸彎曲菌。

圖7 SAEW和NaClO處理后空腸彎曲菌熒光顯微鏡圖像Fig.7 Fluorescence microscopic images of C.jejuni ATCC 33560 treated with SAEW and NaClO

圖8 SAEW和NaClO處理后空腸彎曲菌熒光顯微鏡圖像紅色熒光/綠色熒光比值定量分析Fig.8 Quantitative analysis of red/green fluorescence ratios in the fluorescence microscopic images of C.jejuni ATCC 33560 treated with SAEW and NaClO

2.6 SAEW處理對空腸彎曲菌形態的影響

對不同ACC的SAEW處理了2 min的空腸彎曲菌形態通過掃描電子顯微鏡進行觀察，以無菌去離子水作為對照，結果如圖9所示。無菌去離子水處理的菌體圖像呈現較完整和光滑的彎曲形（圖9A），而SAEW處理的菌體表面能清楚地觀察到不規則、褶皺、凹陷、破損甚至破裂（圖9B～F），且菌體表面損傷程度隨著ACC的增加而增加。類似研究發現，SAEW會破壞和損傷大腸桿菌和枯草芽孢桿菌，使其形態發生改變，推測SAEW可能通過改變菌體形態、增強膜的滲透性和細菌懸浮液中的導電性，導致鉀離子和蛋白質從細菌細胞中釋放出來[27-28]。以上研究表明，SAEW處理會改變菌體形態，導致其表面呈現不同程度的損傷，因此可以推測SAEW可能通過改變和破壞菌體形態結構殺滅空腸彎曲菌。

圖9 SAEW處理后空腸彎曲菌場發射掃描電子顯微鏡圖像Fig.9 Field emission scanning electron microscopy photomicrographs of C.jejuni ATCC 33560 treated with SAEW

2.7 SAEW處理對空腸彎曲菌細胞膜損傷的影響

2.7.1 SAEW處理后空腸彎曲菌細胞內DNA的泄漏情況

采用不同ACC和處理時間，觀察SAEW對細胞內核酸泄漏的影響，結果如圖10所示。處理組的OD260nm遠高于對照組，且OD260nm與ACC呈正相關。然而，隨著處理時間的延長，OD260nm先迅速上升后趨于平穩。相似的研究表明，Rhizopus stoloniferOD260nm隨著超聲功率和SAEW ACC的增加而增加，當聯合使用500 W的超聲和55 ℃ 50 mg/L的SAEW處理10 min時，OD260nm最高，表明此時胞內物質泄漏最嚴重，細胞膜被破壞，導致胞內成分釋放[29]。有研究表明SAEW處理腐生鏈球菌時，腐生鏈球菌的細胞外DNA含量顯著增加（P＜0.05），且與SAEW的ACC呈正比[27]。以上結果表明，SAEW處理會導致空腸彎曲菌中核酸泄漏，與ACC呈濃度依賴性，因此可以推測SAEW通過增加細胞膜的通透性，導致細胞內核酸泄漏，從而殺滅空腸彎曲菌。

圖10 不同ACC的SAEW處理不同時間對空腸彎曲菌核酸的影響Fig.10 Effect of different times of SAEW treatment at different ACC levels on leakage of intracellular nucleic acid from C.jejuni ATCC 33560

2.7.2 SAEW處理后空腸彎曲菌細胞內蛋白質的泄漏情況

蛋白質量濃度可以反映細胞膜的完整性，已測定的標準曲線表明OD570nm與蛋白質量濃度有良好的線性關系（y＝0.577 2x+0.630 8，R2＝0.996 2），根據標準曲線得到的樣品中蛋白質量濃度的結果如圖11所示。與對照組相比，蛋白質泄漏質量濃度隨著ACC的增加而增加，呈濃度依賴性，且ACC大于等于30 mg/L時，蛋白質泄漏質量濃度顯著增加（P＜0.05）。有研究表明酸性電解水可以通過增加細胞膜的滲透性導致細胞內成分的泄漏，從而抑制細菌生長[30]，與本研究結果一致。Osafune等[31]報道細胞質結構會被酸性電解水沖洗出細胞壁。因此，可以推測SAEW通過增加細胞膜的通透性，導致細胞質成分泄漏，從而殺滅空腸彎曲菌。

圖11 不同ACC的SAEW處理2 min對空腸彎曲菌蛋白質的影響Fig.11 Effect of SAEW treatment for 2 min at different ACC levels on leakage of intracellular protein from C.jejuni ATCC 33560

2.7.3 SAEW處理對空腸彎曲菌細胞內ATP濃度的影響

AT P 在細胞的各種生理、病理中起著重要作用，ATP水平的變化會影響細胞的功能。已測定的標準曲線表明熒光強度與ATP濃度呈良好的線性關系（y＝35 578x+3 621.3，R2＝0.999 8），根據標準曲線得到的樣品中ATP濃度的結果如圖12所示。與無菌去離子水對照組相比，細胞ATP濃度隨著ACC的增加而降低，呈濃度依賴性，且ACC大于等于30 mg/L時，ATP濃度極顯著降低（P＜0.01）。對照組ATP濃度為（0.30±0.01）μmol/L，當ACC為50 mg/L時，處理后的ATP濃度僅為（0.06±0.02）μmol/L。類似研究發現，3-苯丙酸和SAEW聯合處理會造成Klebsiella oxytoca的ATP水平顯著變化，表明其聯合處理破壞了細胞膜的完整性，導致ATP泄漏，且細胞損傷隨著暴露時間的延長而增加[32]。以上研究表明，SAEW會破壞細菌細胞膜的完整性并滲透到細胞中，導致ATP濃度下降。

圖12 SAEW處理對空腸彎曲菌細胞ATP濃度的影響Fig.12 Effect of SAEW treatment on leakage of intracellular ATP from C.jejuni ATCC 33560

3 結論

本研究表明，SAEW對空腸彎曲菌的殺滅效果與處理時間和ACC呈正相關，并且SAEW的殺滅效果顯著高于相同ACC的NaClO，蛋白質存在時，SAEW的殺菌效果會隨著蛋白質量濃度的增加而減弱，將空腸彎曲菌進行連續多代處理，在10 代內并未對低濃度SAEW產生明顯的抗藥性反應。SAEW處理破壞了空腸彎曲菌的形態和細胞膜的完整性，且破壞程度呈濃度依賴性。SAEW處理會導致空腸彎曲菌細胞內核酸、蛋白質、ATP泄漏，細胞活性下降等變化，推測SAEW通過破壞膜完整性殺滅空腸曲菌。