說說艾滋病病毒的檢測

■胡亮 常東（復旦大學附屬浦東醫院檢驗科）

艾滋病是一種病死率很高的傳染病，是由人類免疫缺陷病毒（HIV）感染引起的。報告顯示，全球目前有3900 萬例艾滋病病毒感染者，其中2980 萬例正在接受抗逆轉錄病毒治療；2022 年新發感染130 萬例，63 萬人死于艾滋病相關疾病。

艾滋病全稱是“AIDS（獲得性免疫缺陷綜合征）”。從這個名稱中我們可以知道艾滋病的3 個重要特征。一是“獲得性”，即非原發的，其傳播途徑主要為黏膜傳播，其次是血液和母嬰傳播。二是該病會導致嚴重的“免疫缺陷”，人體免疫系統最主要的功能是識別和清除“敵人”，而艾滋病病毒會破壞人體的免疫系統，讓人體喪失抵御“敵人”的能力。三是出現“綜合征”的表現，因為感染后機體免疫力低下，各種病原體趁虛而入，導致各種感染，也容易發生腫瘤。

AIDS 的診斷需要通過實驗室檢測結果，結合臨床表現并參考流行病學資料進行綜合分析。HIV 檢測試劑可以根據檢測物的不同大致分為：測抗體的試劑、測抗原的試劑和測核酸的試劑。有時也會根據檢測試劑的使用特點進行分類，如HIV 抗體快速檢測試劑、自測試劑、抗體篩查試劑、抗體診斷試劑和抗體確證試劑等。根據檢測的方法和實驗室的級別不同，還可以分為初篩試驗和確證試驗。我們可以用血液、尿液、口腔黏膜滲出液等檢測是否有HIV 病毒的感染。

提及HIV 的檢測，不得不提一個重要的概念就是“窗口期（window period）”。臨床中，有些患者存在高危行為，但檢測結果是陰性。這是因為有窗口期的存在，此時仍不能排除HIV 感染的可能。根據我國衛生行業標準《WS 293-2019 艾滋病和艾滋病病毒感染診斷》，窗口期是指從HIV 感染人體到感染者血清中的HIV 抗體、抗原或核酸等感染標志物能被檢測出之前的時期。現有診斷技術檢測HIV 抗體、抗原和核酸的窗口期分別為感染后的3 周、2 周和1 周左右。

HIV 抗體檢測

HIV 抗體一旦產生就終身攜帶。抗體可以理解為人體免疫系統針對這個病毒生產的“武器”，主要作用就是消滅病毒。用于HIV 抗體檢測的主要是一種叫作“酶聯免疫吸附試驗”的方法，它是利用抗原能夠與相應的抗體結合這一免疫學基本原理實現的。這種實驗方法經歷了一代、二代和三代的發展，敏感性和特異性逐代提高，窗口期也逐代縮短，從約3 個月縮短到約3 周。但要特別注意的是，HIV 感染后到抗體產生前的窗口期抗體檢測為陰性。另外，HIV 抗體檢測不能診斷小于18 個月齡新生兒的感染。

HIV 檢測“窗口期”示意圖

HIV 抗體檢測的應用場景主要有3 個方面。一是實驗室診斷，為了確定個體HIV 感染狀況，包括臨床檢測、自愿咨詢檢測、根據需要進行的檢測等。二是血液篩查，是為了防止通過輸血傳播HIV 病毒。三是監測HIV 感染率及其變化趨勢，包括各類高危人群、重點人群和一般人群。

如果HIV 抗體篩查結果提示有反應性，需要進一步做補充試驗，通常采用HIV 抗體確證試驗，陽性即可診斷為HIV 感染。補充試驗一般在疾控中心進行。醫院的檢驗科一般為初篩實驗室，只出具HIV 陰性報告，不出具HIV 陽性報告。

HIV 抗原和抗體同時檢測

我們可以簡單地把抗原理解為病毒本身的一部分，血液里的抗原比抗體出現的時間要早。HIV 抗原和抗體同時檢測，即第四代“酶聯免疫吸附試驗”，窗口期比單純抗體檢測縮短了約1 周。當然，現在很多實驗室用化學發光法檢測HIV 的抗原和抗體，其敏感性和特異性更好。

HIV 抗原和抗體同時檢測的優勢主要體現在以下幾個方面。一是縮短了窗口期，感染后14—30 天，感染者的血液具有很強的傳染性，抗原檢測通常是陽性的，但抗體可能為陰性。二是保證了用血安全，檢測出只有抗原陽性但是抗體陰性的窗口期樣本是非常有意義的。三是能夠用于判斷AIDS 感染的分期，HIV 感染者的抗原陽性而抗體陰性，說明是急性期或者是發病期，抗原陰性而抗體陽性，說明是潛伏期。

與抗體檢測一樣，如果HIV 抗原抗體篩查結果提示有反應性，需要進一步做補充試驗，通常采用HIV抗體確證試驗。對于抗原有反應但抗體陰性或不確定的，需要進一步做HIV 核酸檢測或2—4 周后再次進行檢測。

HIV 核酸檢測

核酸通常指的就是脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。HIV 的核酸物質是RNA，檢測主要包括HIV-RNA 定量（有具體的數值）和定性（只能判斷陰性或陽性）檢測。核酸檢測可用于HIV 感染診斷、血液篩查、病程評估及抗病毒治療效果監測等。

對于HIV 抗體陰性或不確定，而又有流行病學史，或有艾滋病相關臨床表現的人，可通過HIV 核酸定量檢測進行診斷，核酸檢測可以使窗口期縮短到1 周左右。但是核酸檢測結果陰性也不能排除HIV 感染，因為就算是很早能夠檢測的核酸也存在窗口期。

HIV 核酸檢測在某些方面有其獨特的優勢。比如，對于初篩試驗有反應但抗體確證試驗不確定，或陰性的疑似AIDS 晚期患者，需通過核酸、臨床病史和CD4+T 淋巴細胞計數結果綜合判斷。核酸檢測還可用于采供血機構進行血液篩查。對獻血者及采供血機構的血漿進行核酸檢測，可及時發現窗口期感染，降低輸血感染HIV的風險。對于HIV 感染母親所生小于18 個月齡的嬰兒，不同時間的兩次HIV 核酸檢測均為陽性即可診斷。

總之，我們要明確一點，HIV 的檢測有“窗口期”，哪怕是最早能檢出HIV 病毒的核酸檢測方法也有1 周的窗口期。而目前我國醫療衛生機構最常用的AIDS 篩查試劑是HIV 抗原抗體和抗體檢測試劑，所以建議發生高危行為后至少2 周后再檢測。如果在窗口期內檢測，HIV 檢測結果陰性也不能排除感染的可能，需要再次檢測，檢測間隔時間一般為2—4 周。99.99%以上的人在發生末次高危行為3 個月后檢測還是陰性，就可以排除HIV 感染。如果還是不放心，可以在6 個月或1 年后再次進行檢測。若暴露于HIV 高感染風險中，需要24 小時內（最遲不超過72 小時）接受HIV 暴露后預防（PEP）措施，以降低感染風險。