甲殼胺誘導辣椒抗辣椒疫病的研究

摘 要：通過體外抑菌測定和盆栽生物測定研究了甲殼胺誘導辣椒抗辣椒疫病的效果。體外抑菌測定結果表明：甲殼胺對辣椒疫霉菌絲生長有很強的抑制作用。在50mg／L濃度下，甲殼胺對菌絲生長先表現出促進作用但最終表現出抑制作用；濃度達到400mg／L和800mg／L時，對菌絲生長的抑制分別達到83.75％和89.77％。盆栽生物測定結果表明：利用甲殼胺誘導辣椒抗疫病的最佳施藥濃度為12000×葉／20000×根。

關鍵詞：甲殼胺；誘導抗性；辣椒疫病

中圖分類號：S5436.418.1⁺9 文獻標識號：A 文章編號：1001—4942(2010)09—0070—03

辣椒疫病是由辣椒疫霉菌(Phytophthora cap-sici Leonian)引起的毀滅性土傳病害，常在短期內暴發成災，對辣椒生產影響極大，該病于1918年首次在美國新墨西哥州發現，現已成為世界性重要病害。辣椒疫霉菌寄主廣泛，能夠侵染茄科、葫蘆科等大多數作物并造成重大損失。

目前對辣椒疫病的防治仍以化學防治及抗病品種的選用為主。甲霜靈等單一化學農藥的長期使用刺激辣椒疫霉菌產生變異，引起病原抗病性的不斷增強，使得辣椒疫病的防治工作成效越來越低。有機磷農藥的大量使用造成嚴重污染，直接影響人體健康。抗病品種的選育由于與其它農藝性狀難以有機結合，選育既抗病又高產、優質的品種難度越來越大，依靠抗病品種的選育防治效果也十分有限。近年來，一些具有誘導抗病性的生物類制劑為辣椒疫病的防治開辟了新的途徑。

水溶性甲殼胺是生物制劑，來源于海洋生物外殼，安全無毒、無污染、無殘留，對環境友好，并且除具有防病作用外，還具有促進作物幼苗生長，培育壯苗，提高作物抗逆性、防御酶活性及抗病相關物質含量的作用。本試驗試圖通過對甲殼胺誘導辣椒抗辣椒疫病的初步研究為甲殼胺制劑在辣椒生產中的應用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 供試藥劑

80％水溶性甲殼胺制劑(智能963)：濟南阿波羅肥業有限公司生產并提供；抗茬寧(泰寶)：山東匯豐源農業科技發展有限公司生產。

1.2 供試菌株

辣椒疫霉菌株HM09采自山東惠民，在PB－NICCMA培養基平板上擴繁6天后備用。

1.3 體外抑菌測定

采用菌絲生長速率法測定。將80％水溶性甲殼胺制劑先用蒸餾水配成10g／L溶液，再用蒸餾水稀釋成5個濃度800、400、200、100、50mg／L，制成含藥CA培養基(胡蘿卜培養基)平板(d=88mm／n，除皿壁厚度)，用直徑5mm打孔器沿已培養好的菌落邊緣打下菌塊，取菌齡一致的菌絲塊移于各皿中央，菌絲面朝下。每處理重復3次，以不含藥平板為對照，置于28℃恒溫培養。分別于3天和6天后測量菌落直徑，求藥劑抑菌率。

1.4 盆栽生物測定

育苗土(土：營養基質=3：1)經40％甲醛消毒晾透后，裝入塑料盆(d=15cm)內，將2葉1心期辣椒幼苗移植盆中，每盆3株。

將甲殼胺分別配制系列濃度溶液：①6000倍(166.7mg／L)；②10000倍(100mg／L)；③12000倍(83.3mg／L)；④20000倍(80mg／L)：⑤18000倍(55.6mg／L)；⑥30000倍(33.3mg／L)，對辣椒植株進行葉面噴施與灌根誘導。設定①和②為一組，①用于葉面噴施，②用于灌根，以6000×葉／10000×根作為濃度代號；設定③和④為一組，③用于葉面噴施，④用于灌根，以12000×葉／20000×根作為濃度代號；設定⑤和⑥為一組，⑤用于葉面噴施，⑥用于灌根，以18000×葉／30000×根作為濃度代號。

以抗茬寧500倍液為標準對照，清水為接菌對照，每處理按規定濃度先噴霧(10ml／株)，再在各盆內灌50ml甲殼胺溶液，每處理重復4盆，間隔5天噴施灌根1次，連續誘導3次。第3次誘導后1天進行辣椒疫霉菌接種。

將培養好的辣椒疫霉菌制備成孢子濃度為2.5×10⁴個／ml的懸浮液，每盆灌根法接種30ml，接種后置于溫室內(白天26—30℃，夜間18％)。接種后至接菌對照盆內辣椒苗充分發病時調查各處理發病情況。

1.5 病情調查及分級標準

按9級分級方法逐株調查，計算病株率、病情指數和防治效果。

2 結果與分析

2.1 體外抑菌測定的結果

從平板抑菌測定結果(表1)看出，隨著濃度的增加，甲殼胺對辣椒疫霉菌菌絲生長的抑制作用越來越強；濃度為800mg／L時，辣椒疫霉菌培養3d時未形成菌落，培養6d時，抑菌率為89.77％；其它濃度處理隨培養天數的增加，抑菌作用增強；濃度為50mg／L時，3d時表現出對菌絲生長的促進作用，6d時其抑菌率為26.59％。

2.2 盆栽生物測定的結果

由表2可以看出，甲殼胺3個處理對辣椒疫病的防治效果均優于抗茬寧500倍液，并且從病株率、病情指數和防治效果3個指標來分析均以中等濃度的甲殼胺即12000×葉／20000×根防效最好，達57.90％。

3 結論與討論

平板抑菌測定結果表明，雖然在6天后對照菌絲生長滿皿時，50mg，／L濃度甲殼胺表現出了對疫霉菌絲的抑制作用，但在菌落擴展前期(3天)，對菌絲生長表現出促進作用。為何甲殼胺在高濃度時能對辣椒疫霉菌絲生長持續產生抑制作用，而在低濃度時卻對菌絲生長有促進作用并最終表現出抑制作用，啟發我們對甲殼胺等生物誘抗劑直接抑菌的機理進一步研究。

盆栽試驗結果表明，甲殼胺濃度過高或太低對誘導辣椒抗疫病的效果均不理想。本試驗選出利用甲殼胺誘導辣椒抗疫病的最佳施藥濃度為12000×葉／20000×根，即甲殼胺12000倍液噴葉，20000倍液灌根。對其田間的應用效果及對誘抗相關酶活性的影響正在進一步試驗中。