



摘要:為持續加強獸醫系統實驗室能力建設,提高獸醫系統實驗室檢測能力和水平,2022年7—8月,四川省動物疫病預防控制中心組織開展了全省獸醫系統實驗室檢測能力比對工作,全省共20個市級,151個縣級動物疫病預防控制機構實驗室參加比對。結果顯示:市級獸醫實驗室非洲豬瘟病毒核酸鑒別、禽流感病毒核酸H5/H7亞型鑒定、口蹄疫A型抗體檢測結果正確率分別為88.33%、95.00%、94.17%,整體結果正確率為92.50%;縣級獸醫實驗室非洲豬瘟病毒核酸、禽流感病毒核酸、口蹄疫病毒抗體、豬瘟病毒抗體、禽流感病毒抗體檢測結果正確率分別為98.26%、97.50%、100.00%、98.26%、90.83%,整體結果正確率為95.76%。比對結果表明四川省各級獸醫系統實驗室檢測能力仍維持在較好的水平,建議部分實驗室進一步提高檢測人員水平,加強基礎設施設備建設,不斷提升全省動物疫病監測和預警預報能力。
關鍵詞:獸醫實驗室;檢測能力;分析
獸醫實驗室承擔著動物疫病監測、診斷、流行病學調查研究等任務,是獸醫行政管理和執法監督的重要技術支撐,同時在動物疫病防控體系中發揮重要作用[1]。為保證檢測結果的準確性和檢測報告的公正性,要求實驗室維持穩定的檢測能力和水平。實驗室檢測能力比對是農業農村部加強獸醫系統實驗室管理的主要抓手,也是評價和提高實驗室管理水平和檢測能力的重要手段[2]。按照農業農村部和四川省農業農村廳關于檢測能力比對的工作要求[3-4],四川省動物疫病預防控制中心多年來一直堅持組織開展全省市、縣級獸醫系統實驗室能力比對,并于2022年7—8月完成2022年檢測能力比對工作。通過能力水平的評估,指導市、縣級獸醫系統實驗室查找問題,推動完善了四川省獸醫實驗室體系建設,不斷提升監測和預警預報能力。
1 材料和方法
1.1 比對項目
市級獸醫實驗室共設置3個檢測比對項目,分別為非洲豬瘟病毒核酸鑒別、禽流感病毒核酸H5/H7亞型鑒定、口蹄疫病毒A型抗體檢測。
縣級獸醫實驗室比對項目包括非洲豬瘟病毒核酸、禽流感病毒核酸、口蹄疫病毒抗體、禽流感病毒抗體、豬瘟抗體,由各市動物疫控機構自行確定不少于3個檢測項目,同時兼顧不同試驗方法,對轄區內縣級獸醫實驗室開展比對。
1.2 比對樣品、采用試劑及方法
市級獸醫實驗室比對樣品由四川省動物疫病預防控制中心統一制備發放,各比對項目各設置6份盲樣;其中非洲豬瘟病毒核酸鑒別和口蹄疫A型抗體檢測項目所需試劑為四川省動物疫病預防控制中心統一采購、驗證后發放,禽流感病毒核酸H5/H7亞型鑒定所需試劑為參加比對實驗室自行準備。
縣級實驗室比對樣品和所需試劑由各市動物疫控機構自行準備和發放,各比對項目針對每個比對實驗室盲樣不少于5份。
比對項目采用的方法包括熒光RT-PCR、熒光PCR、HA/HI、ELISA,均采用相應的國家現行標準執行。詳見表1、表2。
1.3 比對結果判定標準
口蹄疫病毒抗體檢測、禽流感病毒抗體檢測項目判定標準為:盲樣檢測值與參考值的偏差不超過1個滴度,判為正確,否則判為錯誤;其余項目判定標準為:盲樣檢測值與參考值完全一致判為正確,否則判為錯誤。
2.1 市級獸醫實驗室比對結果
全省20個市級獸醫實驗室參與檢測能力比對,非洲豬瘟病毒核酸是鑒別檢測、禽流感病毒核酸H5/H7亞型鑒定、口蹄疫A型抗體檢測結果正確率分別為88.33%、95.00%、94.17%;結果完全正確實驗室比率分別為70.00%、90.00%、85.00%。詳見表3。
2.2 縣級獸醫實驗室比對結果
全省共151個縣級獸醫實驗室參與了檢測能力比對,各實驗室比對項目不完全相同。非洲豬瘟病毒核酸、禽流感病毒核酸、口蹄疫病毒抗體、豬瘟抗體、禽流感病毒抗體檢測結果正確率分別為98.26%、97.50%、100.00%、98.26%、90.83%;結果完全正確實驗室比率分別為93.13%、87.50%、100.00%、93.94%、74.77%。詳見表4。
3 分析與討論
1)四川省開展獸醫系統實驗室間比對工作以來,連續多年整體結果正確率在90%以上[5],表明四川省各級獸醫系統實驗室檢測能力處于較高的水平。同時也反映出一些問題,市級實驗室比對結果與2021年相比,非洲豬瘟病毒核酸檢測項目的結果正確率(88.33%)和結果完全正確實驗室比率(70.00%)較去年(100.00%、100.00%)有所下降、口蹄疫抗體檢測項目的結果完全正確實驗室比率(85.00%)較去年(90.48%)也有所下降。可能原因:①質量控制不到位,非洲豬瘟病毒核酸檢測項目中陽性樣本為強陽性,在檢測過程中操作不規范極易交叉污染,出現假陽性;②對檢測方法和結果判定不熟悉,口蹄疫抗體檢測采用液相阻斷ELISA方法,部分檢測人員對該方法不熟悉,對說明書結果判定理解不到位;③比對項目較往年難度有所增加,如非洲豬瘟病毒檢測項目中增加了不同毒株的鑒別,禽流感病毒檢測項目中增加了不同亞型的鑒別,都是造成正確率下降和正確率不高的因素。
2)縣級實驗室比對結果與2021年相比,禽流感病毒抗體檢測項目的結果正確率(90.83%)與結果完全正確實驗室比率(74.77%)較去年(96.68%、87.22%)均有所下降,實驗過程(如1%紅細胞的配置、4HAU配置)和實驗人員對結果判定的主觀性都會影響禽流感病毒抗體效價的結果。禽流感病毒核酸檢測項目的結果正確率(97.50%)和結果完全正確實驗室比率(87.50%)較去年(100.00%、100.00%)下降,實驗過程中,如核酸提取效果的不穩定,實驗室的污染、操作的不規范都會造成分子生物學檢測結果的不穩定。
3)實驗室間能力比對包括對場地、人員、設備及試劑等多因素的檢驗,是整個實驗室質量管理體系的綜合評價,是檢驗實驗室能力差別的重要手段。隨著疫控機構改革,各級疫控系統人才流失及老齡化情況日益嚴重。只有進一步穩定和強化獸醫實驗室人員隊伍和能力建設,加強技術培訓和規范化建設,同時完善實驗室質量管理和生物安全管理體系,才能不斷提升實驗室能力和管理水平。
4)四川省于2021年開展了縣級獸醫實驗室檢測能力提升項目,已完成了全省132個生豬調出大縣的獸醫實驗室非洲豬瘟檢測能力提檔升級,有力提升了全省縣級獸醫實驗室的檢測能力。未來四川省還將繼續逐步完善更新各級獸醫實驗室檢測設施設備,持續提升檢測能力和水平,推動構建全省體系完備、分工明確、功能互補的獸醫實驗室技術支撐體系。
參考文獻:
[1] 周莉媛,裴超信,邱明雙,等.淺談獸醫實驗室樣品管理[J].畜禽業,2019,30(1):12+14.
[2] 邴國霞,金萍,劉偉,等.2018年全國省級獸醫系統實驗室檢測能力比對結果分析[J].中國獸醫雜志,2019,55(2):131-133.
[3] 農業農村部畜牧獸醫局.關于開展2022年獸醫系統實驗室檢測能力比對的通知(農牧便函〔2022〕312號)[Z].2022-05-10.
[4] 四川省農業農村廳.關于開展2022年全省獸醫系統實驗室檢測能力比對的通知(N〔2022〕-1382號)[Z].2022-05-25.
[5] 尹燦友,李麗,鄧飛,等.2018-2020年四川省獸醫系統實驗室檢測能力比對[J].中國動物檢疫,2021,38(11):69-72.