湖南省蛇類新紀錄

摘 要 2023年7月27日，在湖南南山國家公園開展兩棲爬行動物資源調查時，在針闊混交林旁的馬路采集到白環蛇屬（Lycodon）標本1號（標本號HNNU 230727；26°15'2″ N，110°15'29″ E；海拔532 m），并基于線粒體細胞色素b 基因（Cyt b）片段重建白環蛇屬系統發育關系。結果顯示：該標本與花坪白環蛇（L. cathaya）模式標本聚為一支，遺傳距離為0. 1%。綜合形態特征及Cyt b 基因序列的分子系統關系，確定該標本為游蛇科（Colubridae）白環蛇屬花坪白環蛇，系湖南省蛇類新紀錄。

關鍵詞：湖南南山國家公園；分子系統學分析；游蛇科；花坪白環蛇；新紀錄

中圖分類號：Q958.1 文獻標識碼：A 文章編號：2310 - 1490（2024）- 02 - 0434 - 07

DOI：10.12375/ysdwxb.20240225

游蛇科（Colubridae）白環蛇屬（Lycodon）目前包含71個已知物種，廣泛分布于中東、東南亞以及印度-澳大利亞群島［1?4］，中國共記錄到白環蛇屬物種23種［5］。Wang等［6］發現并描述了廣西花坪自然保護區花坪白環蛇（L. cathaya），其為白環蛇屬一新種，目前文獻記錄該物種僅在廣西有分布。2023 年7 月27日，在湖南南山國家公園進行兩棲爬行動物資源調查時，于金童山片區針闊混交林旁的馬路采集到白環蛇屬標本1號。綜合其形態特征鑒定及Cyt b 基因序列分子系統比較，確定標本為花坪白環蛇，為湖南省蛇類新紀錄［7?8］。本研究對該物種標本進行相應形態特征測量及系統發育關系分析，為后續深入研究提供基礎資料。

1 材料與方法

1. 1 材料采集

1號雌性白環蛇屬標本采集自南山國家公園金童山片區（標本號HNNU 230727；26°15'2″ N，110°15'29″ E，海拔532 m），采集時已路殺死亡，生境為針闊混交林。取部分肌肉組織于95%乙醇中保存用于分子實驗。標本固定后浸泡在75%乙醇中，保存于湖南師范大學生命科學學院脊椎動物學實驗室。

1. 2 形態學測量

依據趙爾宓等［9］、Miller等［10］和Ziegler等［11］的測量方法，用電子數字游標卡尺對標本進行形態學測量，精確度為0. 1 mm。

1. 3 系統發育分析

使用試劑盒（TIANamp Genomic DNA Kit）提取白環蛇肌肉組織樣本總DNA。采用引物L14910（5'-GACCTGTGATMTGAAAACCAYCGTTGT-3'） 和H16064 （5'-CTTTGGTTTACAAGAACAATGCTTTA-3'）［12］擴增線粒體Cyt b 基因。PCR反應程序：94 ℃預變性5 min；94 ℃變性30 s，48 ℃退火1 min，72 ℃延伸70 s，35個循環；72 ℃終延伸10 min；4 ℃保存。擴增產物由生工生物工程（上海）股份有限公司測序。

采用MEGA 7［13］的Clustal W算法對所獲得序列進行比對，人工矯正對比結果。從NCBI下載已有的部分白環蛇屬物種Cyt b 序列（表1），并選取犬牙林蛇（Boiga cynodon，KC010340）和山區食卵蛇（Dasy?peltis atra，AF471065）Cyt b 序列為外群，利用IQTREE2軟件構建部分白環蛇屬物種分子系統發育樹［14］，最大似然法發育分析選取最佳模型為TPM2u+I+G，基于默認參數，自展1 000次估算節點支持率。利用MEGA 7 基于未校正距離模型（uncorrected pdistance）估算本研究中所采用的白環蛇屬部分物種間的遺傳距離。

2 結果

2. 1 形態描述

標本各測量和鱗片計數數據見表2。身體細長，頭較寬且扁，與頸區分明顯；吻寬圓，較前突。頭背黑色，臟粉色寬橫斑淡化。體、尾背面黑色，具36/16條臟粉色橫斑，將背部分割成橢圓形黑斑（少部分橫斑愈合），延伸至尾尖。脊部中央橫斑寬度約占2枚背鱗長，從脊側開始加寬，至體側相鄰橫紋愈合相接。體側具不規則小黑斑，位于臟粉色橫斑下方，成列至尾尖。腹鱗兩邊灰白色，腹鱗中央密布黑斑，形成腹中央1條鋸齒狀縱帶。尾腹淺棕色（圖1）。

2. 2 系統發育關系與遺傳距離

PCR 擴增Cyt b 基因片段長度為1 068 bp。用Mega 7 Clustal W 算法對所獲得的序列進行人工比對、拼接，基于最適模型TPM2u+I+G 構建最大似然法系統發育樹。結果顯示，在南山國家公園采集的白環蛇屬標本與花坪白環蛇模式標本相聚形成高支持率單系（圖2）。基于未矯正距離模型估算本研究中所采用的白環蛇屬部分物種間的遺傳距離為0. 1%～19. 4%，平均遺傳距離為9. 8%。南山國家公園采集的花坪白環蛇與模式產地的花坪白環蛇樣本間的平均遺傳距離為0. 1%，遠小于白環蛇屬物種間的平均遺傳距離（附表1）。因此，分子系統發育分析和遺傳距離結果均支持采集于南山國家公園的白環蛇屬標本為花坪白環蛇。

3 討論

采自湖南南山國家公園的花坪白環蛇標本在形態上與模式標本基本一致，但在頭的形態、腹鱗數等形態上也存在一定差異，主要表現在頭寬與頭長的比例上，采自湖南南山國家公園的標本頭寬與頭長比例接近于1，大于模式產地，可能是本次采集的標本為路殺個體，其頭部遭遇輕微碾壓導致部分形態發生改變。

花坪白環蛇歷史文獻報道僅在其模式產地廣西花坪自然保護區有分布［6］。本研究報道了在湖南省南山國家公園金童山片區的新紀錄，擴大了花坪白環蛇的分布范圍，豐富了湖南省及南山國家公園白環蛇屬物種的多樣性。本研究僅基于1條花坪白環蛇標本，未來應加強野外調查，進一步了解花坪白環蛇在南山地區的種群規模、生態習性等信息，為保護區建設和生物多樣性保護提供基礎資料。

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基金項目：湖南省國家重點野生動植物補助資金項目（2021-326）；湖南城步苗族自治縣縣域生物多樣性資源調查項目（2021-326-430529）；湖南金童山國家級自然保護區2022年中央財政資金補助項目（2022-34）