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首次在中國發現圈養環尾狐猴感染肥頭絳蟲

2024-09-11 00:00:00劉蕓江楊金朋劉俊卿陳善瑜劉海峰周紫峣鐘志軍彭廣能
野生動物學報 2024年3期

摘 要:首次在中國報道1例由長頸囊尾蚴(Cysticercus longicollis)引起的5歲雄性圈養環尾狐猴(Lemur catta)皮下囊尾蚴病,患病動物表現為明顯的臀部囊腫,但無其他異常體征。該病例就診于四川農業大學第二教學動物醫院。在就診期間,采用細針穿刺對囊腫內容物進行形態學檢查。結果顯示:囊腫內含有大量囊尾蚴,典型囊尾蚴呈橢圓形,具有長而可伸縮的頸部和單個頭節,頭節上有4個吸盤和16個(單排)小鉤。通過對囊尾蚴DNA進行nad1 和cox1 基因擴增及測序,進一步確定該囊尾蚴為肥頭絳蟲(Taenia crassiceps)的幼蟲形態,即長頸囊尾蚴,研究結果可為該寄生蟲在國內的流行病學調查及防控提供參考。

關鍵詞:肥頭絳蟲;環尾狐猴;長頸囊尾蚴

中圖分類號:S858. 9

文獻標識碼:A

文章編號:2310 - 1490(2024)- 03 - 0648 - 05

DOI:10.12375/ysdwxb.20240321

肥頭絳蟲(Taenia crassiceps)屬于扁型動物門(Platyhelminthes)多節絳蟲亞綱(Cestoda)帶絳蟲科(Taeniidae)帶絳蟲屬(Taenia)。該寄生蟲主要以赤狐(Vulpes vulpes)和其他犬科(Canidae)動物為終末宿主,流行于北美洲、亞洲和歐洲等地[1?2]。肥頭絳蟲的傳播途徑為糞口傳播,食用被蟲卵污染的食物和水可導致以嚙齒動物為主的中間宿主感染。蟲卵在體內隨后發育成長頸囊尾蚴(Cysticercus longicol?lis),其體態透明,呈橢圓形,長度可達3 mm,頭節有4個吸盤和28~34個小鉤[3],并定殖于皮下、肌肉和胸膜腹腔內等部位形成囊腫。當終末宿主捕食受感染的中間宿主后,長頸囊尾蚴通過吸盤附著在腸道內棲息,并發育成絳蟲成蟲。

據報道,肥頭絳蟲在德國、斯洛文尼亞、西班牙和法國的赤狐中感染率較高,為19. 9%~29. 0%[4?7]。相比之下,該寄生蟲在伊比利亞半島、意大利、瑞士和中國的赤狐中流行率相對較低,為0. 7%~8. 0%[8?11]。目前,全球范圍內有多例環尾狐猴(Lemur catta)感染長頸囊尾蚴的病例報道[12?14],其中一例未見明顯癥狀即突發死亡[14]。人類也有多例感染長頸囊尾蚴的病例報道[15?16],主要是免疫力低下的人食用了被蟲卵污染的食物或水所致。盡管長頸囊尾蚴感染健康人類較為少見,但仍應考慮其潛在的人獸共患風險。

首次在中國報道1例圈養環尾狐猴感染肥頭絳蟲囊尾蚴病,以期為長頸囊尾蚴蟲在國內的流行病學調查及防控提供參考。

1 材料與方法

1. 1 病例描述與囊尾蚴樣品采集

研究對象為2019年從捷克共和國引入四川雅安碧峰峽動物園的1只5歲成年雄性環尾狐猴。該猴為開放式飼養,食物包括紅棗、花生、蘋果、胡蘿卜、窩窩頭、瓜子以及一些游客私自喂食的食品。2021 年5 月,飼養員發現該猴臀部有皮下囊腫(圖1),但沒有其他異常癥狀,園區獸醫使用氨芐西林(批準文號:獸藥字154416286,濰坊鴻盛生物科技有限公司)對其進行治療。給藥方式為口服給藥,劑量為50 mg/kg,給藥周期為1 次/d,總給藥時間為12 d。治療結束后,患病環尾狐猴囊腫未見消退。

2022年10月20日,患病環尾狐猴被送往雅安市四川農業大學第二教學動物醫院接受治療。值班醫師接診后,首先使用電動剃刀剃除該猴患病部位周圍毛發,確保采樣區域清潔無毛;而后使用碘伏溶液徹底消毒并采用23G針頭及注射器進行細針抽吸,抽取的樣本立即轉移到載玻片上,確保樣本均勻分布;最后,使用光學顯微鏡對載玻片上的樣本進行觀察,并拍攝圖像記錄樣本特征。通過鏡檢確定該猴為寄生蟲感染后,值班醫師采用抗寄生蟲藥阿苯達唑(批準文號:獸藥生產證字15295號,河南南華千牧生物科技有限公司)進行保守治療。給藥方式為口服給藥,劑量為20 mg/kg,給藥周期為1次/d,總給藥時間為30 d。在治療過程中,囊腫在第10天開始明顯縮小,到第25天時基本消退,該猴無不良反應。治療結束后,環尾狐猴恢復健康,未再發現其他異常癥狀。

1. 2 囊尾蚴基因組DNA 提取及線粒體nad1 和cox1 基因的擴增

參照糞便DNA 提取試劑盒(OMEGA,美國)說明書從單個囊尾蚴中提取DNA。合成Samorek-Pieróg等[13]報道的引物,對提取DNA的線粒體細胞色素c氧化酶第Ⅰ亞基(cox1)基因和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶第Ⅰ亞基(nad1)基因的部分序列進行PCR擴增,引物信息見表1。

1. 3 測序和系統發育分析

擴增片段的測序工作由生工生物工程(上海)股份有限公司完成,測序方式為Sanger 雙脫氧測序。使用SeqMan Pro軟件對擴增的正反向序列進行比對和拼接。隨后利用BLAST在GenBank中搜索拼接序列的同源序列,并使用BLAST核苷酸算法進行物種鑒定。利用MEGA11軟件中的UPGMA法對拼接序列及部分同源序列構建進化樹,模型為“Kimura 2-parameter”,Bootstrap設置為1 000。

2 結果

2. 1 鏡檢結果

顯微鏡下觀察到大量存活的囊尾蚴,典型囊尾蚴呈橢圓形囊體,具有長而可伸縮的頸部和單個頭節(圖2A),頭節上有4 個吸盤和16 個(單排)小鉤(圖2B)。

2. 2 PCR 擴增及進化樹

利用合成的引物成功擴增囊尾蚴的DNA片段,兩個PCR反應產物均符合預期大小。使用GenBank數據庫對擴增子的測序結果進行分析和比較,結果證實該寄生蟲為肥頭絳蟲。

擴增的nad1和cox1基因序列均已上傳至GenBank數據庫,登錄號分別為OP991968. 1和OP831183. 1。基于nad1 基因序列構建的系統發育樹(圖3A)顯示,本研究的肥頭絳蟲與波蘭某環尾狐猴感染的肥頭絳蟲(OM992098. 1)親緣關系最近,置信度為100%。基于cox1 基因序列構建的系統發育樹(圖3B)顯示,本研究的肥頭絳蟲與捷克共和國某地松鼠(Xerus in?auris)感染的肥頭絳蟲(KY321320. 1)親緣關系最近,置信度為62%。

3 討論

首次在中國報道圈養環尾狐猴感染肥頭絳蟲囊尾蚴病,雖然該病的感染源和傳播方式尚不清楚,但系統發育樹結果顯示本研究的病原與波蘭和捷克共和國的病原親緣關系最近,而本病例環尾狐猴正是從捷克共和國引進,波蘭和捷克共和國為鄰國關系,所以初步推測該猴在引入前就已感染病原,并在碧峰峽動物園發病。

阿苯達唑作為一種苯并咪唑類的廣譜抗寄生蟲藥物,可有效治療蛔蟲、絳蟲、蟯蟲和鉤蟲等多種寄生蟲感染[17],所以該藥物對本病例有較好的治療效果。除阿苯達唑外,藥物吡喹酮和硝唑沙奈也可用于治療絳蟲引起的疾病[18?19]。

肥頭絳蟲及其幼蟲能夠感染狐貍、非人靈長類、鼠、犬甚至人,其中非人靈長類動物對帶絳蟲科物種高度敏感。在各種圈養的非人靈長類動物中,已有多例多房棘球絳蟲(Echinococcus multilocularis)、奧氏棘球絳蟲(E. ortleppi)、肥頭絳蟲和馬帶絳蟲(Tae?nia martis)引起的感染病例報道[12?13,20?23]。所以應充分考慮肥頭絳蟲的人獸共患潛力,在監測、診斷和治療等多個方面進行深入研究,以減少該寄生蟲的公共衛生危害。

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