miR-122/21對肝癌介入術后急性肝衰竭的預測價值

［摘要］ 目的 探究血清微小RNA-122（miR-122）和微小RNA-21（miR-21）對肝細胞癌（肝癌）介入術后急性肝衰竭風險的預測價值。

方法 選取2020年2月—2023年12月于黃石市中心醫院實施經導管肝動脈化療栓塞術（TACE）治療的154例肝癌病人為研究對象，根據術后2周是否出現急性肝衰竭分為衰竭組（61例）和非衰竭組（93例），以實時熒光定量PCR（RT-PCR）檢測血清miR-122與miR-21表達，采用多因素Logistic回歸分析TACE術后發生急性肝衰竭的危險因素，并用受試者工作特征（ROC）曲線分析血清miR-122和miR-21表達對TACE術后發生急性肝衰竭的預測價值。

結果 兩組門靜脈癌栓、介入次數、血清miR-122和miR-21表達等指標比較，差異均有統計學意義（χ²=11.15 t=5.803～6.305，Plt;0.05）。多因素Logistic回歸分析顯示，門靜脈癌栓、介入次數、miR-122和miR-21等變量都是肝癌介入術后發生急性肝衰竭的影響因素（OR=0.351～3.425，95%CI=（0.218～1.809）～（0.565～6.483），Plt;0.05），其回歸方程為Y=0.955×門靜脈癌栓＋1.097×介入次數＋1.231×miR-122-1.048×miR-21-3.151。ROC曲線分析表明，血清miR-122和miR-21預測肝癌介入術后出現急性肝衰竭的曲線下面積（AUC）分別為0.750和0.768，其靈敏度分別為72.1%和75.4%，特異度分別為65.6%和74.2%；兩個指標聯合預測的AUC為0.845，其靈敏度為80.3%，特異度為79.6%。

結論 門靜脈癌栓、介入次數、血清miR-122和miR-21等變量均是影響肝癌介入術后發生急性肝衰竭的風險因素，而血清miR-122和miR-21聯合檢測具有較高的預測價值，對肝癌介入術后急性肝衰竭的早期干預有重要意義。

［關鍵詞］ 癌，肝細胞；血管內操作；肝功能衰竭，急性；循環微RNA；Logistic模型；ROC曲線

［中圖分類號］ R730.261;R394.32

［文獻標志碼］ A

［文章編號］ 2096-5532（2024）06-0883-05

doi：10.11712/jms.2096-5532.2024.60.187

［開放科學（資源服務）標識碼（OSID）］

［網絡出版］ https：//link.cnki.net/urlid/37.1517.r.20241231.1450.002;2025-01-02 13：35：55

Value of microRNA-122 and microRNA-21 in predicting acute liver failure after interventional surgery for liver cancer

ZHANG Xiangyu， KE E， WANG Gang， ZHANG Hai

（Department of Interventional Radiology （Hubei Provincial Key Laboratory of Kidney Disease Occurrence and Intervention）， Huangshi Central Hospital （Affiliated Hospital of Hubei Institute of Technology），" Huangshi 43500 "China）

［Abstract］ Objective To investigate the value of serum microRNA-122 （miR-122） and microRNA-21 （miR-21） in predicting the risk of acute liver failure after transcatheter arterial chemoembolization （TACE） for hepatocellular carcinoma （HCC）.

Methods "A total of 154 patients with HCC who underwent TACE in Huangshi Central Hospital from February 2020 to December 2023 were enrolled as subjects， and according to the presence or absence of acute liver failure within 2 weeks after surgery， they were divided into liver failure group with 61 patients and non-liver failure group with 93 patients. Quantitative real-time PCR was used to measure the serum levels of miR-122 and miR-21; a multivariate Logistic regression analysis was used to identify the risk factors for acute liver failure after TACE， and the receiver operating characteristic （ROC） curve was used to investigate the value of serum miR-122 and miR-21 in predicting acute liver failure after TACE.

Results "There were significant differences between the two groups in portal vein tumor thrombus， the number of interventional procedures， and the expression levels of serum miR-122 and miR-21 （χ²=11.15 t=5.803-6.305，Plt;0.05）. The multivariate Logistic regression analysis showed that portal vein tumor thrombus， the number of interventional procedures， miR-12 "and miR-21 were influencing factors for acute liver failure after TACE （OR=0.35-3.425，95%CI=0.218-1.809 to 0.565-6.48 Plt;0.05）， and the regression equation was Y=0.955×portal vein tumor thrombus+1.097×number of interventional procedures+1.231×miR-122-1.048×miR-21-3.151. The ROC curve analysis showed that serum miR-122 and miR-21 had an area under the ROC curve （AUC） of 0.750 and 0.768， respectively， in predicting acute liver failure after TACE， with a sensitivity of 72.1% and 75.4%， respectively， and a specificity of 65.6% and 74.2%， respectively， and the combination of the two indicators had an AUC of 0.845， with a sensitivity of 80.3% and a specificity of 79.6%.

Conclusion Portal vein tumor thrombus， the number of interventional procedures， and the serum levels of miR-122 and miR-21 are risk factors for acute liver failure after TACE for HCC， and the combined measurement of serum miR-122 and miR-21 has a relatively high predictive value， which is of great significance for early intervention of acute liver failure after TACE for HCC.

［Key words］ carcinoma， hepatocellular; endovascular procedures; liver failure， acute; circulating microRNA; Logistic mo-dels; ROC curve

我國肝細胞癌（肝癌）發病率居惡性腫瘤的第5位，嚴重危害人類健康。肝癌的治療有多種選擇，包括肝移植、手術切除、經皮消融和放化療等^[1]。目前，手術療法仍是肝癌的最佳治療手段，但肝癌發病隱匿，多數病人確診時已為中晚期，錯失手術治療時機。肝動脈化療栓塞術（TACE）是一種非手術治療手段，能夠有效延長肝癌病人的生存期，但TACE術后常引起急性肝衰竭^[2-4]。因此，找尋合適的指標來早期識別出現急性肝衰竭的風險是臨床研究熱點問題。微小核糖核苷酸（miRNA）的表達異常與多種癌癥的發生發展相關^[5]，其中微小核糖核苷酸-122（miR-122）和微小核糖核苷酸-21（miR-21）在肝癌中的表達變化已有一定研究基礎，但將其用于預測肝癌介入術后急性肝衰竭的研究尚不多見^[6-8]。因此，本研究分析miR-122/21表達對TACE術后發生急性肝衰竭的預測價值，旨在為臨床進行早期干預提供依據?，F將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 調查對象

按照納入和排除標準，選擇2020年2月—2023年12月于黃石市中心醫院實施TACE治療的154例肝癌病人為研究對象。納入標準：①符合《原發性肝癌規范化病理診斷指南（2015年版）》^[9]中診斷標準；②實施TACE治療；③病人及其家屬知情并簽署同意書；④無介入治療禁忌證。排除標準：①術前接受過手術治療；②合并其他惡性腫瘤或者自身免疫性疾?。虎鄞嬖诰裾系K；④合并代謝性疾??；⑤存在嚴重感染。本研究經醫院醫學倫理委員會批準（2024-15）。

1.2 調查方法

1.2.1 分組方法 根據TACE術后2周是否出現急性肝衰竭將154例肝癌病人分為衰竭組（觀察組，61例）和非衰竭組（對照組，93例）。以術后2周出現如下一種或多種表現者診斷為急性肝衰竭：①總膽紅素≥51.0 μmol/L，或較術前上升≥34.2 μmol/L；②血氨水平高于正常值上限或新出現肝性腦?。虎坌鲁霈F腹水或較術前加重；④任意一次凝血時間較術前延長3 s。

1.2.2 資料收集方法 收集病人相關臨床資料，包括性別、年齡、體質量指數（BMI）、腫瘤長徑、門靜脈癌栓及介入次數等信息。

1.2.3 miR-122和miR-21檢測 采集病人術后次日清晨空腹外周靜脈血5 mL，靜置30 min后，以3 000 r/min離心5 min，取上清液置于-70 ℃環境下保存待檢。采用實時熒光定量PCR（RT-PCR）分別檢測血清miR-122和miR-21表達。采用TaqMan miRNA ABC純化試劑盒（賽默飛世爾科技公司）提取細胞的總RNA。根據目標基因的mRNA序列設計引物。以反轉錄產物為模板在7500型熒光定量聚合酶鏈式反應儀（美國ABI公司）上進行擴增。反應條件為：94 ℃、3 min，94 ℃、20 s，65 ℃、40 s，循環35次。最后以2^-△△CT方法計算miR-122和miR-21的相對表達量。所有操作步驟均按照說明書嚴格執行。

1.3 統計學方法

采用SPSS 20.0軟件進行統計學分析。計量資料數據以±s表示，兩組均數比較采用獨立樣本t檢驗。計數資料以例數和百分數表示，組間比較采用χ²檢驗。采用多因素Logistic回歸分析肝癌介入術后影響急性肝衰竭發生的危險因素。構建聯合診斷的Logistic回歸模型，并計算指標聯合的預測概率，以受試者工作特征（ROC）曲線分析血清miR-122和miR-21表達對TACE術后急性肝衰竭的預測價值。以Plt;0.05為差異有顯著性。

2 結" 果

2.1 影響TACE術后急性肝衰竭的單因素分析

兩組的性別、年齡、BMI、腫瘤長徑等指標比較，差異均無統計學意義（Pgt;0.05）。與對照組相比較，觀察組門靜脈癌栓構成比、介入次數、血清miR-122和miR-21表達均明顯升高，差異有統計學意義（χ²=11.15 t=5.803～6.305，Plt;0.05）。提示門靜脈癌栓構成比、介入次數、血清miR-122和miR-21表達等指標可能是影響TACE術后急性肝衰竭發生的相關因素。見表1。

2.2 影響TACE術后急性肝衰竭的多因素分析

以門靜脈癌栓、介入次數、miR-122和miR-21作為自變量，以肝癌TACE術后發生急性肝衰竭為因變量進行多因素Logistic回歸分析。結果顯示，門靜脈癌栓、介入次數、miR-122和miR-21等變量是影響肝癌TACE術后發生急性肝衰竭的風險因素（OR=0.351～3.425，95%CI=（0.218～1.809）～（0.565～6.483），P均lt;0.05），其回歸方程式為Y=0.955×門靜脈癌栓＋1.097×介入次數＋1.231×miR-122-1.048×miR-21-3.151。提示門靜脈癌栓、介入次數、血清miR-122和miR-21表達與肝癌TACE術后急性肝衰竭發生密切相關。見表2。

2.3 miR-122和miR-21預測TACE術后急性肝衰竭的ROC曲線分析

ROC曲線分析表明，血清miR-122和miR-21表達預測肝癌TACE術后出現急性肝衰竭的AUC分別為0.750和0.768，其靈敏度分別為72.1%和75.4%，特異度分別為65.6%和74.2%；兩個指標聯合預測的AUC為0.845，靈敏度為80.3%，特異度為79.6%。提示miR-122和miR-21聯合檢測對肝癌TACE術后發生急性肝衰竭有較高的預測價值。見表3和圖1。

3 討" 論

原發性肝癌是我國常見的惡性腫瘤，我國每年約有38.3萬人死于肝癌，占全球肝癌死亡人數的50%以上^[10]。肝細胞癌是原發性肝癌的病理類型之一，肝癌發生是一個多步驟的復雜過程，從慢性肝炎開始，通過肝硬化逐步發展成為肝癌^[11-12]。由于肝癌發病的隱匿性導致非手術治療成為其主要治療方式，盡管TACE治療能夠取得一定效果，但治療后轉移和復發率較高^[13-15]。miRNA在多種腫瘤中異常表達，且其表達水平與腫瘤的進展與預后高度相關。研究顯示，肝癌組織中miR-21和miR-122表達顯著高于癌旁組織，且其對肝癌診斷準確性高于甲胎蛋白，但其與肝癌TACE術后的預后是否存在關聯仍需探索^[16-17]。因此，本研究探討了miR-21和miR-122表達與肝癌TACE術后發生急性肝衰竭風險的關系，旨在為臨床篩選低風險肝癌病人接受TACE治療提供依據。

本研究將154例肝癌病人根據實施TACE治療后是否發生急性肝衰竭分為兩組，比較兩組臨床資料等相關指標。結果顯示，兩組門靜脈癌栓、介入次數、血清miR-122和miR-21表達比較差異均有顯著性。多因素Logistic回歸分析顯示，門靜脈癌栓、介入次數、血清miR-21和miR-122均是影響肝癌TACE術后發生急性肝衰竭的危險因素。既往研究已證明，miR-21和miR-122在肝癌術后病人體內的表達存在差異^[18-19]。但也有研究報道，門靜脈癌栓和介入次數對肝癌TACE術后急性肝衰竭并無顯著影響^[20]。造成結果不一致的原因可能與納入樣本的個體差異等因素有關，其結果還有待于進一步研究。miR-21是一種致癌miRNA，首次發現于神經膠質細胞中，它通過抑制細胞凋亡來促進腫瘤細胞的發生發展^[21]。在肝癌中miR-21過表達并促進肝癌進展^[22]。miR-21-5p在肝癌組織和血清中的表達均高于健康對照，它可以與miR-144聯合作為肝癌的生物學標志物^[23-24]。另有研究表明，M 2巨噬細胞衍生的細胞外囊泡遞送的miR-21-5p可以通過靶向YOD1和激活YAP/β-catenin通路來促進肝癌組織CD+ 8T細胞的耗竭，從而促進肝癌的發生^[25]。miR-21過表達還可影響肝癌的藥物治療，敲低miR-21-5p的表達可以抑制肝癌的進展并且增加肝癌細胞對索拉非尼的敏感性，該過程是通過抑制自噬并促進凋亡實現的^[26]。miR-122是腫瘤抑制因子，也是第一個被發現在肝臟特異性表達的miRNA，它參與肝癌細胞的增殖、分化以及遷移等過程，能夠抑制的發生發展，如果miR-122的表達水平偏低，則難以抑制癌細胞的增殖，會影響TACE的治療效果、增加不良預后^[27-29]。miR-122除了能直接靶向調控原癌基因以外，其過表達還能夠降低癌細胞的葡萄糖攝取，通過靶向調控細胞周期蛋白G 1和負靶向調控SIRT1等方式影響肝癌細胞的周期進程^[30-31]。在肝癌中，lncRNA-SOX2OT通過抑制miR-122-5p的表達，可致其靶基因上調PKM2表達并促進肝癌轉移，PKM2激活了肝癌細胞的糖酵解途徑，從而促進了上皮間充質轉化^[32]。已有研究顯示，血清miR-122低表達的肝癌病人具有更好的預后^[7，33]。還有研究表明，在對索拉非尼具有抗藥性的肝癌細胞中，miR-122的表達顯著降低，并可激活靶基因IGF-1R表達，從而抑制了索拉非尼促進的細胞凋亡過程，因此，miR-122的靶向治療可能會提高對索拉非尼耐藥肝癌的療效^[34]。本研究結果也表明，血清miR-21表達較高是肝癌TACE術后急性肝衰竭的保護因素，血清miR-122表達較高是肝癌TACE術后急性肝衰竭的危險因素。

進一步繪制ROC曲線來評價血清miR-122和miR-21表達對肝癌TACE術后急性肝衰竭風險的預測價值，結果顯示二者聯合預測的AUC可增加至0.845，且靈敏度和特異度均升高，表明血清miR-122和miR-21聯合檢測對預測肝癌TACE術后出現急性肝衰竭的風險更有價值。提示臨床上在應用TACE治療肝癌之前進行血清miR-122和miR-21聯合檢測，可根據二者表達水平而采取科學的干預措施，以有利于改善病人的預后。同時，miR-122和miR-21生物標志物能夠動態地反映肝癌術后不良預后的進程，且操作簡便快捷，具有一定臨床推廣價值。但本研究也存在一定的局限，本研究納入樣本量較少，結果可能會出現偏倚，不能涵蓋全部肝癌的檢測指標，且該模型的臨床推廣與應用還需大量的數據與樣本支持。因此，在未來對于肝癌的研究中，需要擴大樣本量，增加檢測的指標種類，以更深入地研究miR-122和miR-21的調控機制，為臨床肝癌TACE術后急性肝衰竭的風險預測提供依據。

綜上所述，門靜脈癌栓、介入次數、血清miR-122和miR-21等指標均是肝癌TACE術后發生急性肝衰竭的影響因素，而聯合檢測血清miR-122和miR-21表達具有較高的預測價值，這對肝癌TACE術后早期急性肝衰竭風險的預測和提高治療效果有重要的臨床意義。

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（本文編輯 于國藝）