血清miR-15a、SAA4及尿ctDNA水平對非肌層浸潤性膀胱癌TURBT術后預后的預測價值

［摘要］ 目的 探究血清非編碼小分子miR-15a、淀粉樣蛋白A4（SAA4）及尿循環腫瘤DNA（ctDNA）水平對非肌層浸潤性膀胱癌（NMIBC）經尿道膀胱腫瘤電切術（TURBT）術后預后的預測價值。

方法 選取2018年3月—2023年3月在我院接受TURBT治療的NMIBC病人100例，其中41例術后復發或進展（預后不良組），59例預后良好（預后良好組）。比較兩組間臨床指標、血清miR-15a、SAA4及尿ctDNA水平的差異，分析影響預后的因素及其預測價值。

結果 與預后良好組比較，預后不良組年齡gt;60歲、男性、T1分期、G2-G3分級占比升高（χ²=4.286～26.07 Plt;0.05），血清miR-15a水平降低（t=9.02 Plt;0.05），血清SAA4、尿ctDNA水平升高（t=14.090、34.010，Plt;0.05）。多因素Logistic回歸分析顯示，血清miR-15a、SAA4及尿ctDNA水平影響病人的預后，三者診斷病人預后不良的受試者工作特征曲線下面積分別為0.889、0.841、0.988。

結論 血清miR-15a、SAA4及尿ctDNA水平是預測NMIBC病人TURBT術后預后的有效生物標記，具有較高的預后預測價值。

［關鍵詞］ 膀胱腫瘤；經尿道膀胱腫瘤電切術；微RNAs；淀粉樣β肽類；循環腫瘤DNA；預后；預測

［中圖分類號］ R737.14

［文獻標志碼］ A

［文章編號］ 2096-5532（2024）06-0894-04

doi：10.11712/jms.2096-5532.2024.60.198

［開放科學（資源服務）標識碼（OSID）］

［網絡出版］ https：//link.cnki.net/urlid/37.1517.R.20250107.1910.007;2025-01-08 13：34：20

Value of serum microRNA-15a， serum amyloid A "and urinary circulating tumor DNA in predicting the prognosis of patients with non-muscle-invasive bladder cancer after transurethral resection of bladder tumor

ZHANG Lianwei， LI Ping， LIU Yuhua， GUO Kefeng

（Department of Oncology， Yellow River Sanmenxia Hospital， Sanmenxia 472000， China）

［Abstract］ Objective To investigate the value of serum non-coding microRNA-15a （miR-15a）， serum amyloid A4 （SAA4）， and urinary circulating tumor DNA （ctDNA） in predicting the prognosis of patients with non-muscle-invasive bladder cancer （NMIBC） after transurethral resection of bladder tumor （TURBT）.

Methods "A total of 100 patients with NMIBC who underwent TURBT in our hospital from March 2018 to March 2023 were enrolled， among whom 41 experienced postoperative recurrence or progression （poor prognosis group） and 59 had a good prognosis （good prognosis group）. The two groups were compared in terms of clinical indices， serum miR-15a， SAA "and urinary ctDNA to investigate the influencing factors for prognosis and analyze their predictive value.

Results "Compared with the good prognosis group， the poor prognosis group had a significant increase in the proportion of patients with an age of gt;60 years， male sex， T1 stage or G2-G3 grade （χ²=4.286-26.07 Plt;0.05）， a significant reduction in the serum level of miR-15a （t=9.02 Plt;0.05）， and a significant increase in SAA4 and urinary ctDNA （t=14.090，34.010，Plt;0.05）. The multivariate Logistic regression analysis showed that serum miR-15a， SAA "and urinary ctDNA affected the prognosis of patients， with an area under the receiver operating characteristic curve of 0.889， 0.84 "and 0.988， respectively， for the diagnosis of poor prognosis.

Conclusion Serum miR-15a， SAA "and urinary ctDNA are effective biomarkers for predicting the prognosis of NMIBC patients after TURBT， with a relatively high predictive value for prognosis.

［Key words］ urinary bladder neoplasms; transurethral resection of bladder tumor; microRNAs; amyloid beta-peptides; circulating tumor DNA; prognosis; forecasting

非肌層浸潤性膀胱癌（NMIBC）是一種起源于膀胱黏膜層并局限于黏膜和黏膜固有層內，尚未侵犯到肌層的膀胱惡性腫瘤^[1]。經尿道膀胱腫瘤電切術（TURBT）是NMIBC的主要治療方法，但術后復發風險較高^[2-3]。尋找有效的生物標記預測術后預后至關重要^[4]。血清中的非編碼小分子miR-15a、淀粉樣蛋白A4（SAA4）以及尿中的循環腫瘤DNA（ctDNA）等生物標記能夠反映腫瘤活動及病人的免疫反應，對預測膀胱癌的復發和進展具有潛在價值^[5-7]。但是這些生物標記在預測NMIBC病人TURBT術后預后方面的研究較少。本研究分析上

述生物標記對NMIBC病人術后預后的預測價值，為臨床治療和病人管理提供新的參考。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取2018年3月—2023年3月在我院接受TURBT治療的NMIBC病人100例。納入標準：①病理學檢查首次確診NMIBC；②可進行TURBT手術；③首次接受治療；④術前未接受放化療。排除標準：①合并嚴重的心、腦、肝、腎等疾病；②合并嚴重傳染性及免疫系統疾病；③伴有神經或精神系統障礙，無法正常溝通交流；④術前評估無法進行手術治療。通過電話或門診對病人進行術后隨訪，隨訪時間為術后1年。膀胱鏡檢查膀胱內部如出現新的腫瘤或原有腫瘤再次出現則診斷為復發或疾病進展。41例病人存在復發或進展情況（預后不良組），59例病人預后良好（預后良好組）。本研究經醫院倫理委員會批準（倫理號20180209006）。病人及家屬均知情同意。

1.2 觀察指標

1.2.1 臨床及病理相關資料 收集病人的年齡、性別以及腫瘤直徑、數目、T分期、G分級等資料。

1.2.2 血清miR-15a水平 根據文獻報道的方法進行檢測^[8]，以U6為內參照，miR-15a的正向引物為5′-GCGGTAGCAGCACATAA-3′，反向引物為5′-GTGCAGGGTCCGAGGT-3′。嚴格按照試劑盒說明書操作，關注熒光信號變化并記錄，最終通過軟件分析得出miR-15a的相對表達量。

1.2.3 血清SAA4水平 采集病人術前空腹肘靜脈血3 mL，離心留取上層血清待測。采用酶聯免疫吸附試驗法檢測血清SAA4水平，所用試劑盒購自上海科培瑞公司。

1.2.4 尿ctDNA水平 尿液樣本的收集及處理根據文獻所示操作步驟進行^[9]，要確保樣本的純凈與有效。采用德國希爾登QIAGEN公司的QIAAMP循環核酸試劑盒，以及50 μL AVE緩沖液，進行ctDNA的高效提取。

設計特異性引物，于7500型實時熒光定量PCR儀上進行PCR擴增。通過配套的軟件分析PCR擴增后的熒光信號數據，計算出ctDNA的含量。

1.3 統計學方法

采用SPSS 26.0軟件進行數據分析。計數資料以例數和百分比表示，組間比較采用卡方檢驗。計量資料以±s表示，組間比較采用兩獨立樣本t檢驗。采用多因素Logistics回歸分析影響病人預后的因素。通過受試者工作特征（ROC）曲線下面積（AUC）分析各指標對病人預后的預測價值。Plt;0.05為差異有統計學意義。

2 結" 果

2.1 兩組病人臨床及病理相關資料比較

預后不良組病人年齡gt;60歲、男性、T1分期、G2-G3分級占比均高于預后良好組（χ²=4.286～26.07 Plt;0.05）。見表1。

2.2 兩組病人血清miR-15a、SAA4及尿ctDNA水平比較

預后不良組病人的血清miR-15a水平低于預后良好組（t=9.02 Plt;0.05），血清SAA4及尿ctDNA水平高于預后良好組（t=14.090、34.010，Plt;0.05）。見表2。

2.3 影響病人預后的多因素Logistic回歸分析

以表1、2中有統計學意義的指標為自變量，以預后為因變量（預后不良= 預后良好=0）進行多因素Logistic回歸分析。結果顯示，血清miR-15a、SAA4及尿ctDNA水平是預后的獨立影響因素，其中血清miR-15a水平為保護因素，血清SAA4及尿ctDNA水平為危險因素。見表3。

2.4 血清miR-15a、SAA4及尿ctDNA水平對病人預后的預測價值

血清miR-15a、SAA4及尿ctDNA均對病人的預后具有較高的預測價值，其AUC值分別為0.889、0.988、0.841。見表4、圖1。

3 討" 論

NMIBC是泌尿系統常見的惡性腫瘤，其治療后的復發與進展一直是臨床關注的重點^[10]。本研究聚焦于血清miR-15a、SAA4以及尿液ctDNA等生物標志物，探討其對NMIBC病人TURBT術后預后的預測價值。

本研究結果顯示，預后良好組與預后不良組在腫瘤直徑、腫瘤數目方面差異無顯著性，提示傳統基于腫瘤物理特性的評估方法不足以全面反映病人的預后。而年齡、性別、腫瘤分期和分級等因素在兩組間存在顯著差異，這與以往研究結果相吻合，進一步證實了這些因素在預后評估中的重要性^[11-12]。

本研究結果顯示，預后不良的NMIBC病人血清miR-15a水平顯著低于預后良好組，與先前miR-15a作為膀胱癌抑癌因子的文獻報道相吻合^[13-14]。以往研究主要聚焦于miR-15a在腫瘤組織中的表達及功能^[15]。而本研究進一步強調了miR-15a在預測NMIBC病人TURBT術后預后中的重要性。miR-15a通過精細調控靶基因表達，抑制腫瘤生長和轉移相關基因表達，在膀胱癌中發揮抑癌作用。當血清miR-15a水平下降時，這種抑制作用減弱，腫瘤細胞獲得更強的生長和轉移能力，同時免疫細胞的抗癌能力也下降，從而增加了癌癥復發和進展的風險。這種多層次的機制探討為理解miR-15a在預測預后中的作用提供了新視角。有研究表明，SAA4作為一種急性期反應蛋白，在炎癥和感染期間顯著上升，并與多種腫瘤的發生、發展及預后相關^[16-17]。本研究結果顯示，預后不良組病人的血清SAA4水平顯著高于預后良好組，這為NMIBC的預后評估提供了新的視角，也深化了對SAA4在腫瘤進展中所扮演角色的理解。血清中SAA4水平升高往往提示機體處于炎癥狀態，這種炎癥狀態不僅通過促進腫瘤細胞的增殖和血管生成來支持腫瘤的生長與擴散，還可能抑制機體的免疫反應，使腫瘤細胞更容易逃脫免疫系統的監控與攻擊，導致預后不良。高水平的尿ctDNA往往與腫瘤細胞的持續活躍和侵襲性相關^[18-19]。本文結果顯示，預后不良組病人尿ctDNA水平顯著高于預后良好組，表明尿ctDNA水平高的NMIBC惡性程度較高，具有較高的復發和進展風險。

多因素回歸分析顯示，血清miR-15a、SAA4及尿ctDNA水平均對NMIBC病人TURBT術后預后存在影響，其中血清miR-15a為保護因素，血清SAA4及尿ctDNA為危險因素。ROC曲線分析顯示，上述指標均對病人的預后有較高的預測價值。傳統腫瘤分級（G2-G3級）與分期（T1期）對病人預后無顯著影響，表明在特定生物標記聯合分析下，傳統分級與分期作用可能被削弱^[20]。深入探究這些生物標記與腫瘤病理特征的交互機制，對完善預后評估體系至關重要。

綜上所述，血清miR-15a、SAA4及尿ctDNA水平是預測NMIBC病人TURBT術后預后的有效生物標記，預后不良病人血清miR-15a水平較低，而血清SAA4和尿ctDNA水平較高，三者對預后具有較高的預測價值。

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（本文編輯 周曉彬）