施藥頻次對水稻穗頸瘟防控效果及糙米中藥劑殘留的影響

摘要

為明確常用的8種殺菌劑施藥不同次數后對水稻穗頸瘟的防治效果及在收獲后稻米中的最終殘留量，采用超高效液相色譜串聯質譜法（UPLCMS/MS）分別檢測、分析了不同殺菌劑施藥1次、2次和3次后在稻米中的最終殘留量及其對水稻穗頸瘟的防治效果。結果表明：相同藥劑施藥次數越多，對稻瘟病防治效果越好，但稻米最終殘留量也越高。施藥1次，吡唑醚菌酯和嘧菌酯防治效果gt;90%;施藥2次，三環唑、吡唑醚菌酯和嘧菌酯防治效果gt;90%;施藥3次，三環唑、稻瘟靈和嘧菌酯防治效果gt;90%。除稻瘟靈施藥3次后最終殘留超過最大殘留限，其余藥劑均未超標。綜上所述，"采用三環唑、嘧菌酯或吡唑醚菌酯分別在水稻破口期及齊穗期施藥1次，能有效防治水稻穗頸瘟，無殘留風險，適用于水稻綠色生產。

關鍵詞

稻瘟病;"殺菌劑;"藥劑殘留;"防治效果

中圖分類號：

S"435.111.41

文獻標識碼："B

DOI："10.16688/j.zwbh.2023613

Inpact"of"application"frequency"on"control"effect"of"rice"neck"blast"and"residue"of"fungicides"in"brown"rice

ZHANG"Guo1，"YU"Julong1，"LING"Hong2，"ZHANG"Xinfeng1，"CHENG"Jinjin3，"ZHU"Feng4，YU"Xiangyang3，"ZHANG"Jianhua1，"YAO"Kebing1，"SHU"Zhaolin1*

（1."Institute"of"Zhenjiang"Agricultural"Sciences"Jiangsu"Hilly"Region，nbsp;Jurong"212400，"China;"2."Zhenjiang"

Dantu"District"Fengchan"Agricultural"Machinery"Professional"Cooperative，"Zhenjiang"212125，"China;"

3."Institute"of"Food"Safety"and"Nutrition，"Jiangsu"Academy"of"Agricultural"Sciences，"Nanjing"210014，"China;"

4."Jiangsu"Provincial"Plant"Protection"and"Quarantine"Station，"Nanjing"210036，"China）

Abstract

The"aim"of"this"experiment"was"to"determine"the"control"effect"of"eightnbsp;common"fungicides"on"rice"neck"blast"and"the"residue"in"rice"after"application"at"different"frequencies."Three"application"frequencies"were"set"up，"including"once，"twice"or"three"times"in"the"experiment."We"monitored"the"effect"of"different"treatments"on"rice"neck"blast，"and"the"method"of"ultrahigh"performance"liquid"chromatographytandem"mass"spectrometry"（UPLCMS/MS）"was"used"to"determine"the"residue"in"different"treatments"of"rice."The"results"showed"that"for"any"of"these"fungicides，"the"more"times"of"application，"the"better"the"control"effect"of"rice"blast"and"the"higher"the"reside"of"fungicide"in"rice."When"applied"once，"the"control"efficacy"of"pyraclostrobin"and"azoxystrobin"was"more"than"90%."When"applied"twice，"the"control"efficacy"of"tricyclazole，"pyraclostrobin"and"azoxystrobin"was"more"than"90%."When"applied"three"times，"the"control"effect"of"tricyclazole，"isoprothiolane"and"azoxystrobin"was"more"than"90%."The"final"residue"exceeded"the"maximum"residue"limit"in"the"treatment"of"three"times"application"of"isoprothiolane，"while"other"treatments"in"this"experiment"did"not"lead"to"excessive"residues."In"conclusion，"the"application"of"tricyclazole，"pyraclostrobin"or"azoxystrobin"once"at"the"break"stage"and"the"other"time"at"full"heading"stage"can"effectively"control"rice"neck"blast"without"residual"risk，"and"is"suitable"for"rice"green"production.

Key"words

rice"blast;"fungicide;"residue;"control"effect

稻瘟病是由稻瘟病菌Pyricularia"oryzae侵染引起的一種真菌性病害［1］，是水稻上發生最嚴重的病害之一，可造成水稻減產10%～20%，嚴重時甚至絕收［2］。實際生產過程中，稻瘟病的防治主要以種植抗病品種為主，同時輔以田間栽培管理和藥劑防治［3］，但由于稻瘟病菌遺傳多樣性以及生理小種群體結構形成的突發性，導致一些抗病品種在種植幾年后抗性逐漸喪失［4］;此外田間栽培管理主要是針對稻瘟病的發病條件采取的一些措施，若管理不當，極有可能造成稻瘟病的大暴發［5］。因此，藥劑防治仍是當下防治稻瘟病最直接有效的方法。

目前，生產上常用的化學藥劑主要為三環唑、吡唑醚菌酯、咪鮮胺、稻瘟靈、戊唑醇等單劑及其復配劑［6］，但不同殺菌劑對稻瘟病防治效果也各有差異。研究顯示，三環唑對稻瘟病具有預防作用，防治效果在61%～93%之間，藥效因使用時期和用量的不同而有所差別［78］。25%吡唑醚菌酯懸浮劑、9.5%吡唑醚菌酯微囊懸浮劑在田間對葉瘟、穗瘟的防效非常好［910］。室內和田間試驗證明，30%嘧菌酯懸浮劑對稻瘟病具有較好的防治效果［11］。李洪林等對比8種殺菌劑對稻瘟病菌的室內毒力及田間防效發現，咪鮮胺、戊唑醇和稻瘟靈對稻瘟病菌毒力較強，稻瘟酰胺對田間穗莖瘟防效最高［12］。

在實際生產過程中，農民通常為穩產而過量用藥，從而導致稻米中農藥殘留超標，進而對人體健康產生威脅［13］。但在保證稻瘟病防效的基礎上，如何安全使用農藥、減少稻米中的農藥殘留量，并符合無公害要求目前還沒有一套較完整的、可執行的技術規范。因此，本研究以當下常用的8種殺菌劑為對象，研究各藥劑在不同施藥次數后對稻瘟病的田間防治效果和稻米中最終農藥殘留，旨在了解適用于水稻田施用的低殘留農藥品種，掌握最佳的施藥適期與施藥次數，以確保稻米的安全品質。本研究通過相關農藥施用期與施用次數后稻米中最終農藥殘留，并根據國家食品中允許最高殘留量標準，對稻田科學用藥防治稻瘟病，為生產優質無公害大米提供理論依據。

1"材料與方法

1.1"試驗材料

40%三環唑懸浮劑（SC），江蘇艾津作物科技集團有限公司;20%稻瘟酰胺懸浮劑（SC），江蘇長青生物科技有限公司;40%稻瘟靈乳油（EC），江蘇龍燈化學有限公司;2%春雷霉素水劑（AS），日本北興化學工業株式會社;9%吡唑醚菌酯微囊懸浮劑（CS），巴斯夫歐洲公司;430"g/L戊唑醇懸浮劑（SC），江蘇長青生物科技有限公司;250"g/L嘧菌酯懸浮劑（SC），英國先正達有限公司;40%咪鮮胺水乳劑（EW），江蘇富田農化有限公司。

1.2"田間試驗設計

1.2.1"試驗田概況

試驗地點位于江蘇省鎮江市農業科學院農業科技創新中心（行香）基地（119.31°E，31.96°N），水稻品種為‘南粳晶谷’，2022年5月16日旱育秧，6月15日移栽。試驗田地勢平整，灌溉排水方便。試驗前及試驗期間未對靶標生物及其他非靶標生物使用其他藥物進行防治。

1.2.2"試驗處理

試驗設置9個處理，供試藥劑具體使用劑量見表1，各處理隨機排列，每個處理重復3次，小區面積66.7"m2，處理間用泥埂隔開，防止田水串流。

分別在水稻破口期（9月2日）、齊穗期（9月8日）及齊穗后10"d（9月18日）用藥，采用3WBD16型背負式電動噴霧器粗噴霧，藥液量600"L/hm2。其中1次施藥指水稻破口期用藥，2次施藥指水稻破口期和齊穗期用藥，3次施藥指水稻破口期、齊穗期和齊穗后10"d用藥。

1.2.3"稻瘟病調查

最后一次施藥后14"d進行藥效調查，每小區5點取樣，每點調查50穗，記錄發病情況，按

農藥田間藥效實驗準則（一）殺菌劑防治水稻葉部病害：GB/T"17980.192000分級

計算防治效果。病情分級標準具體為0級：無病;1級：每穗損失6%以下，個別枝梗發病;3級：每穗損失6%～20%，1/3左右枝梗發病;5級：每穗損失21%～50%，穗頸或主軸發病，谷粒半癟;7級：每穗損失51%～70%，穗頸發病，大部分癟谷;9級：每穗損失71%～100%，穗頸發病，造成白穗。

病情指數=Σ（各級病穗數×相對級數值）

調查總穗數×9×100;

防治效果=（空白對照區病情指數-處理區病情指數）/空白對照區病情指數×100%。

1.3"農藥殘留檢測

1.3.1"取樣時間及方法

水稻于2022年10月26日收割，各小區單獨收割，待脫粒自然晾干后，每小區取稻谷3"kg脫殼后（糙米）置于-18℃條件下冷凍干燥保存。

1.3.2"試驗藥品

甲醇和乙腈（色譜純），美國默克公司;甲酸銨（≥98%），德國CNW公司;質譜用水為屈臣氏蒸餾水。三環唑（≥98%）、稻瘟酰胺（≥98%）、稻瘟靈（≥99%）、吡唑醚菌酯（≥99%）、戊唑醇（≥99%）、嘧菌酯（≥99%）和咪鮮胺（≥98%）標準樣品均由江蘇省農業科學院檢測中心（中心實驗室）提供。

1.3.3"試驗儀器

三重四極桿串聯液相質譜聯用儀（Agilent"1290，ABsciex"4500），安捷倫科技有限公司;XP105DR型電子天平，賽多利斯科學儀器有限公司;AWL020IP超純水系統，艾科浦儀器有限公司;KQ250E型超聲波清洗器，昆山禾創超聲儀器有限公司;H2050R型醫用離心機，湖南湘儀實驗室儀器開發有限公司。

1.3.4"樣品分析方法建立

液相色譜柱為Agilent"C18色譜柱（100"mm×2.1"mm，1.7"μm）。流動相為含0.1%甲酸的5"mmol/L甲酸銨溶液（A）甲醇（B），75%甲醇等度洗脫10"min。流速為200"μL/min，柱溫40℃;進樣量1"μL。

質譜檢測條件：正離子模式（ESI+），檢測方式為多反應監測（multiple"reaction"monitoring，MRM），氣簾氣：35"psi;噴霧電壓：5"500"V;霧化溫度：450℃;霧化氣：40"psi;輔助氣：40"psi;其他MRM參數見表2。

1.3.5"樣品檢測方法

將1.3.1中保存待檢的糙米樣品在高速粉碎機中研磨粉碎，混勻后準確稱取5.0"g糙米于50"mL離心管中，加入10"mL蒸餾水，渦旋振蕩混勻30"s;加入直徑4"mm瓷珠和乙腈"10"mL，再次渦旋混勻30"s;加入無水MgSO4"5.5"g，NaCl"1.5"g，檸檬酸二鈉0.5"g和檸檬酸鈉1.0"g，迅速混勻，于振蕩器中高速振蕩10"min，于4"000"r/min"4℃下離心5"min;取上清液，加入PSA"0.1"g，無水MgSO4"0.6"g，GCB"10"mg，高速振蕩10"min，于4"000"r/min"4℃下離心5"min;取上清液2"mL，過0.22"μm濾膜，待測定。

1.4"統計分析

利用Excel"2010和SPSS"20.0對試驗數據進行統計，并以單因素方差分析（Oneway"ANOVA）中的Tukey法對田間稻瘟病防治效果和稻米中最終農藥殘留進行差異顯著性檢驗。

2"結果與分析

2.1"相同藥劑不同施藥次數對稻瘟病防治效果

對比各單劑不同施藥次數防治結果，40%三環唑SC施藥1次、2次、3次對稻瘟病防治效果分別為80.65%，93.35%和96.03%，防治效果間無顯著差異;20%稻瘟酰胺SC施藥不同次數間對稻瘟病防治效果均差異顯著，其中施藥3次防治效果最好，為87.80%，施藥1次防治效果最差，僅為73.96%;40%稻瘟靈EC施藥3次對稻瘟病防效最高，為90.00%，顯著高于施藥1次;2%春雷霉素AS同樣為施藥3次防效最高，為75.67%，顯著高于施藥2次和施藥1次;9%吡唑醚菌酯CS不同施藥次數防治效果無顯著差異均在84%以上;430"g/L戊唑醇SC施藥不同次數對稻瘟病防治效果均不理想，其中施藥3次防效最高，為70.39%，顯著高于施藥1次，但與施藥2次無顯著差異;250""g/L嘧菌酯SC"2次施藥防效最高，為95.17%，施藥1次防效最低，為88.50%，施藥不同次數間均無顯著差異;40%咪鮮胺EW對稻瘟病防治效果較差，施藥1次、2次、3次的防治效果分別為17.13%、40.98%、61.82%（圖1）。

2.2nbsp;不同藥劑相同施藥次數對稻瘟病防治效果

對比各單劑在相同施藥次數下對稻瘟病的防治效果，破口期施藥1次9%吡唑醚菌酯CS對稻瘟病防治效果最好，為90.50%，其次是250"g/L嘧菌酯SC，防效為88.50%，兩種藥劑防治效果顯著高于2%春雷霉素AS、430"g/L戊唑醇SC以及40%咪鮮胺EW，但與其他藥劑間均無顯著差異;在水稻破口期和齊穗期施藥2次，250"g/L嘧菌酯SC防效最高，為95.17%，此外，40%三環唑SC以及9%吡唑醚菌酯CS兩種藥劑對稻瘟病防治效果也在90%以上，20%稻瘟酰胺SC防治效果為80.43%，40%稻瘟靈EC防治效果為78.95%，上述5種藥劑間防治效果均無顯著差異，均顯著高于其余3種藥劑;破口期、齊穗期以及齊穗后10"d施藥3次，9%吡唑醚菌酯CS防效最高，為97.44%，其次為"40%三環唑SC和250"g/L嘧菌酯SC，防效分別為96.03%和94.06%，3種藥劑對稻瘟病防效顯著高于40%咪鮮胺EW，但與其他4種藥劑均無顯著差異（圖2）。

2.3"不同次數施藥后各藥劑在稻谷中的殘留分析

檢測最終收獲稻谷中供試藥劑殘留量發現，各藥劑施藥次數越多，殘留量越高，其中三環唑、稻瘟酰胺、稻瘟靈、戊唑醇和嘧菌酯5種藥劑不同施藥次數間，稻谷中藥劑殘留量差異顯著;吡唑醚菌酯殘留量施藥2次和施藥3次間無顯著差異，但兩者均顯著高于施藥1次;咪鮮胺不同施藥次數殘留量均未檢出（未達到最低檢測限）（圖3）。除稻瘟靈外，其他各藥劑不同施藥次數殘留量均遠低于藥劑在稻谷/稻米最大殘留量國家標準（食品安全國家標準"食品中農藥最大殘留限量GB"27632021）。

2.4"不同藥劑相同施藥次數殘留對比

對比不同藥劑相同施藥次數農藥殘留發現，施藥1次各藥劑在稻米中的殘留量為，稻瘟靈gt;稻瘟酰胺gt;三環唑gt;嘧菌酯gt;吡唑醚菌酯gt;戊唑醇gt;咪鮮胺，殘留量均符合國家標準;施藥2次，各藥劑殘留量具體為稻瘟酰胺gt;稻瘟靈gt;三環唑gt;戊唑醇gt;嘧菌酯gt;吡唑醚菌酯gt;咪鮮胺，殘留量也均符合國家標準;施藥3次，各藥劑殘留量分別為：稻瘟靈gt;稻瘟酰胺gt;戊唑醇gt;三環唑gt;嘧菌酯gt;吡唑醚菌酯gt;咪鮮胺，除稻瘟靈殘留超標外，其余藥劑殘留量均低于國家標準（表3）。

3"結論與討論

目前，稻瘟病（穗頸瘟）的防治主要采用化學藥劑如三環唑、吡唑醚菌酯、稻瘟靈、戊唑醇等單劑或復配劑，分別在水稻破口期和齊穗期施藥，若出現連續陰雨高溫高濕天氣，則第2次施藥7～10"d后，再進行第3次施藥。趙麗穩等對比了吡唑醚菌酯、三環唑和春雷霉素3種藥劑在水稻破口期和齊穗期使用后對穗頸瘟的防治效果，發現三環唑和吡唑醚菌酯均能有效控制穗頸瘟發生，且防效極顯著優于春雷霉素［14］。董麗英等研究發現，三環唑和嘧菌酯在水稻始穗期和齊穗期施藥2次，對穗頸瘟防治效果均在85%以上［3］。褚晉等連續3年開展了稻瘟靈田間藥效試驗，發現在水稻破口期前和齊穗期2次施藥，3年穗頸瘟防效分別為79.81%、77.68%和80.20%［15］。本研究對比了常用的8種殺菌劑在不同施藥次數下對稻瘟病的田間防治效果。結果表明，吡唑醚菌酯、嘧菌酯和三環唑在水稻破口期施藥1次就能有效防治穗頸瘟的發生，防治效果均在80%以上;稻瘟酰胺在水稻破口期和齊穗期施藥2次，對稻瘟病也有較好的防治效果;稻瘟靈需在水稻破口期、齊穗期及齊穗后10"d施藥3次，才能有效防治穗頸瘟的發生;其余藥劑3次施藥后對稻瘟病的防治效果均不及80%。從用藥量來看，施藥1次防效在80%以上的藥劑分別為三環唑、吡唑醚菌酯和嘧菌酯，其有效成分劑量分別為20、6.57"g/667m2和25"g/667m2;施藥2次，防效在80%以上藥劑為稻瘟酰胺，累計有效成分劑量為40"g/667m2;3次施藥，防效達到80%以上的藥劑為稻瘟靈，其累計有效成分劑量為120"g/667m2。使用吡唑醚菌酯防治稻瘟病能顯著減少用藥量，減少防治次數，且對稻瘟病防效較好。

但化學藥劑的長期使用不僅會導致病菌抗藥性產生，造成防效下降，還可能在稻谷中形成殘留，降低稻米品質，危害人體健康［16］。錢允輝等通過對比水稻中后期農藥使用次數與農藥殘留量動態關系發現，糙米中農藥殘留量與水稻中后期用藥有關，殘留量與施藥次數、農藥劑量呈正相關［17］。與本研究結果類似，本研究檢測最終收獲稻谷中各藥劑施藥次數越多，殘留量越高。潘夏艷等對比江蘇6個地區的101個稻瘟病菌單孢菌株對稻瘟靈的抗性，顯示全省抗性頻率為12.9%［4］。本研究發現，稻瘟靈在破口期單獨施藥或在破口期與齊穗期施藥2次對稻瘟病防治效果均不足80%，3次施藥雖能保證防效達到90%以上，但稻米中殘留卻超標。稻瘟酰胺是防治稻瘟病的常用藥劑，有研究表明，稻瘟酰胺在水稻植株中半衰期為7.13～7.91"d［18］，本研究3次施藥后，稻瘟酰胺在糙米中最終殘留僅為285.64"μg/kg，遠低于最大殘留限。劉淳劼等通過分析稻瘟酰胺在稻田中的殘留及降解動態發現，稻瘟酰胺在水稻植株中降解速度相對更快，在高劑量施藥4次、施藥間隔7"d，最后一次施藥距采收間隔21"d時稻瘟酰胺在糙米中的最終殘留量最大值為490"μg/kg（殘留限為1"000"μg/kg）［19］。三環唑是具有較強內吸性殺菌劑，嘧菌酯是一種新型甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，2種藥劑亦是防治稻瘟病的常用藥劑。宋世明等通過檢測2種藥劑在水稻植株體內消解動態發現，施藥后"3"d"植株中三環唑的降解率達82.1%～97.1%，施藥后5"d植株中嘧菌酯的降解率達"53.8%～90.1%，二者均屬于易降解農藥［20］。本研究中2種藥劑3次施藥后，均降解較快，稻米最終殘留量遠低于最大殘留限，但不同之處在于嘧菌酯殘留量低于三環唑，這可能是由于本研究中施藥時期處于水稻生長后期（穗期），而上述消解動態研究則在分蘗期施藥，且三環唑本身具有較強內吸性，能迅速地被水稻吸收所導致。

因此，根據試驗結果綜合分析，采用三環唑、嘧菌酯、吡唑醚菌酯和稻瘟酰胺在水稻破口期及齊穗期施藥2次，即可有效防治田間穗頸瘟的發生，且在水稻中最終殘留量較低，大米食用安全，為我國水稻綠色生產提供了技術依據。

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（責任編輯：田"喆）