微生態(tài)制劑對(duì)小丑魚生長(zhǎng)及養(yǎng)殖水質(zhì)的影響試驗(yàn)

摘 要：為探討微生態(tài)制劑對(duì)海水觀賞魚養(yǎng)殖的影響效果，在小丑魚（Amphiprion frenatus）養(yǎng)殖水體中定期加入微生態(tài)制劑，通過60 d的養(yǎng)殖試驗(yàn)，對(duì)比分析了處理組與對(duì)照組的水質(zhì)指標(biāo)和小丑魚的生長(zhǎng)指標(biāo)。結(jié)果顯示，微生態(tài)制劑能顯著降低水體中的氨態(tài)氮和亞硝酸態(tài)氮（P＜0.05），對(duì)穩(wěn)定pH和分解有機(jī)物等具有積極作用。處理組的小丑魚成活率與對(duì)照組相比均有提高，但差異性不顯著（P＞0.05），處理組中微生態(tài)制劑對(duì)小丑魚生長(zhǎng)作用顯著（ P＜0.05） 。

關(guān)鍵詞：小丑魚（Amphiprion frenatus）；水環(huán)境質(zhì)量；特定生長(zhǎng)率；成活率；微生態(tài)制劑

小丑魚（Amphiprion frenatus）是熱帶海水觀賞魚的重要種類之一，在珊瑚礁生態(tài)系統(tǒng)中充當(dāng)非常關(guān)鍵的角色[1]。小丑魚具有生活習(xí)性奇特、外表顏色鮮艷、人工飼養(yǎng)簡(jiǎn)單、市場(chǎng)交易量巨大等特點(diǎn)，在觀賞魚市場(chǎng)份額中占有很高的比例[2]。近年來，隨著小丑魚被廣大消費(fèi)者青睞，需求量增速顯著，但是捕撈自然海區(qū)的小丑魚很難滿足市場(chǎng)，而且捕撈方式（機(jī)械捕撈、人工捕撈等）嚴(yán)重破壞了珊瑚礁生態(tài)系統(tǒng)，基于此，小丑魚的人工繁育受到科研工作者和水族喜好者廣泛關(guān)注[3]。在觀賞魚產(chǎn)業(yè)發(fā)展中，育苗培育是基礎(chǔ)工作，目前由于環(huán)境管控、飼料投喂、水質(zhì)調(diào)節(jié)等處理不當(dāng)，致使有害物質(zhì)大量積累，出現(xiàn)水體惡化，各類疾病頻發(fā)，嚴(yán)重影響了小丑魚苗種的生產(chǎn)與供應(yīng)[4]。

微生態(tài)制劑是一種兼顧生態(tài)型和綠色環(huán)保型的水質(zhì)改良劑和餌料添加劑，因具有廣譜抗藥、無毒無殘留、持續(xù)效果長(zhǎng)等特性，目前在漁業(yè)生產(chǎn)和水產(chǎn)養(yǎng)殖中被廣泛使用[5]。微生態(tài)制劑對(duì)水質(zhì)的改良效果主要通過對(duì)水體中有機(jī)物、銨態(tài)氮、亞硝態(tài)氮等的快速降解，從而增加溶氧量來實(shí)現(xiàn)；微生態(tài)制劑對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物的促生長(zhǎng)作用主要通過調(diào)節(jié)腸道微生物群落結(jié)構(gòu)，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化和吸收，提高飼料轉(zhuǎn)化率，同時(shí)抑制病原微生物的繁殖，預(yù)防疾病發(fā)生來實(shí)現(xiàn)[6]。

基于此，本試驗(yàn)通過在小丑魚培育水體中使用微生態(tài)制劑，研究其對(duì)培育水環(huán)境的改善效果，以及對(duì)小丑魚生長(zhǎng)、成活的影響程度，以期為微生態(tài)制劑在觀賞魚產(chǎn)業(yè)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)，同時(shí)為構(gòu)建小丑魚養(yǎng)殖生態(tài)化體系提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

小丑魚來自遼寧大連老虎灘海洋公園珊瑚館，選擇體質(zhì)量、體長(zhǎng)相近，且健康有活力的個(gè)體。小丑魚平均體質(zhì)量為（0.46±0.07）g，平均體長(zhǎng)為（2.05±0.24）cm。

微生態(tài)制劑采購(gòu)于天津中敖生物科技有限公司，芽孢桿菌、酵母菌活菌濃度均為5×1010 cfu/mL。

小丑魚的飼料為海水魚專用飼料（蛋白質(zhì)含量52.0%），采購(gòu)于湛江博尚生物科技實(shí)業(yè)有限公司。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與方法

試驗(yàn)用魚暫養(yǎng)1周后開始對(duì)比試驗(yàn)。試驗(yàn)在200 Ｌ聚乙烯玻璃水缸（背景為藍(lán)色，缸底部鋪5 cm厚珊瑚砂）[7]中進(jìn)行，共設(shè)3組，每組3個(gè)平行，對(duì)照組（組Ⅰ）投喂海水專用飼料，一個(gè)處理組（組Ⅱ）投喂海水專用飼料＋芽孢桿菌（5.0 mL/m3），另一個(gè)處理組（組Ⅲ）投喂海水專用飼料＋酵母菌（5.0 mL/m3）。每個(gè)水缸中投放魚苗20尾，每天投喂海水魚專用飼料2次，投喂量占魚體重3%～5%，投喂1 h后用虹吸管吸出殘餌。

養(yǎng)殖期間環(huán)境條件：光照保持在400～4 500 lx，水溫控制在27.1～27.3 ℃，鹽度控制在31.2‰～32.1‰，壓縮機(jī)充氣和海水循環(huán)過濾24 h不間斷。每10 d向處理組中補(bǔ)水和重新添加相應(yīng)的微生態(tài)制劑。

1.3 試驗(yàn)指標(biāo)測(cè)定

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)（第60天）對(duì)每缸小丑魚進(jìn)行稱重，并計(jì)數(shù)每缸魚的尾數(shù)。小丑魚的特定生長(zhǎng)率（SGR）和成活率（SR）計(jì)算公式如下：

SGR=（lnWt-lnW0）/t×100%

SR=（Nt/N0）×100%

式中： W0為試驗(yàn)初的平均體質(zhì)量，g；Wt為試驗(yàn)?zāi)┑钠骄w質(zhì)量，g；N0為試驗(yàn)初的魚尾數(shù)，尾；Nt為試驗(yàn)?zāi)┑聂~尾數(shù)，尾；t為試驗(yàn)時(shí)間， d[8]。

培育水質(zhì)參數(shù)的測(cè)定分別在第10天、20天、30天、40天、50天和60天進(jìn)行，每次補(bǔ)水前取水樣，水樣采集參照《水和廢水監(jiān)測(cè)分析方法》（第四版）進(jìn)行。pH值使用便攜式pH計(jì)現(xiàn)場(chǎng)測(cè)定，亞硝酸態(tài)氮（NO-2-N）、銨態(tài)氮（NH+4-N）和化學(xué)需氧量（COD）的實(shí)驗(yàn)室分析方法參照文獻(xiàn)[9-10]進(jìn)行。

1.4 試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，單因素方差分析（One-way ANOVA）結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差表示，P＜0.05代表顯著水平。

2 結(jié)果與分析

2.1 微生態(tài)制劑對(duì)小丑魚生長(zhǎng)的影響

2.1.1 特定生長(zhǎng)率

微生態(tài)制劑對(duì)小丑魚幼魚的特定生長(zhǎng)率影響見圖1。結(jié)果顯示，培育60 d后各處理組（組Ⅱ、組Ⅲ）的特定生長(zhǎng)率與對(duì)照組（組Ⅰ）相比均有顯著性差異（P＜0.05），其中添加酵母菌組的幼魚特定生長(zhǎng)率最高，為（0.97±0.07）%/d，添加芽孢桿菌組的幼魚特定生長(zhǎng)率次之，為（0.92±0.08）%/d，處理組間的差異不顯著（P＞0.05）。

2.1.2 成活率

微生態(tài)制劑對(duì)小丑魚幼魚的成活率影響見圖2。結(jié)果顯示，60 d時(shí)各處理組（組Ⅱ、組Ⅲ）的成活率較對(duì)照組（組Ⅰ）均有提高，其中添加酵母菌組的幼魚成活率最高，為（98.4±12.65）%，添加芽孢桿菌組的幼魚成活率次之（97.8%±11.48%），對(duì)照組與處理組間的差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 微生態(tài)制劑對(duì)水質(zhì)的影響

2.2.1 銨態(tài)氮變化

如圖3所示，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，各組的銨態(tài)氮含量均有不同程度增加，其中對(duì)照組（組Ⅰ）的增幅最大，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)銨態(tài)氮含量達(dá)（0.43±0.04）mg/L。30 d前處理組與對(duì)照組之間差異不顯著（P＞0.05），30 d后差異顯著（P＜0.05）。試驗(yàn)后期（50～60 d）處理組（組Ⅱ）銨態(tài)氮含量顯著低于處理組（Ⅲ組）（P＜0.05），說明芽孢桿菌添加對(duì)降低銨態(tài)氮效果顯著。

2.2.2 亞硝酸態(tài)氮變化

如圖4所示，各組的亞硝酸態(tài)氮含量隨著時(shí)間的延長(zhǎng)均有不同程度增加，其中對(duì)照組（組Ⅰ）的增幅最大，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)含量達(dá)（0.088±0.009）mg/L。微生態(tài)制劑對(duì)亞硝酸態(tài)氮的影響從40 d后開始比較明顯，與對(duì)照組（組Ⅰ）相比，處理組（組Ⅱ、組Ⅲ）亞硝酸態(tài)氮含量的增幅顯著降低（P＜0.05），但處理組間差異不顯著（P＞0.05）。相比之下，酵母菌的添加可有效降低培育水體中的亞硝酸態(tài)氮含量。

2.2.3 化學(xué)需氧量

化學(xué)需氧量（COD）測(cè)定結(jié)果如圖5所示，各組之間COD在30 d之前變化不大，變幅在1.22～1.72之間，差異不顯著（P＞0.05）。30 d后對(duì)照組（組Ⅰ）的COD增加比較明顯，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)COD增加到了（3.05±0.14）mg/L，與處理組（組Ⅱ、組Ⅲ）相比較，差異顯著（P＜0.05）。兩個(gè)處理組間COD的變化基本一致，差異不顯著（P＞0.05）。相比之下，芽孢桿菌對(duì)水體中有機(jī)質(zhì)的降解效果比較顯著。

2.2.4 pH

pH測(cè)定結(jié)果如圖6所示，各組之間pH值隨著時(shí)間延長(zhǎng)均出現(xiàn)不同程度降低，變幅在8.5～7.9之間。對(duì)照組（組Ⅰ）的pH值降低相對(duì)比較明顯，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)pH值降到了7.9±0.09。處理組（組Ⅱ、組Ⅲ）pH值在40 d前差異較大，但不顯著（P＞0.05），40 d后處理組間差異較小，與對(duì)照組（組Ⅰ）相比，呈現(xiàn)出顯著性差異（P＜0.05）。相比之下，酵母菌對(duì)穩(wěn)定pH有顯著效果。

3 討論

3.1 微生態(tài)制劑對(duì)小丑魚生長(zhǎng)的影響

在水產(chǎn)養(yǎng)殖中，微生態(tài)制劑可通過補(bǔ)充飼料中的營(yíng)養(yǎng)成分，改善動(dòng)物胃腸道的微生態(tài)平衡，對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物的生長(zhǎng)、飼料利用率的提高、病害的防治等都具有積極作用。有研究表明，添加中低水平的微生態(tài)制劑（添加量為2.4‰）能促進(jìn)養(yǎng)殖動(dòng)物的生長(zhǎng)，添加高水平的微生態(tài)制劑（添加量為6.0‰）能提高養(yǎng)殖水環(huán)境質(zhì)量，優(yōu)化養(yǎng)殖動(dòng)物腸道微生物群落結(jié)構(gòu)[11]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，處理組小丑魚的特定生長(zhǎng)率顯著高于未添加微生態(tài)制劑組，這與劉立龍等[12]研究的微生態(tài)制劑對(duì)鯉的生長(zhǎng)、張新明等[13]研究的微生態(tài)制劑對(duì)對(duì)蝦的促生長(zhǎng)結(jié)果是一致的。微生態(tài)制劑對(duì)小丑魚生長(zhǎng)性能的提高，可能是因?yàn)槲⑸鷳B(tài)制劑在小丑魚腸道內(nèi)定居、繁殖、擴(kuò)增，增加了腸道內(nèi)的有益菌數(shù)量，通過占據(jù)生存空間、爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)元素、競(jìng)爭(zhēng)生態(tài)位等方式對(duì)有害細(xì)菌產(chǎn)生抑制。微生態(tài)制劑作為一種活性益生菌，在搶奪附著點(diǎn)、產(chǎn)生拮抗作用、增強(qiáng)凈水能力等方面具有積極的效果。此外，水體中潑灑微生態(tài)制劑，可促進(jìn)有益菌優(yōu)勢(shì)種群的形成，抑制病原菌的繁殖，降低患病幾率。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，處理組小丑魚的成活率相比對(duì)照組均有提高，這與武廣等[14]研究的微生態(tài)制劑對(duì)觀賞魚龍睛魚的病害防治作用一致。微生態(tài)制劑可有效降低小丑魚的死亡，提高成活率，可能由于微生態(tài)制劑通過群落間的競(jìng)爭(zhēng)作用與有害菌爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)和空間，抑制了有害菌的繁殖，保護(hù)了外部水體環(huán)境和小丑魚腸道內(nèi)部環(huán)境，從而減少了疾病發(fā)生。

3.2 微生態(tài)制劑對(duì)小丑魚養(yǎng)殖水環(huán)境的影響

水環(huán)境作為水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物外部環(huán)境重要的組成部分，對(duì)于水生動(dòng)物的健康生長(zhǎng)和品質(zhì)保障至關(guān)重要。在觀賞魚養(yǎng)殖中，水環(huán)境質(zhì)量對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育和體色形成存在重大影響。有研究顯示，在觀賞魚養(yǎng)殖水體中通常含有大量殘餌、殘?jiān)⒎置谖铩⑴判刮铩⒏迟|(zhì)等有機(jī)質(zhì)，這些物質(zhì)長(zhǎng)期存在水體中會(huì)促進(jìn)有害菌的滋生，提高寄生蟲繁殖，進(jìn)而導(dǎo)致疾病暴發(fā)。張康等[15]以微生態(tài)制劑作為生態(tài)修復(fù)劑進(jìn)行生物濾池修復(fù)，結(jié)果顯示連續(xù)潑灑微生態(tài)制劑15 d后生物濾池中氨氮、亞硝酸鹽的濃度和COD均出現(xiàn)了顯著下降，而且水體中有益菌數(shù)量增加。曾地剛等[16]通過對(duì)比潑灑枯草芽孢桿菌與未潑灑枯草芽孢桿菌的蝦池發(fā)現(xiàn)，潑灑枯草芽孢桿菌可以顯著降低蝦池的COD和亞硝酸鹽、硫化氫濃度，提高水體總堿度。以上的相關(guān)研究結(jié)果與本研究結(jié)果基本一致，說明微生態(tài)制劑能明顯改善水質(zhì)條件，有效降低營(yíng)養(yǎng)鹽濃度及有毒有害物質(zhì)含量，可為小丑魚營(yíng)造良好的養(yǎng)殖水環(huán)境。

3.3 微生態(tài)制劑在觀賞魚產(chǎn)業(yè)上的應(yīng)用前景

雖然觀賞魚養(yǎng)殖是水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的一個(gè)小小分支，但是作為新興產(chǎn)業(yè)，觀賞魚的價(jià)值遠(yuǎn)高出經(jīng)濟(jì)魚類約100倍[3]。隨著人類生活質(zhì)量的提高和群眾居民消遣方式的轉(zhuǎn)變，觀賞魚養(yǎng)殖業(yè)存在巨大發(fā)展?jié)摿Γ袌?chǎng)前景也非常廣闊。目前，在觀賞魚的健康養(yǎng)殖中微生態(tài)制劑的使用主要包括體外使用（如浸泡生物體，潑灑養(yǎng)殖水體等）和體內(nèi)使用（如拌餌投喂，魚體肌肉注射等）兩種方式，外用方式主要為改善養(yǎng)殖水體水質(zhì)，增加水體透明度、提高養(yǎng)殖動(dòng)物成活率；內(nèi)用方式主要為動(dòng)物體提供營(yíng)養(yǎng)素，改善體腸道消化環(huán)境，提高餌料系數(shù)，增強(qiáng)免疫力。本試驗(yàn)采用的是微生態(tài)制劑潑灑的方式，對(duì)于微生態(tài)制劑拌餌投喂小丑魚的效果分析還需進(jìn)一步試驗(yàn)研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]

符致德，邢詒炫，王蓉，等.小丑魚生物學(xué)特性及高效健康人工繁育技術(shù)[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014（10）：2924-2926.

[2]" 李飛，高欣東，劉洋，等.不同溫度、鹽度條件對(duì)三中小丑魚仔魚發(fā)育和變態(tài)的影響[J].河北漁業(yè)，2022（6）：9-14.

[3]" 邵鑫斌，單樂州，蔡景波.溫度和體長(zhǎng)對(duì)紅小丑魚（Amphiprion frenatus）耗氧率和窒息點(diǎn)的影響[J].浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2015，27（11）：1916-1921．

[4]" 袁增寶.微生態(tài)制劑在觀賞魚養(yǎng)殖中的應(yīng)用[J].水產(chǎn)養(yǎng)殖，2020（7）：42-45.

[5]" 賈新穎，徐晨曦，孫偉彬，等.微生態(tài)制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用[J].河北漁業(yè)，2023（10）：41-45.

[6]" 韓莎，曲洪霞，李成林，等.微生態(tài)制劑及其使用策略對(duì)刺參生長(zhǎng)與養(yǎng)殖水質(zhì)的影響[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)報(bào)，2020，36（2）：144-148.

[7]" 白海鋒，李曉光，張霖，等.八種小丑魚與五種海葵相容性的初步研究[J].水產(chǎn)養(yǎng)殖，2011（11）：11-13.

[8]" 郝佳，蔡明城，陳文博，等.幾種微生態(tài)制劑對(duì)刺參生長(zhǎng)和養(yǎng)殖水體水質(zhì)的影響[J].經(jīng)濟(jì)動(dòng)物學(xué)報(bào)，2015，19（2）：67-73.

[9]" 陳佳榮.水化實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1998：10-120.

[10]" 雷衍之.養(yǎng)殖水環(huán)境化學(xué)實(shí)驗(yàn)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2006：12-228.

[11] 李榮，李海源.微生態(tài)制劑對(duì)草魚生長(zhǎng)性能、腸道菌群及養(yǎng)殖水質(zhì)的影響[J].中國(guó)飼料，2024（2）：63-66.

[12] 劉立龍，趙小合，姬翔.微生態(tài)制劑對(duì)池塘鯉魚生產(chǎn)性能的影響[J].畜牧獸醫(yī)雜志，2018，37（2）：38-40.

[13] 張新明，付寧.微生態(tài)制劑對(duì)凡納濱對(duì)蝦促生長(zhǎng)作用試驗(yàn)[J].水利漁業(yè)，2006，26（4） ：38-39.

[14] 武廣，張超峰.微生態(tài)制劑對(duì)觀賞魚常見病的防治試驗(yàn)[J].河南水產(chǎn)，2006（3）：30-31.

[15] 張康，李秋芬，崔正國(guó)，等.復(fù)合微生態(tài)制劑對(duì)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)老化生物濾池的在線修復(fù)作用[J].大連海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2023，38（4）：645-651.

[16] 曾地剛，雷愛瑩，彭敏，等.枯草芽孢桿菌的分離及其凈化水質(zhì)的研究[J].水利漁業(yè)，2007（6）：55-56.

Effects of microecologics on water quality and growth of clownfish" （Amphiprion frenatus）

LI Zongwen

（Dalian Tiger Beach Scenic Area Development Management Co.， LTD， Dalian 116013，China）

Abstract：In order to explore the effect of microecologics on the culture of the clownfish（Amphiprion frenatus）， microecologics were added to the breeding water of the clownfish regularly，through 50 days of cultivation experiment， the water quality indexes and growth indexes of the clownfish between the treatment group and the control group were compared and analyzed. The results showed that the microecologics could significantly reduce ammonia nitrogen （Plt;0.05） and nitrite nitrogen （Plt;0.05）， and had positive effects on stabilization of pH and decomposition of organic. Compared with the control group， the survival rate of the clownfish in treatment group were increased，but the difference was not significant （P＞0.05）， and the microecologics in treatment group had significant effect on the growth of the clownfish （Plt;0.05）.

Key words：clownfish （Amphiprion frenatus）；water environment quality；specific growth rate；survival rate；microecologics

（收稿日期：2024-06-17）