兩種驅(qū)蟲藥對實驗小鼠體外寄生蟲的治療效果研究

摘要：為研究驅(qū)蟲藥伊維菌素注射液、賽拉菌素滴劑對實驗用小鼠體外寄生蟲的治療效果，為實驗小鼠體外驅(qū)蟲用藥提供參考。伊維菌素注射液采用藥浴方法，藥浴液濃度為0.01 mg/mL和0.005 mg/mL，水溫40 ℃，藥浴時間1 min。賽拉菌素滴劑采用皮膚涂抹方法，按小鼠體重計算給藥量，給藥劑量分別為6 mg/kg·bw和12 mg/kg·bw。伊維菌素給藥后試驗組小鼠體重略有下降，15 d后基本恢復(fù)正常水平，賽拉菌素組小鼠無明顯體重變化，兩種藥物給藥后螨蟲數(shù)量均降為0，伊維菌素藥浴死亡率約為15%。兩種藥物對小鼠體外寄生蟲具有明顯的治療效果。與伊維菌素相比，新型賽拉菌素滴劑安全性更高，實驗鼠死亡率低。

關(guān)鍵詞：balb/c小鼠；KM小鼠；伊維菌素；賽拉菌素；體外寄生蟲；藥浴

實驗動物體外寄生蟲的防治一直是實驗動物生產(chǎn)繁育過程中最難操作的一項工作，尤以螨病防治為甚。部分調(diào)查顯示小鼠體外寄生蟲中螨蟲較為易感，近年均有檢出，但檢出率呈逐年下降趨勢[1]。寄生蟲是影響實驗動物質(zhì)量的重要病原體，也是實驗動物生產(chǎn)和實驗過程中最難于控制的病原體。醫(yī)學(xué)研究中實驗小鼠種源珍貴，涉及多年實驗成果，因此在進(jìn)行多方調(diào)查后，本試驗選取了伊維菌素注射液及賽拉菌素滴劑兩款安全性較高，對動物影響少的驅(qū)蟲藥物。試驗結(jié)果顯示存活小鼠身體狀態(tài)良好，但伊維菌素藥浴小鼠出現(xiàn)少量死亡，后續(xù)跟蹤觀察發(fā)現(xiàn)用藥后小鼠繁殖正常。

伊維菌素（ivermectin）是一種能夠殺死體內(nèi)、體外多種寄生蟲和媒介生物的新型的廣譜、高效、低毒抗生素類抗寄生蟲藥物[2]。近年來，在動物醫(yī)學(xué)中伊維菌素治療動物寄生蟲病取得了很好的臨床效果[3]。目前，伊維菌素在國內(nèi)上市的已有預(yù)混劑、片劑、軟膏劑、注射劑、澆潑溶液等多種劑型，已被廣泛應(yīng)用于豬、馬、牛、羊等多種家畜和野生動物體內(nèi)和體外寄生蟲（蜱、虱、螨等）的治療和預(yù)防[4]。同時使用伊維菌素進(jìn)行藥浴，對實驗動物體表螨蟲的治療具有顯著效果[5]。其作用機(jī)理為通過促進(jìn)蟲體內(nèi) GABA 的產(chǎn)生來阻斷神經(jīng)信號傳遞并打開由谷氨酸控制的氯離子通道，使蟲體的細(xì)胞膜對氯離子的滲透性增強(qiáng)，致使突觸后膜發(fā)生超極化，從而使突觸后膜興奮性點(diǎn)位去極化程度達(dá)不到閾值進(jìn)而產(chǎn)生抑制作用，隨著GABA 的釋放量的不斷增加，蟲體因神經(jīng)信號傳遞被阻斷，引起非痙攣性神經(jīng)肌肉麻痹而死亡[6]。哺乳動物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)中盡管也存在GABA，但其血腦屏障可以阻止伊維菌素的進(jìn)入，且該藥的治療劑量一般較小，故對大多數(shù)哺乳動物的安全性較強(qiáng)[7]。1%伊維菌素注射給藥劑量一般為0.02～0.03 mL/kg·bw。

賽拉菌素是抗動物體內(nèi)、體外寄生蟲藥，其對很多寄生蟲都有廣泛的抑制和殺滅作用，包括蚤類、疥螨、蜱、鉤蟲、虱、線蟲和犬惡絲蟲等[8-13]，賽拉菌素作為一種優(yōu)良的寵物用抗寄生蟲藥，其劑型的研究也取得了一定的進(jìn)展。目前，賽拉菌素制劑有滴劑和溶液均供外用[14]。在制劑的透皮試驗中，大鼠和小鼠的給藥劑量是10 g/kg·bw，該劑量大于臨床推薦劑量6 mg/kg·bw（原料藥）[8，10]的100倍，未見任何不良反應(yīng)，結(jié)果提示賽拉菌素制劑臨床用藥劑量是安全的[15]。

1 試驗內(nèi)容

1.1 試驗材料

1）藥品及儀器。伊維菌素注射液，生產(chǎn)企業(yè)為陜西梅迪亞生物科技有限公司，規(guī)格：按伊維菌素計算5 mL：50 mg，批準(zhǔn)文號：獸藥字041211126；賽拉菌素滴劑生產(chǎn)企業(yè)為碩騰公司，批準(zhǔn)文號：（2019）外獸藥證字15號；甘油若干；飲水（符合實驗動物飲用水標(biāo)準(zhǔn)）足量；Co-60輻照墊料若干；30%過氧化氫、市售殺蟲氣霧劑（胺菊酯0.3%，氯氰菊酯0.15%，右旋烯丙菊酯0.1%）；倒置顯微鏡1臺。

2）動物。BALB/C小鼠、KM小鼠各30只，購自濟(jì)南鵬悅實驗動物有限公司。

1.2 試驗方法

1）藥物配制。賽拉菌素按體重計算分別給藥6和12 mg/kg·bw。伊維菌素溶液配置方法：使用10 L容器2個，各放入5 L水，分別加入5和2.5 mL的1%伊維菌素注射液，配置成濃度為0.01和0.005 mg/mL的溶液。

2）動物分組。2個品系實驗小鼠各30只，分為6組，每組5只。其中5組暴露于污染環(huán)境，感染螨蟲，另1組單獨(dú)飼養(yǎng)，無螨蟲感染。

3）給藥。將3個品系的實驗組小鼠分別按表1分組，并給予相應(yīng)治療。

賽拉菌素滴劑給藥方法：打開籠蓋，將小鼠放入新籠盒，撥開小鼠頸背部毛發(fā)，將賽拉菌素按劑量滴涂于皮膚上，對舊籠盒及周邊環(huán)境使用殺蟲噴霧噴灑，殺滅環(huán)境中寄生蟲。30 d后重復(fù)以上給藥方法。

伊維菌素藥浴方法：打開籠蓋，將小鼠放入配置好伊維菌素的藥浴盒中，藥浴1～3 min（水溫40 ℃注意保溫）[5]，藥浴后的小鼠用吸水紙加快體表毛發(fā)的干燥并減少體表殘余藥物的劑量，之后放到新籠盒中，對舊籠盒及周邊環(huán)境使用殺蟲噴霧噴灑，殺滅環(huán)境中寄生蟲。30 d后重復(fù)以上給藥方法。

給藥后每7 d更換一次墊料，每次更換墊料時均使用殺蟲噴霧進(jìn)行周圍環(huán)境殺蟲，同時每天用30%過氧化氫溶液對飼養(yǎng)間進(jìn)行全面消殺。

4）數(shù)據(jù)記錄。分別于試驗開始的第1、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60天對各組小鼠的體重進(jìn)行稱量記錄。分別于給藥前、第1次給藥48 h后、第2次給藥48 h后，第2次給藥30 d后對小鼠體表螨蟲數(shù)量進(jìn)行記錄。

2 實驗結(jié)果

2.1 動物體重

由圖1可知第1次伊維菌素給藥后小鼠體重普遍呈下降趨勢，第5天達(dá)到最低，KM鼠體重下降百分比為6.3%～8.1%，balb/c鼠的體重下降百分比為10.9%～13.3 %。后逐漸回升，第15天基本恢復(fù)給藥前水平，第2次給藥后體重變化不明顯。兩次賽拉菌素給藥后實驗鼠體重變化均不明顯，基本保持穩(wěn)定。與空白未感染組小鼠體重相比，給藥后感染組小鼠的體重?zé)o顯著差異，而空白感染組小鼠體重明顯較低。

2.2 螨蟲數(shù)量

圖2所示為實驗小鼠體外寄生螨蟲的顯微鏡觀察圖片，給藥前KM小鼠感染寄生蟲數(shù)量約30個/只，balb/c小鼠感染螨蟲數(shù)量約25個/只。實驗組動物在第一次給藥48 h后，體表寄生蟲數(shù)量均降至0個，30 d后無復(fù)發(fā)。第2次給藥后，繼續(xù)觀察30 d，體表寄生螨蟲數(shù)量仍為0。后續(xù)跟蹤觀察，半年內(nèi)無復(fù)發(fā)。

2.3 死亡率

本次試驗中對照組和賽拉菌素實驗組均無小鼠死亡，伊維菌素試驗組中KM小鼠在使用0.01 mg/mL伊維菌素藥浴后24 h內(nèi)死亡一只，BALB/C小鼠在使用0.005 mg/mL伊維菌素藥浴后24 h內(nèi)死亡一只，使用0.01 mg/mL伊維菌素藥浴后第6天死亡一只。小鼠死亡率約為15%。

3 總結(jié)與討論

由于實驗動物的飼養(yǎng)研究處于起步階段，對于實驗動物寄生蟲的消殺尚無特定標(biāo)準(zhǔn)，對其寄生蟲感染后的處理尚無標(biāo)準(zhǔn)規(guī)程，多數(shù)情況下試驗動物生產(chǎn)繁育過程中防治各類疾病最常用的辦法就是淘汰疑似或有病動物，但寄生蟲感染傳播速度快，根治困難，一旦感染進(jìn)行淘汰將涉及大范圍實驗動物，特別是在部分緊急和特殊情況下安全迅速驅(qū)殺螨蟲至關(guān)重要。

本次試驗分別對比了伊維菌素和賽拉菌素兩種常用驅(qū)蟲藥對實驗鼠的驅(qū)蟲效果，試驗結(jié)果顯示，兩種藥物在低劑量時均可達(dá)到明顯的驅(qū)蟲效果，伊維菌素藥浴試驗操作過程較為復(fù)雜，對水溫控制、操作方法等要求較高，操作不當(dāng)容易造成小鼠嗆水等問題，對小鼠的死亡率可能存在一定影響。相比于傳統(tǒng)驅(qū)蟲藥物伊維菌素，賽拉菌素透皮劑具有使用方便、致死率低的優(yōu)勢，可作為實驗鼠體外寄生蟲感染后的優(yōu)選驅(qū)蟲藥，給藥劑量在6～12 mg/kg·bw時相對安全。

由于目前關(guān)于實驗動物的驅(qū)蟲試驗較少，使用藥物單一。本試驗對兩種驅(qū)蟲方法進(jìn)行了對比實驗，以期尋找安全有效毒副作用小的試驗動物驅(qū)蟲方法，盡可能減少其對實驗動物的影響，為實驗動物體外驅(qū)蟲提供參考。

參考文獻(xiàn)：

[1] 吳朋朋，張彩勤，趙勇，等. 2017～2021年陜西省實驗動物使用單位SPF級大、小鼠質(zhì)量監(jiān)測結(jié)果分析與評估[J]. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2023，33（1）：70-77.

[2] 關(guān)琛，王瓊，郭田順，等.伊維菌素制劑在動物寄生蟲病防治中的研究進(jìn)展[J].中國草食動物科學(xué)，2021，41（5）：61-63+71.

[3] 聶結(jié)華，馬艷芝，張志遠(yuǎn)，等.提高伊維菌素水溶性方法的研究進(jìn)展[J].中國畜牧獸醫(yī)，2023，50（10）：4292-4300.DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2023.10.043

[4] 舒磊，劉星卓，呂芳麗.伊維菌素抗寄生蟲病和寄生蟲感染的作用研究進(jìn)展[J].中國病原生物學(xué)雜志，2022，17（8）：972-977.DOI：10.13350/j.cjpb.220822

[5] 翟青新.小鼠體外寄生蟲的藥浴治療[J].中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2017，27（2）：70-73.

[6] WILSON G I， BLACHUT K， ROBERTS I H.The infectivity of scabies （mange） mites， Psoroptes ovis （Acarina： Psoroptidae）， to sheep in naturall contaminated enclosures[J].Res Vet Sci，1977，22（3）：292-297.DOI：10.1016/S0034-5288（18）33250-8.

[7] 任麗君，郭玉娟，姚軍，等.伊維菌素緩釋注射液的制備工藝及在綿羊體內(nèi)藥代動力學(xué)研究[J].西北藥學(xué)雜志，2016，31（5）：497-500.

[8] KIM SANG-HUN， LEE JUNG-YOUN， JUN HYUNG-KYOU， et al. Efficacy of selamectin in the treatment of cheyletiellosis in pet rabbits [J].Veterinary dermatology，2007，19（1）：26-27.

[9] McCOY C， BROCE A B， DRYDEN M W. Flea blood feeding patterns in cats treated with oral nitenpyram and the topical insecticides imidacloprid， fipronil and selamectin[J]. Veterinary Parasitology，2008， 156（3）：293-301.

[10] SHANKS D J， GAUTIER R， McTIER T L， et al. Efficacy of selamectin against biting lice on dogs and cats[J].The Veterinary Record，2003，152（8）：234-237.

[11] JERNIGAN A D， McTIER T L， CHIEFFO C， et al. Efficacy of selamectin against experimentally induced tick （Rhipicephalus sanguineus and Dermacentor variabilis） infestations on dogs[J].Veterinary Parasitology，2000，91（3）：359-375.

[12] McTIER T L， SHANKS D J， WATSON P， et al. Prevention of experimentally induced heartworm （Dirofilaria immitis） infections in dogs and cats with a single topical application of selamectin [J].Veterinary" Parasitology， 2000， 91（3）：259-268.

[13] WANG TAO， YANG GUANGYOU， YAN HUIJUAN， et al. Comparison of efficacy of selamectin， ivermectin and mebendazole for the control of gastrointestinal nematodes in rhesus macaques， China [J].Veterinary Parasitology， 2008， 153（1）：121-125.

[14] 汪濤，楊光友，王成東，等.新型廣譜抗生素類驅(qū)蟲藥--塞拉菌素的研究進(jìn)展[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2008（11）：15-16.DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2008.11.044

[15] 汪芳，周緒正，李冰，等.塞拉菌素口服與透皮給藥對小鼠和大鼠的急性毒性試驗[J].畜牧與獸醫(yī)，2011，43（4）：62-64.