豬流行性腹瀉滅活疫苗臨床應(yīng)用研究

摘要：PEDV（porcine epidemic diarrhea virus）引起的產(chǎn)房仔豬腹瀉是目前危害養(yǎng)豬業(yè)的主要三大傳染病（ASF、PRRS、PED）之一，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。疫苗免疫仍然是防控PEDV的主要手段。為了進(jìn)一步驗(yàn)證改進(jìn)后止瀉威對(duì)PED的防控效力，本研究在湖南瀏陽(yáng)某發(fā)病豬場(chǎng)評(píng)價(jià)了其在臨床上對(duì)產(chǎn)房仔豬的保護(hù)效果。從產(chǎn)房仔豬腹瀉率及抗體水平分析，止瀉威疫苗免疫具有良好的免疫保護(hù)效力，表明該疫苗為產(chǎn)房仔豬PED的防控提供了更有效的措施。

關(guān)鍵詞：PED；PEDV；疫苗

自2011年底，由豬流行性腹瀉病毒（porcine diarrhea virus，PEDV）GⅡ群引起的豬流行性腹瀉（PED）在我國(guó)河南暴發(fā)以來(lái)，PEDV GⅡ快速蔓延至全國(guó)各大小豬場(chǎng)，目前已成為危害養(yǎng)豬業(yè)的三大傳染病（ASF、PRRS、PED）之一。該病主要危害新生仔豬，臨床表現(xiàn)為嘔吐、水樣腹瀉、脫水、消瘦、死亡，以7日齡內(nèi)仔豬發(fā)病最為嚴(yán)重，發(fā)病率與死亡率可高達(dá)100%[1]。生長(zhǎng)育肥豬感染后偶有發(fā)病，死亡率低[2-3]，但可能長(zhǎng)期排毒，是豬場(chǎng)發(fā)病的病毒來(lái)源之一。對(duì)于PED的防控，疫苗免疫是比較經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的手段。

湖南瀏陽(yáng)某豬場(chǎng)，為6層樓房養(yǎng)豬，存欄基母約6 000頭。自2023年1月份開(kāi)始發(fā)生PED，2、3月份產(chǎn)房死亡率達(dá)30%，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月的反復(fù)感染，情況有所改善，但產(chǎn)房一直存在約10%仔豬出現(xiàn)腹瀉（如圖1），采樣檢測(cè)仍然為PEDV感染致病。經(jīng)協(xié)商，推薦使用廣東溫氏大華農(nóng)生物科技有限公司止瀉威進(jìn)行免疫防控，2023年11月開(kāi)始，止瀉威產(chǎn)品進(jìn)入豬場(chǎng)。

1 材料與方法

1.1 材料

疫苗：大華農(nóng)止瀉威（批號(hào)：20235223，有效期至20240911）60瓶。

1.2 方法

1）免疫方案：2樓、3樓、4樓、5樓、6樓均免疫止瀉威疫苗，重點(diǎn)跟蹤2樓的防控?cái)?shù)據(jù)。生產(chǎn)方式為6天批，每周一個(gè)單元母豬上產(chǎn)床生產(chǎn)。

自2023年11月20日開(kāi)始使用止瀉威疫苗免疫，并與前期競(jìng)品疫苗免疫豬進(jìn)行對(duì)比，免疫方案如表1。

2）腹瀉情況觀察：母豬產(chǎn)仔后，觀察2樓各產(chǎn)房的仔豬流行性腹瀉發(fā)病情況，統(tǒng)計(jì)發(fā)病仔豬窩數(shù)。

3）血清/初乳采集：在4單元產(chǎn)房隨機(jī)采10頭產(chǎn)前3～6天母豬血清，在開(kāi)產(chǎn)后，隨機(jī)采集10頭母豬初乳，分別檢測(cè)PEDV IgG與IgA抗體水平。IgG、IgA抗體檢測(cè)委托長(zhǎng)沙愛(ài)科博生物科技有限公司執(zhí)行。

2 結(jié)果

2.1 臨床觀察

競(jìng)品疫苗免疫母豬所產(chǎn)仔豬陸續(xù)發(fā)生腹瀉（如圖2A），免疫止瀉威的母豬產(chǎn)仔后，產(chǎn)房腹瀉情況得到有效改善，基本未發(fā)現(xiàn)有豬流行性腹瀉仔豬（如圖2B）。

2.2 仔豬腹瀉數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

產(chǎn)仔后持續(xù)跟蹤哺乳仔豬腹瀉情況， 至12月25日，即仔豬15～20日齡，5、4單元（止瀉威免疫）仔豬均無(wú)腹瀉發(fā)生；而1、2、3單元（競(jìng)品疫苗免疫）仔豬不同程度發(fā)生腹瀉（如表2），發(fā)病窩數(shù)分別為13、17、32，窩腹瀉率分別達(dá)到24.1%、31.5%、58.2%。

2.3 抗體檢測(cè)

1）PEDV IgG抗體（如圖3）：血樣抗體均為陽(yáng)性 （+），平均SP值為3.228±0.037，變異系數(shù)為1.149%，抗體水平高且整齊。乳汁抗體均為陽(yáng)性 （+），平均SP值為3.237±0.053，變異系數(shù)為1.633%，抗體水平高且整齊。

2）PEDV IgA抗體（如表3）： 兩次免疫止瀉威后的血清和乳汁中都有高水平的IgA抗體，乳汁中抗體稀釋到1/10000檢測(cè)依然為陽(yáng)性。

3 討論與結(jié)論

PED作為危害養(yǎng)豬業(yè)的三大傳染病（ASF、PRRS、PED）之一，其防控仍然是讓人頭疼的大問(wèn)題。目前行業(yè)內(nèi)相對(duì)普遍的認(rèn)知是：疫苗免疫效果不理想（仍然發(fā)病嚴(yán)重）；緊急時(shí)采用返飼方法快速處理，并處死1～2周內(nèi)的新生仔豬斷尾求生，從而可以快速控制疫情。

筆者認(rèn)為，不管在目前非洲豬瘟及其他疫病病原復(fù)雜的情況下，返飼用的材料比較難獲得，且風(fēng)險(xiǎn)增加，還是母豬在反復(fù)返飼后生產(chǎn)性能降低，每頭母豬產(chǎn)健仔數(shù)降低1～2頭/胎（數(shù)據(jù)從臨床了解獲得），說(shuō)明反復(fù)返飼母豬的方式是不可取的。至于疫苗免疫效果不理想，主要還是疫苗的質(zhì)量需要進(jìn)一步提升。

通過(guò)工藝改進(jìn)后，止瀉威的效力有效提升，在實(shí)驗(yàn)研究階段證明，無(wú)論從二次免疫后2周血清中和抗體、初乳中SIgA抗體及初乳中和抗體三項(xiàng)指標(biāo)評(píng)價(jià)，還是從哺乳5～7天初生仔豬的攻毒保護(hù)（仔豬腹瀉率、存活率及存活弱仔率）評(píng)價(jià)，豬病毒性腹瀉滅活疫苗免疫效力顯著優(yōu)于競(jìng)品疫苗，初生哺乳仔豬能獲得更優(yōu)于競(jìng)品疫苗的被動(dòng)保護(hù)[4]。

本研究從臨床試驗(yàn)驗(yàn)證了改進(jìn)后止瀉威的免疫效力大幅度提升。從臨床腹瀉數(shù)據(jù)分析，各免疫單元的產(chǎn)房仔豬的腹瀉率顯著降低，基本無(wú)腹瀉發(fā)生；而對(duì)照競(jìng)品疫苗免疫的單元，產(chǎn)房仔豬仍然不同程度發(fā)生腹瀉，窩腹瀉率分別為24.1%、31.5%、58.2%，表明在發(fā)病豬場(chǎng)，止瀉威免疫后能快速穩(wěn)定豬流行性腹瀉疫情，顯著降低死亡率。

從抗體檢測(cè)結(jié)果分析，免疫止瀉威疫苗后，母豬產(chǎn)生了高水平的IgG抗體與IgA抗體，離散度小，血清稀釋500倍及初乳稀釋10 000倍后，IgA抗體仍然為陽(yáng)性，達(dá)到了相當(dāng)高的水平，能有效保護(hù)仔豬不被PEDV感染。

總之，改進(jìn)后的止瀉威應(yīng)用于臨床能誘導(dǎo)高水平抗體，且在發(fā)病豬場(chǎng)應(yīng)用時(shí)，能快速穩(wěn)定豬流行性腹瀉疫情。

參考文獻(xiàn)：

[1] XIAOFENG R， PENGCHONG L. Development of reverse transcription loop-mediated isothermal amplification for rapid detection of porcine epidemic diarrhea virus[J].Virus Genes，2011， 42（2）：229-235.

[2] WANG D， FANG L， XIAO S. Porcine epidemic diarrhea in China[J].Virus Research， 2016：7-13.DOI：10.1016/j.virusres.2016.05.026.

[3] QIANG L， HUAIYU W. Porcine enteric coronaviruses： an updated overview of the pathogenesis， prevalence， and diagnosis.[J].Veterinary research communications，2021，45（2-3）：1-12.

[4] 何玲，孫華，鐘采靈，等.豬病毒性腹瀉滅活疫苗對(duì)仔豬保護(hù)力研究[J].中國(guó)動(dòng)物保健，2023，25（12）：108-109.