
摘" 要: 人工甜味劑,又稱代糖,是一類經過合成的新型環境污染物,廣泛存在于水體、土壤等環境中且難以降解,對人體健康以及生態環境構成潛在威脅。文章歸納總結了人工甜味劑的特點及其安全性,闡述了人工甜味劑的清除方法和分子機制,分析了各種方法的優缺點以及人工甜味劑清除過程中的影響因素,為環境中人工甜味劑的清除提供參考。物理清除主要通過光降解、吸附清除等途徑,在實際操作中會受到環境條件、共存雜質等因素的影響;化學清除涉及多種高級氧化技術,硫酸根(SO-4·)和羥基(·OH)為主要的活性自由基;生物清除主要是降解酶以及基因在發揮作用,但相關研究尚不充分。前兩者物理清除和化學清除產生的降解產物通常比母體化合物更具有毒性,相較于這兩者,生物清除法具有成本低、效率高和對環境友好等特點。未來的研究應該在現有工藝條件優化以及挖掘降解菌株方面深入探索,著力于將研究成果應用于實際的廢水處理工程。
關鍵詞: 人工甜味劑;代糖;生物清除;分子機制;廢水處理
中圖分類號: X52
文獻標志碼: A
文章編號: 1673-3851 (2024)04-0558-08
DOI:10.3969/j.issn.1673-3851(n).2024.04.015
收稿日期: 2023-12-07" 網絡出版日期:2024-03-13網絡出版日期
基金項目: 寧波市公益性科技計劃項目(2023S053)
作者簡介: 宋俊云(1998—" ),女,山西晉城人,碩士研究生,主要從事微生物學方面的研究。
通信作者: 于" 威,E-mail:yuwei@zstu.edu.cn
引文格式:宋俊云,齊莉莉,柯智健,等. 環境中人工甜味劑的清除方法及分子機制[J]. 浙江理工大學學報(自然科學),2024,51(4):558-565.
Reference Format: SONG Junyun, QI Lili, KE Zhijian, et al. Removal methods and molecular mechanisms of artificial sweeteners in the environment[J]. Journal of Zhejiang Sci-Tech University,2024,51(4):558-565.
Removal methods and molecular mechanisms of artificial sweeteners in the environment
SONG Junyun1,2, QI Lili2, KE Zhijian2, WANG Jinbo2, YU Wei1
(1.College of Life Sciences and Medicine, Zhejiang Sci-Tech University, Hangzhou 310018, China;
2.School of Biological and Chemical Engineering, NingboTech University, Ningbo 315100, China)
Abstract:" Artificial sweeteners, also known as sugar substitutes, constitute a newly synthesized class of environmental pollutants. They are extensively present in environments such as water and soil, proving challenging to degrade and posing potential threats to human health and ecological balance. This article provides a comprehensive overview of the characteristics and safety of artificial sweeteners, elucidates the methods and molecular mechanisms for their removal, analyzes the advantages and disadvantages of various approaches, and considers the influencing factors during the removal process. The aim is to offer insights for the removal of artificial sweeteners from the environment. Physical removal primarily relies on pathways like photodegradation and adsorption. In practical applications, this method is subject to the influence of environmental conditions and coexisting impurities. Chemical removal involves diverse advanced oxidation technologies, with sulfate radicals (SO-4·) and hydroxyl radicals (·OH) serving as the principal reactive free radicals. Biological removal predominantly relies on degrading enzymes and genes, though related research is not yet exhaustive. The degradation products generated by the first two methods are often more toxic than the parent compounds. In contrast, biological removal methods boast characteristics such as low cost, high efficiency, and environmental friendliness. Future research endeavors should concentrate on optimizing existing process conditions and exploring degradation strains, with a specific focus on applying research outcomes to practical wastewater treatment projects.
Key words:" artificial sweeteners; sugar substitute; biological removal; molecular mechanism; wastewater treatment
0" 引" 言
人工甜味劑,又稱代糖,是一類經過合成的有機物,作為添加劑在食品行業中廣泛應用[1]。市場上的飲料、甜點、口香糖和面包等,特別是為糖尿病患者生產的產品,通常含有人工甜味劑,除此之外,其還存在于一些護理產品和藥品中[2]。中國的人工甜味劑年產量約12.14萬t,占全球產量的75%;常用的人工甜味劑包括糖精、甜蜜素、阿斯巴甜、安賽蜜、三氯蔗糖等,其中糖精和甜蜜素的安全性受到質疑[3];阿斯巴甜目前應用最為廣泛,但世界衛生組織于2023年7月亦將其歸為可能對人類致癌之列,國際癌癥研究機構根據致癌風險,將阿斯巴甜歸類為2B組[4];安賽蜜和三氯蔗糖已經通過美國食品和藥物管理局(USFDA)以及其他監管機構的安全性評估,然而,人們對其在環境中的潛在毒性表示擔憂[5-6]。
人工甜味劑的化學結構決定了其性質比較穩定[7]。人體攝入的大多數人工甜味劑未經代謝轉化便直接排出[8],這些物質可直接進入環境,因此在污水處理廠和自來水廠等水體中通常能檢測到糖精、甜蜜素、安賽蜜和三氯蔗糖等[9]。上述甜味劑在環境中難以降解[10],通常會通過受污染的地表水或通過下水道泄漏等途徑進入陸地環境[11],可能會對人體健康以及生態環境構成威脅[12-13]。因此,研究水體和土壤中人工甜味劑的降解方法具有重要意義[2]。目前,已有通過物理、化學和生物法等降解環境中的人工甜味劑。本文綜述了近年來人工甜味劑物理、化學和生物清除的研究進展,并總結了影響其降解過程的因素,為人工甜味劑的合理應用提供理論依據。
1" 物理清除法
人工甜味劑能夠在水環境中長期存在,在水中的溶解度、吸附性質、光解和熱降解等性質影響其在環境中的分布和去除方式。目前,光降解法、吸附法是最常用的物理方法,但這些方法降解效率相對較低,并且通常會產生具有一定的毒性的轉化產物[14]。
1.1" 光降解法
光降解通常是指在光的作用下,有機物逐步氧化成低分子化合物,最終生成CO2、H2O和其他的離子(如NO-3、PO3-4、Cl-等)的過程[15]。不同的人工甜味劑對光的敏感度不同,安賽蜜和糖精在波長254 nm處的吸收峰較高,阿斯巴甜在波長257 nm處吸收較強,在紫外輻射或陽光照射下,它們可能會發生直接光化學反應。甜蜜素和三氯蔗糖在直接光照下的降解效率非常低,在富含鐵的水體中,鐵離子的存在可以增強甜蜜素和三氯蔗糖的光降解,可能是由于鐵離子的氧化還原反應介導了光化學反應,對甜味劑的降解也起到一定作用[16]。隨著光照強度的增加,阿斯巴甜的穩定性顯著降低,在水溶液中的光降解符合一級動力學模型,其降解速率常數約為3.47×10-3 min-1[17]。在不同pH值條件下,阿斯巴甜的降解速率不同,pH值為7.0時降解速率最快,并且在pH值7.0下,添加4.8 mg/L核黃素、亞甲藍或抗壞血酸光敏劑可以大幅度提高阿斯巴甜的光分解能力[18]。阿斯巴甜在pH值3.5~4.5下相對穩定,在更低的pH值環境條件下,光降解速率較高。阿斯巴甜與飲料中的苯甲酸鹽和山梨酸鹽等防腐劑發生相互作用后,導致其光降解速度比直接光解提高10倍。阿斯巴甜的6個光降解產物中,第一個產物被鑒定為α-天冬氨酸苯丙氨酸,是由于阿斯巴甜去甲基化而形成的,肽鍵斷裂導致第二個降解產物苯丙氨酸甲酯的形成,環化后消除甲醇生成第三個降解產物二酮二肽,還有3個是迄今為止尚未報道的酚衍生物。毒性的體外分析表明,鄰羥基、間羥基阿斯巴甜兩種酚類衍生物以及二酮內脂衍生物可能比母體化合物更具有毒性,并導致人體代謝功能紊亂[19]。在光照下,安賽蜜轉化產物的毒性是母體的500倍,并且在水溶液中更為持久,三氯蔗糖的主要降解中間體也表現出比三氯蔗糖更高的毒性[10]。因此,有必要對甜味劑與其他食品添加劑之間的相互作用進行深入分析,并結合儲藏過程的避光性,以降低甜味劑及其相關降解產物對環境的影響。
1.2" 吸附清除法
吸附法是一種利用多孔性固體吸附污水中特定或多種污染物,以回收或去除這些污染物,從而實現污水凈化的方法。活性炭對糖精的去除率要高于甜蜜素、阿斯巴甜、安賽蜜和三氯蔗糖[20]。利用500 kHz的超聲處理,將糖精暴露于活性炭中,經過16 h的吸附,去除率可以達到75%,其原因可能是因為超聲波將糖精分解成了活性炭可以吸附的化合物[21]。鋅基羧酸鹽MOF和Zn-MOF-74的多孔碳等新型吸附劑對糖精和安賽蜜表現出良好的吸附性能。這些吸附劑具有獨特的“海綿狀”結構、有序的孔徑分布以及特定的表面化學性質,有利于糖精、安賽蜜分子的擴散[22]。以羧甲基化黃蓍膠和納米膨潤土為原料合成的水凝膠納米復合材料,對阿斯巴甜的吸附去除效果受到納米膨潤土用量、阿斯巴甜初始濃度以及環境pH值、接觸時間和溫度等影響,該方法主要依賴于氫鍵結合、π-π作用和范德華力的相互作用,吸附過程還受到水中共存的離子和雜質的影響[23]。
2" 化學清除法
高級氧化技術為最常用的化學方法,該技術主要利用電、光輻照,與催化劑和氧化劑等,在反應中產生活性極強的自由基(如·OH、SO-4·),通過自由基與有機化合物之間的加合、取代、電子轉移和斷鍵等反應來降解甜味劑。高級氧化技術主要包括光催化氧化法、化學氧化法(包括芬頓試劑氧化和臭氧氧化)、超聲波氧化法和電化學催化氧化法等。然而,化學法降解人工甜味劑的轉化產物毒性可能會比母體化合物更高[24]。
2.1" 光催化氧化法
光催化氧化法是一種利用光能激發催化劑促使化學反應發生的技術。在紫外光活化過硫酸鹽(UV/PS)降解糖精時,在酸性和中性條件下,硫酸根(SO-4·)是主要的活性自由基,而在堿性條件下,羥基(·OH)是主要的活性自由基[25]。SO-4·氧化促進了—C—NH2鍵的斷裂,導致糖精中—NH—鍵的損失,而·OH更傾向于通過氫原子轉移破壞糖精分子中的苯環[26]。降解過程中,低濃度的NO-3和Cl-可以促進糖精轉化降解,而HCO-3、Br-、腐殖酸以及高濃度的NO-3則降低了糖精的去除效率。糖精的降解主要通過苯環羥基化、C—N鍵斷裂、脫羧和脫氮等途徑進行[25]。UV/PS方法也可有效去除安賽蜜,安賽蜜的主要降解途徑包括氧化、羥基取代、水解和水合過程,降解過程中發揮主要作用的是·OH(71.31%),SO-4·(14.57%)和紫外光解(8.83%)。高濃度的過硫酸鹽、堿性條件、NO-3、Cl-的存在促進了安賽蜜的降解,HCO-3、腐殖酸和黃腐酸的存在不利于安賽蜜的轉化降解[27]。三氯蔗糖在UV/PS條件下的降解速率常數隨著紫外光強度、過硫酸鹽濃度的增加而增大,SO2-4和Cl-的存在有利于三氯蔗糖降解,HCO-3和NO-3則對其降解有一定抑制作用。三氯蔗糖降解過程中主要涉及羥基化、氧化和醚裂解等反應,形成了16種轉化產物,通過毒性分析實驗和軟件預測,UV/PS降解三氯蔗糖過程中產生的中間產物的毒性均高于三氯蔗糖,對生態環境存在潛在威脅[28]。綜上所述,UV/PS反應中產生的活性自由基(·OH和SO-4·)是人工甜味劑降解的關鍵[29]。
UV/NH2Cl降解安賽蜜時,Cl-發揮重要作用,但是氯化物的毒性比非氯化類似物更高[30]。UV-LED/TiO2、UV-LED/ZnO和UV-LED/H2O2對安賽蜜的降解以羥基自由基的作用為主。UV-LED/PS(過氧單硫酸鹽,HSO-5)和UV-LED/PDS(過氧二硫酸鹽,S2O2-8)體系對安賽蜜的降解效果都比單獨UV-LED好,在低pH值下安賽蜜降解速率較高,主要通過形成SO-4·發揮作用;該過程會生成3種副產物,分別為甲卡西酮、1,2,3-苯三羧酸三甲酯、1-二吡咯[叔丁基(二甲基)硅氧]嗎啉丙烷-2-醇和對苯二甲酸二(2-甲氧基乙基)酯[31],這些產物可能帶來嚴重的健康風險和副作用。
2.2" 臭氧氧化法
臭氧氧化法主要是利用臭氧(O3)與有機物質發生氧化反應,可有效降解糖精和三氯蔗糖,當臭氧通氣量為7.1 mg/min、處理60 min時,可以完全降解質量濃度為20 mg/L的糖精。三氯蔗糖的降解過程遵循偽一級動力學模型,當臭氧劑量為13.7 mg/L時,其速率常數為0.0641/min,加入對·OH具有猝滅作用的叔丁醇抑制了糖精和三氯蔗糖的降解[32-33],表明·OH可能在糖精和三氯蔗糖的臭氧氧化過程中起著主導作用。在臭氧降解三氯蔗糖的過程中可能會生成有害副產物,對水質和人體健康產生潛在的不利影響[33]。臭氧活化過氧單硫酸鹽法(O3/PMS)降解安賽蜜的效率是臭氧單獨氧化降解安賽蜜的3倍,反應涉及的O-3、·OH和SO-4·等活性自由基在其降解過程中發揮主要作用。當使用0.4 mmol/L過氧單硫酸鹽和臭氧通氣量為60 μg/min時,安賽蜜的降解效果最好,安賽蜜降解的活性位點為CC鍵、醚鍵和C—N鍵[34]。
2.3" 超聲波氧化法
超聲波氧化法是一種利用高頻聲波振動引發化學反應的技術,通常被用于水處理和廢水處理。在最適條件下,聲化學降解法可以在120 min內完全降解安賽蜜,遵循一級降解動力學模型,當使用0.2~1.0 mmol/L的過硫酸鈉偶聯聲化學降解時,安賽蜜降解速率提高了6倍。但水基質中天然存在的腐殖酸會降低安賽蜜降解速率,并且轉化產物比安賽蜜毒性更強,因此,有必要從去除效率和生態毒理學影響的角度,進一步對聲化學降解安賽蜜的作用機理進行系統性研究[35]。
2.4" 電化學氧化法
電化學氧化法是一種使用電流促使氧化反應發生的技術,通常用于廢水處理或有機物降解。利用鉑或硼摻雜金剛石陽極均能迅速實現阿斯巴甜的完全氧化,阿斯巴甜的氧化降解過程遵循偽一級反應動力學,速率常數為5.23× 109 mol/(L·s),生成了短鏈脂肪羧酸(草酸、乙酰草酸和馬來酸)以及無機離子(NO3-和NH4+)。阿斯巴甜降解過程中會產生有毒中間產物,但在處理過程中產物結構被破壞,最終沒有毒性[36]。通過合成ECR-TiO2 NTA陽極,對阿斯巴甜進行了電化學降解測定,結果表明在2 mA/cm2電流下,阿斯巴甜的降解速率常數為0.039/min;降解過程主要涉及羥基化、去甲基化、脫氫、脫水縮合和側鏈斷裂,共鑒定出24個轉化產物,QSAR模型表明部分轉化產物具有急性毒性和突變作用,其潛在的風險應予重視[37]。人工甜味劑降解過程中,通常會生成一系列轉化產物,這些產物可能具有不同的毒性和生態影響[24]。因此,對于這些產物的研究同樣重要,了解降解產物的性質可以更好地評估人工甜味劑在環境中的影響。
3" 生物清除法
土壤中微生物對人工甜味劑的降解發揮著顯著作用[38]。與物理法和化學方法相比,生物清除效率更高,對于污水中人工甜味劑的去除具有巨大潛力[12]。生物清除是由生物活動引起的降解,尤其是酶的作用引起化學結構的變化。有害物質被微生物或某些生物作為營養源逐步降解,最終被分解成較簡單的化合物(二氧化碳、甲烷和水等)。相較于物理和化學清除法,生物清除法具有成本低、效率高和對環境友好等特點(見表1)。目前關于人工甜味劑生物清除的研究還較少,主要集中在對糖精和安賽蜜的研究。
河岸滲濾作用去除糖精是利用土壤的吸附能力和微生物的富集作用[39],該工藝去除飲用水處理廠中的人工甜味劑時,自來水中的糖精幾乎被完全降解[40]。由于糖精具有親水性,吸附對于其降解率影響較小,因此生物清除在堤岸過濾過程中可能起到更為重要的作用[41]。純菌株、混合菌株以及具有豐富生物多樣性的環境介質對糖精的生物清除潛力[42-44]。從生活污水中分離的糖精降解菌Sphingomonas xenophaga SKN,能夠利用糖精中的鄰苯二酚作為唯一碳源[45]。菌株Halomonas sp. A20也被發現可以高效降解糖精鈉,其屬于鹽單胞菌屬(Halomonas),在最適溫度30.3℃下,糖精鈉的去除效率可達到60%以上,這為處理高鹽、高濃度糖精鈉廢水提供了重要參考[46]。糖精的降解涉及異養或自養的硝化微生物及各種非特異性氧化酶的參與[13],大腸菌群和腐敗菌可以降解糖精[47];多種土壤微生物也可以有效降解糖精[48],基因組分析發現紅環菌屬的β-變形菌基因組中存在糖精降解相關基因[49]。
對污水處理廠活性污泥中富集的安賽蜜降解微生物群落分析發現,變形菌門和浮霉菌門是主要的降解菌,分離到的2個安賽蜜降解菌株屬于螯合球菌屬(Chelatococcus)[50],也有研究發現,粘著劍菌也能夠降解安賽蜜[51]。至今為止,已經分離到的安賽蜜降解菌中,有來自螯合球菌屬、申氏桿菌屬的菌株以及粘著劍菌、砷氧化菌等[50-53]。安賽蜜降解菌株YT9降解安賽蜜過程中檢測到3個產物,分別為TP96、TP180B和TP182B,其中TP96為氨基磺酸,TP182B的化學式為C4H8NO5S,TP180B還未能確其結構,TP180B是在安賽蜜的C=C鍵處加水生成的水合產物;在安賽蜜降解過程中,C=C鍵具有高敏感性,優先受到攻擊,并通過高級氧化過程在安賽蜜中斷裂其他鍵,同時,羥基化也是主要的降解途徑[50]。安賽蜜的硫酸酯部分的裂解也可能是轉化的初始步驟[51],降解過程中涉及的酶可能有硫酸酶、磺基水解酶、水合酶或酰胺水解酶,其中金屬-β-內酰胺酶折疊金屬水解酶是催化安賽蜜起始降解的最可能酶[53]。在過硫酸鹽促進污泥厭氧發酵(PS/Fe)降解安賽蜜的反應體系中,過硫酸鹽促進了葉狀桿菌科和緩生根瘤菌科的富集,并上調了參與安賽蜜降解關鍵基因(PNCB和NADE)的表達,安賽蜜的降解過程中,羥化和氧化開環是2個主要代謝途徑[29]。安賽蜜在氧化和反硝化條件下均可降解,而在無溶解氧和硝酸鹽的厭氧條件下,未觀察到降解,主要轉化產物是琥珀酸(SA),有機物質僅有少量形成,并且會快速消除[54]。
4" 結" 語
人工甜味劑在環境中的殘留可能對生態環境產生一定的影響,特別是對水體和水生生物。人工甜味劑的安全性及其對人類健康的影響仍然是一個復雜的問題,去除或減少人工甜味劑的使用有助于減少危害。新型高效吸附劑和高級氧化技術對于人工甜味劑的降解具有很大潛力,但是在降解過程中形成的轉化產物可能比母體化合物具有更強的毒性。今后需關注降解產物的生態毒性以及人工甜味劑與其他共存水污染物的相互作用,并進一步優化現有方法的工藝條件,提高降解效率,并探索不同方法的集成,以實現人工甜味劑更高效率地清除。
對于生物清除技術而言,則要繼續研究微生物群落的多樣性和功能,挖掘降解菌株的應用潛力,進一步研究解析微生物清除人工甜味劑的完整機制,確定人工甜味劑降解過程中的功能酶及基因。著力于將研究成果應用于實際的廢水處理工程,探索一種可在大規模應用中高效去除廢水中人工甜味劑的技術;同時,進行經濟性和生態可持續性評估,以確保該技術在大規模應用時具有成本效益,并對環境產生積極影響。
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(責任編輯:張會巍)