冰凍切片快速病理知多少

病理學檢查在診斷疾病、制定治療方案、判斷預后及總結治療經驗等方面起著舉足輕重的作用。病理切片是病理標本的一種。制作時，將部分有病變的組織或臟器經過各種化學試劑處理和石蠟包埋，使之固定硬化；在切片機上切成薄片后，粘附于玻片上，染以各種顏色；通過顯微鏡以觀察病理變化作出病理診斷，為臨床診斷和治療提供幫助。然而，常規石蠟切片遠遠不能滿足于手術科醫生工作的需要。如果想在手術中馬上了解腫瘤或病變的性質，以便確定手術方案和范圍，就需要應用快速冰凍切片技術作出快速病理診斷。

快速冰凍切片的定義

快速冰凍切片也稱為冰凍切片，是將術中切下的病變組織在冰凍切片機中迅速冷凍后，于30 min內完成制片和做出病理診斷的一項技術，免去了常規的固定、脫水、石蠟包埋等過程。

快速冰凍切片的作用

術中冰凍是一項高效且實用的技術，既能幫助醫生有效切除病變組織，又能在最大程度上減少手術的傷害。

（1）確定病變是否為腫瘤，并判斷腫瘤良、惡性，以確定下一步手術方案。

（2）了解腫瘤有無播散到鄰近淋巴結或臟器，確定手術切緣有無腫瘤浸潤，以了解手術范圍是否足夠大。

（3）幫助識別手術中某些意外和確定可疑的微小組織，比如甲狀旁腺、輸卵管、輸精管等。

（4）顯示組織中的脂肪和脂類物質，常見于脂肪瘤、肉瘤等。

快速冰凍切片的適用及不適用范圍

適用范圍

擇期手術時，需要確定病變性質，比如是腫瘤還是非腫瘤、是良性病變還是惡性病變等，以決定手術方案的標本；了解惡性腫瘤的擴散情況，包括腫瘤是否浸潤相鄰組織、有無區域淋巴結轉移等；確定腫瘤部位的手術切緣有無腫瘤組織殘留；切除組織的確認，如甲狀旁腺、輸卵管、輸精管及異位組織等。

不適用范圍

疑為惡性淋巴瘤；標本的檢查長度≤2 cm；術前易于進行常規活檢者；脂肪組織、骨組織和鈣化組織；需要依據核分裂象計數判定良、惡性的軟組織腫瘤；主要根據腫瘤生物學行為特征而不能依據組織形態判斷良、惡性的腫瘤；已知具有傳染性疾病（結核病、病毒性肝炎、艾滋病等）的標本。

快速冰凍切片的具體操作步驟

快速冰凍切片需要臨床醫生、病理醫生、病理技術員以及標本送檢員共同完成。

術前

術前，臨床醫生與患者簽署《術中快速冰凍知情同意書》，告知其意義和局限性，向病理科提交《術中冰凍申請單》，并填寫患者的病史、重要檢查結果等信息。

術中

術中，臨床醫生取出標本后立即裝入標本袋，連同《病理組織檢驗送檢單》一同迅速送至病理科。

病理檢驗

病理科接收標本后，核對標本信息并登記。取材醫生觀察標本，選取疑似病變組織交給病理技術員進行冰凍切片。冰凍切片包括冰凍包埋和制片兩部分，常規病理一般需要十幾個小時的脫水，再用石蠟制成“蠟塊”，而術中冰凍只需要使用0CT包埋劑做支撐，利用低溫1～3 min就可將標本快速變成一個“冰疙瘩”。制片是將標本置于包埋托上，用冰凍切片機切成6～8 μm厚的切片，貼于預處理載玻片上，迅速放入固定液中，染色4～5 min。之后，切片交給診斷醫生進行顯微鏡觀察，完成術中病理診斷，并出具規范的病理報告送交臨床醫生。

快速冰凍切片與常規石蠟切片的區別

術中快速病理現在一般采用特殊的冰凍設備將標本快速冰凍并切片，從接到標本至出報告一般在30 min。術中快速病理的開展大大提高了臨床手術術式的選擇和準確性，特別對婦科卵巢腫瘤、普外兩腺進一步選擇手術術式有幫助。

常規病理一般采用石蠟切片，是把快速冰凍切剩下的可疑病灶用蠟油浸泡包埋，做成一個蠟塊，然后慢慢通過層層取材，用不同的試劑進行染色。這個過程非常繁瑣和復雜，有時候一種試劑的染色無法區分還要換另一種試劑，進行第二次、第三次，甚至第四次的染色區分。因此，石蠟切片至少要5～10 d才能得出結果。碰到無法明確、疑難的病理，還要召集科室的病理醫生一起討論，重新做免疫組化，之后再討論，才能下最后的診斷意見。

但是，做完術中快速冰凍病理后一定還要進行常規石蠟切片診斷，并且要以后者為準，因為常規的石蠟切片成像質量遠比快速冰凍切片好。

快速冰凍切片的優缺點

快速冰凍切片的優點

快速冰凍切片簡便，不需要對組織固定、脫水、透明、包埋等手續即可進行切片，減少了一些中間環節，切取的組織變化也不大，正常情況下30 min內即可完成診斷工作；提高手術成功率，解決高難手術術中的診斷問題；避免患者二次手術，減少其手術痛苦。

快速冰凍切片的缺點

不容易做連續切片或較薄的切片；切取的組織不能過大，否則不易凍結或者組織凍結不均，影響切片及染色效果；組織塊在凍結過程中容易產生水的結晶，組織結構不如石蠟切片清晰；未經過組織脫水透明等步驟，鏡下圖像不如石蠟切片清楚，容易造成誤診；體積較大的腫瘤發生局灶癌變時，可能因冰凍取材受限不能全取而漏診；某些情況下，冰凍病理檢查僅能提供一個參考性意見或推遲至石蠟切片才能明確病變性質；腫瘤鈣化部分無法冰凍制片。

快速冰凍切片的發展趨勢

隨著醫療技術的不斷進步，快速冰凍切片技術也在不斷發展。

自動化和智能化

隨著自動化和人工智能技術的發展，快速冰凍切片的過程正在變得越來越自動化。從樣本準備到切片制作，再到染色和觀察，許多步驟都可以通過機器自動完成，不僅提高了效率，還減少了人為錯誤的可能性。

多色和多模態成像

為了滿足復雜疾病診斷的需要，多色和多模態成像技術正在被越來越多地應用于快速冰凍切片中。這允許醫生在同一時間觀察多種不同的組織特征，提高了診斷的準確性。

綠色環保

隨著環保意識的提高，快速冰凍切片技術的發展也開始考慮環保和安全問題。例如，使用更環保的冷凍劑、減少廢棄物產生等措施，確保處理過程中的安全性，避免對操作人員和患者造成傷害。