金耳液體菌種制備及袋料高效栽培技術(shù)

摘 要：金耳液體菌種制備及袋料栽培技術(shù)是實現(xiàn)金耳標(biāo)準(zhǔn)化、工廠化、周年化生產(chǎn)的重要技術(shù)，而金耳有效液體菌種的制備是金耳栽培能否成功的關(guān)鍵。通過對金耳栽培的最新研究成果和多年來的生產(chǎn)經(jīng)驗進行總結(jié)，探索出一套操作簡便、重復(fù)率高、出耳率高的高效液體菌種制備及配套的袋料栽培技術(shù)，以期為金耳產(chǎn)業(yè)的健康、高效發(fā)展提供技術(shù)支持。

關(guān)鍵詞：金耳；液體菌種；袋料栽培技術(shù)

中圖分類號：S567.34 文獻標(biāo)志碼：B 文章編號：1674-7909（2024）9-69-3

DOI：10.19345/j.cnki.1674-7909.2024.09.015

0 引言

金耳又名橙黃銀耳、黃金銀耳、腦耳、膠耳等［1］，屬擔(dān)子菌門，是20世紀(jì)80年代中期才開始大批量栽培的一種食藥兼用膠質(zhì)食用菌。金耳子實體氣味清香、食味鮮美；富含粗蛋白、粗纖維、礦質(zhì)元素等營養(yǎng)物質(zhì)［2-4］，營養(yǎng)價值較高；性溫中帶寒，味甘，能化痰止咳、平肝陽、降血糖，能治療心腦血管疾病，是一種理想的保健食品。

金耳子實體是一種由金耳菌絲和毛韌革菌菌絲扭結(jié)形成的異質(zhì)復(fù)合體，因受特定生物因子（伴生毛韌革菌）的制約，其營養(yǎng)需求、生長條件較為復(fù)雜，從而限制金耳的大規(guī)模栽培生產(chǎn)。

目前，對金耳的生理需求、生長環(huán)境條件、營養(yǎng)成分及栽培管理技術(shù)等方面的研究相繼取得進展。但在金耳栽培過程中，制備和毛韌革菌配比合理的有效菌種仍是其栽培成功與否的關(guān)鍵與難點。現(xiàn)有的金耳制種方法有直接投耳法、直接接種金耳與毛韌革菌液體混合培養(yǎng)法。直接投耳法要用到大量菌種，會導(dǎo)致生產(chǎn)成本增加，且菌種培養(yǎng)周期長、工藝復(fù)雜；在直接接種金耳和毛韌革菌液體混合物培養(yǎng)法中，2種菌絲的配比不易人為調(diào)控，且重復(fù)率不高，易因此造成經(jīng)濟損失。金耳液體菌種制備及袋料栽培技術(shù)是實現(xiàn)金耳大規(guī)模標(biāo)準(zhǔn)化、工廠化、周年化的栽培關(guān)鍵技術(shù)［5］。筆者對金耳栽培的最新研究成果和多年來的生產(chǎn)經(jīng)驗進行總結(jié)，探索出一套金耳液體菌種制備及配套的袋料栽培技術(shù)，以期為金耳產(chǎn)業(yè)實現(xiàn)健康、高效發(fā)展提供技術(shù)支持。

1 生物學(xué)特征

1.1 形態(tài)特征

金耳有菌絲體和子實體兩種形態(tài)。金耳菌絲體是由金耳菌絲和粗毛韌革菌菌絲按一定比例扭結(jié)而成的，在母種培養(yǎng)基上，扭結(jié)的菌絲呈白色，中間部位略帶淡黃色，氣生菌絲旺盛；子實體為半球形或腦狀，直徑為4～12 cm，高為3～7 cm［6］；金耳曬干后，體積收縮，呈黃褐色，近角質(zhì)，泡水后可恢復(fù)鮮耳形態(tài)。

1.2 生長條件

1.2.1 溫度

溫度是影響金耳菌絲生長、原基形成及幼菇生長的重要因素之一。金耳屬中溫型食用菌，在8～33 ℃均可生長，且最適宜菌絲生長的溫度為22～25 ℃。當(dāng)溫度低于10 ℃時，菌絲生長緩慢；高于33 ℃時，菌絲停止生長［7］。最適宜金耳原基分化和子實體生長的溫度為18～22 ℃［8］。

1.2.2 濕度

濕度對金耳子實體的分化、膨大及品質(zhì)的影響較大。最適宜的金耳培養(yǎng)料含水量為60%左右，菌絲生長階段的最適宜空氣濕度為70%，子實體生長階段的最適宜空氣濕度為80%～90%。當(dāng)空氣濕度低于80%時，子實體會因缺水而變干，最終停止生長；高于95%時，易引起雜菌污染［9］。

1.2.3 pH值

金耳適宜在弱酸性環(huán)境中生長，最適宜金耳生長的pH值為5.5～6.5，此時金耳菌絲長勢最好［10］。

1.2.4 空氣

金耳為好氧型真菌，從原基形成到子實體長成都要供應(yīng)充足的氧氣。出耳期要注意經(jīng)常通風(fēng)換氣，CO2含量過高會導(dǎo)致金耳子實體生長緩慢，甚至?xí)霈F(xiàn)“吐黃水”的現(xiàn)象［11］。

1.2.5 光照

金耳菌絲的生長對光照要求不高，可避光培養(yǎng)，但在子實體分化和生長階段，要提供散射光，最適宜光照強度為600～700 lx［12］。

2. 菌種制備

2.1 有效母種制備

一般用3%麥粒煎汁-馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養(yǎng)基來制備母種。培養(yǎng)基制作過程如下：將30 g麥粒、200 g馬鈴薯（去皮后切成1 cm3大小）加適量水后煮沸20～30 min，用4層紗布過濾殘渣，并將20 g葡萄糖、20 g瓊脂加入過濾液中，繼續(xù)煮沸，待瓊脂全部溶化后，用蒸餾水定容至1 000 mL，于121 ℃高溫滅菌20 min，冷卻后備用，分裝至三角瓶內(nèi)，每瓶50 mL。用子實體組織分離培養(yǎng)法來制備母種的過程如下。取1 cm3子實體組織塊置于3%麥粒煎汁-PDA培養(yǎng)基上，并于22℃培養(yǎng)至菌絲長滿整個平板。“有效母種”為無雜菌污染，菌絲長勢均勻，菌絲體為稀疏白色或淺黃色，組織塊膨大。

2.2 有效原種制備

原種培養(yǎng)料配方為木屑（30.0%）、棉籽殼（50.0%）、麩皮（17.8%）、蔗糖（1.0%）、生石膏（1.0%）、KH2PO4（0.2%），含水量為60%，pH值為5.5～6.5。以750 mL的透明玻璃瓶為制種容器。裝料至瓶子的1/2處或距離瓶口5～6 cm處，并適當(dāng)壓實，常壓滅菌18～24 h或高壓滅菌2～3 h。用子實體塊加少量混合菌絲的接種法來制備原種，即將母種膨大的子實體塊和菌絲體一同接入原種瓶培養(yǎng)料中央坑穴內(nèi)。采取變溫法進行培養(yǎng)，即先在22 ℃的環(huán)境中培養(yǎng)至菌絲滿瓶或組織塊開始膨大，再轉(zhuǎn)為18 ℃的環(huán)境中繼續(xù)培養(yǎng)至長成子實體。

2.3 液體菌種制備

液體發(fā)酵培養(yǎng)基為改良的PDB培養(yǎng)基，將200 g馬鈴薯（去皮后切成1 cm3大小），加適量蒸餾水后煮沸 20～30 min，用4層紗布過濾，棄殘渣，在過濾液中加入20 g 葡萄糖、3 g磷酸二氫鉀、1.5 g硫酸鎂、2 mg維生素B1，攪拌完全溶解后，用蒸餾水定容至1 000 mL，并分裝至250 mL錐形瓶中，每瓶100 mL，于121 ℃高溫滅菌20 min，冷卻后備用。取有效原種瓶內(nèi)的1 cm3子實體組織塊，并將其在經(jīng)過滅菌處理的研缽中研磨成泥，加入適量的PDB培養(yǎng)基后混合成混懸液后，并裝入有PDB培養(yǎng)基（100 mL）的錐形瓶中，于22 ℃搖床（大于200 r/min）后培養(yǎng)7～10 d。

2.4 栽培種制備

栽培種培養(yǎng)料的配方為棉籽殼（80.0%）、麩皮（17.8%）、蔗糖（1.0%）、生石膏（1.0%）、KH2PO4（0.2%），基質(zhì)pH值為5.5～6.5。用15 cm×30 cm規(guī)格的聚丙烯塑料袋裝料，裝滿后適當(dāng)壓實，袋口用4.0～4.5 cm套環(huán)套好后加蓋或插棒。常壓滅菌18～24 h或高壓滅菌2～3 h，冷卻后再使用。

可采用針管注射法接種，即在超凈工作臺或殺菌后的接種室內(nèi)，用無菌注射器（帶刻度，針頭直徑為1.2 mm）吸取適量發(fā)酵好的金耳液體菌種，用75%酒精棉球?qū)υ耘喾N菌棒兩側(cè)適當(dāng)位置進行消毒，并迅速將注射器針頭扎入消毒部位表層（不宜深入袋料深處），注射1 mL金耳液體菌種。當(dāng)培養(yǎng)環(huán)境較清潔，且注射口較小時，可不做處理，也可在注射口處貼上食用菌專用透氣貼。

3 栽培技術(shù)

3.1 場地選擇

一般在具有溫度和濕度控制裝置、通風(fēng)良好、采光較好的標(biāo)準(zhǔn)廠房、培養(yǎng)間、菇房等進行金耳袋料栽培，也可在地勢較高、遠離污染源、背風(fēng)向陽、水源充足的地方搭建溫室大棚進行栽培［13］。

3.2 栽培時間

金耳栽培時間一般為9月至次年5月，且可安排2個生產(chǎn)周期，即春季（3—5月）和秋季（9—11月），每個生產(chǎn)周期為50～80 d。此外，應(yīng)根據(jù)栽培地氣候及金耳的生理特性來選擇栽培時間。

3.3 栽培管理

3.3.1 發(fā)菌管理

金耳母種、原種、栽培種菌絲的最適生長溫度為22～25 ℃，要避光培養(yǎng)；原基分化和子實體生長的最適溫度為18～22 ℃。由于金耳為2種菌絲的混合體，適宜生長的條件較為復(fù)雜。考慮到金耳屬伴生菌，在原基分化期、幼耳生長發(fā)育期，菌絲過于旺盛會影響原基發(fā)育和子實體膨大，還會出現(xiàn)“黃水”“自溶”等不良現(xiàn)象［14］。因此，在原種、栽培種接種后，可采用變溫培養(yǎng)方式來提高成耳率，即接種后先在22 ℃環(huán)境中培養(yǎng)7～10 d，再將溫度調(diào)整到18 ℃繼續(xù)培養(yǎng)。

3.3.2 出耳管理

菌絲長滿袋、生理成熟后，基質(zhì)表面開始分化出子實體。此時，應(yīng)撕下透氣貼，在接種處劃開適當(dāng)大小的出耳口進行透氣培養(yǎng)，并適當(dāng)提高空氣濕度；待子實體對環(huán)境變化逐漸適應(yīng)后，將空氣濕度調(diào)整為80%～90%、溫度控制在18 ℃左右。此期，可適當(dāng)增加光照強度，但不能讓太陽光直射。

3.4 病蟲害防治

3.4.1 害蟲及防治措施

金耳栽培過程中常見的害蟲有跳蟲、線蟲、螨類、蠅類、蛞蝓、鼠害等，以預(yù)防為主，一般不使用農(nóng)藥。栽培前，對培養(yǎng)室或栽培大棚進行清理消毒，減少害蟲數(shù)量。當(dāng)發(fā)現(xiàn)害蟲時，可用粘蟲板、捕蠅燈等對其進行誘殺。

3.4.2 真菌性病害及防治措施

常見的真菌性病害有鏈孢霉、綠霉、木霉、曲霉、毛霉等。防治其菌性病害的措施：栽培前，對栽培環(huán)境進行消毒；采用菌齡不超過45 d的“有效原種”來制備栽培種，或制備菌種時用75%酒精、0.1%升汞對子實體表面進行消毒；對袋料進行常壓或高壓滅菌；出耳時規(guī)范溫度、濕度管理。

若出耳后發(fā)現(xiàn)雜菌，要及時采摘，將生石灰粉撒在雜菌感染處，并進行掩埋，防止病菌繼續(xù)生長擴散，同時加速棚內(nèi)空氣流通，降低環(huán)境溫濕度，以控制雜菌的發(fā)生和蔓延。

3.5 采收、干制與儲藏

3.5.1 采收

當(dāng)金耳子實體長到成熟初期，充分開瓣、轉(zhuǎn)色后，要及時采收。采收時，用快刀貼近其基部切下。采收后停止噴水1～2 d，既保證金耳品質(zhì)，也有利于菌絲體休養(yǎng)生息，更有利于再次出耳。在通風(fēng)保濕及采收方式得當(dāng)?shù)那疤嵯拢看蛇B續(xù)出耳2～3次。

3.5.2 干制

可通過自然風(fēng)干、曬干或烘干來完成干制。烘干時，先在30～40 ℃低溫下烘至半干，再逐漸升高溫度烘至全干。

3.5.3 儲藏

金耳的干制品要用無毒塑料袋進行密封儲存，袋內(nèi)放置食品級干燥劑，于陰涼、干燥、潔凈、無蟲害、無污染處單獨存放。

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作者簡介：金麗（1990—），女，碩士，研究實習(xí)員，研究方向：食用菌新品種選育及栽培技術(shù)等。

通信作者：李賓（1984—），男，本科，助理研究員，研究方向：食用菌新品種選育及栽培技術(shù)等。