G3BP1基因在雞肌內前脂肪細胞增殖與分化中的作用及其分子標記鑒定

摘 要： 旨在利用721只固始雞F2代雞群，鑒定影響肌內脂肪沉積的候選基因G3BP1的SNPs位點，用于肉質性狀的分子標記開發，并利用固始雞肌內前脂肪細胞深入探究其功能。本研究首先鑒定了G3BP1基因上的SNPs位點，發現3個突變位點處于強連鎖不平衡狀態，尤其是13588667Ggt;A位點的不同基因型與固始雞F 2資源群的皮脂、皮脂率和肌內脂肪等肉質性狀顯著相關（Plt;0.05）。因此，G3BP1基因13588667Ggt;A位點可以作為影響肌內脂肪沉積的一個重要的分子標記。此外，本研究利用qRT-PCR、CCK-8、流式細胞術、甘油三酯含量測定和油紅O染色等方法，評價了G3BP1基因對固始雞肌內前脂肪細胞增殖與分化的影響。結果表明，過表達G3BP1后，肌內前脂肪細胞中增殖標志基因CDK1、CCNB2、PCNA和CCND1表達水平均極顯著上升（Plt;0.001），并顯著促進了細胞周期進程。過表達G3BP1后也顯著促進了肌內前脂肪細胞分化標志基因LPL的表達（Plt;0.05），極顯著促進了CEBPA的表達（Plt;0.001），肌內前脂肪細胞內脂滴生成和甘油三酯含量也極顯著增加（Plt;0.01）。本研究明確了G3BP1在促進肌內前脂肪細胞增殖與脂肪細胞生成中的作用，并鑒定了影響肌內脂肪沉積的分子標記，為我國優質肉雞培育提供重要的理論依據和應用價值。

關鍵詞： 固始雞；肌內脂肪；G3BP1；分子標記

中圖分類號：S831.2"""" 文獻標志碼：A"""" 文章編號： 0366-6964（2025）01-0159-09

收稿日期：2024-08-09

基金項目：雞生長性狀精準評價與高產優質核心種質創制 （SN01-2022-05）；重要農業動植物優異性狀共性調控元件挖掘與基因資源設計 （2023YFF1001100）；中國博士后科學基金面上項目 （GZC20233467）

作者簡介：李遠方（1991-），女，河南平頂山人，博士，主要從事畜禽資源分子評價的研究，E-mail： yuanfangli1991@163.com

*通信作者：劉翹銘，主要從事生物信息學研究，E-mail： cslqm@hit.edu.com；李國喜，主要從事家禽遺傳育種的研究，E-mail： liguoxi0914@126.com；李 智，主要從事畜禽資源分子評價的研究，E-mail： 18530085133@163.com

LI" Yuanfang 肌內脂肪與肉的風味、多汁性、嫩度等肉質性狀密切相關^［1-2］。IMF主要存在于肌纖維之間的脂肪細胞中，IMF的形成受到營養、激素和遺傳等多種因素的調控，其中遺傳因素起關鍵作用^［3-5］。隨著消費者對高品質肉類需求的增加，研究雞肉IMF的形成機制和遺傳調控變得尤為重要。研究發現，PPARγ、CEBPA、FABP4和LPL等基因在IMF形成過程中發揮著重要的作用^［6-8］，這些基因通過促進脂肪細胞的生成、分化和脂質積累，增加IMF含量。然而，這些已知基因并不能完全解釋我國地方品種雞IMF相關的遺傳變異，因此，亟待解析影響我國地方品種雞IMF形成的機制，尋找有效的IMF性狀相關的分子標記。

固始雞是我國肉蛋兼用型品種雞，原產于河南省固始縣，其具有肉質細嫩、風味獨特和營養豐富等特點，素有“中國土雞之王”的美譽^［9-10］，但是目前對其IMF形成機制的了解相對缺乏。本課題組前期" 利用固始雞F 2資源群體，通過GWAS分析發現Ras-GTPase激活蛋白 （SH3域） 結合蛋白1 （Ras-GTPase-activating protein SH3 domain binding protein" G3BP1） 是影響IMF性狀的候選基因，且在固始雞胸肌組織中表達量非常豐富^［11-12］。G3BP1是一種RNA結合蛋白^［13］，在真核生物進化過程中高度保守，同時具有多種生物學功能^［14-16］。已有大量研究表明，G3BP1參與癌癥反應^［17-19］以及機體的應激反應^［20-21］。此外，G3BP1還被發現與前脂肪細胞增殖相關。LV等^［22］的研究顯示，miR-129-5p通過靶向G3BP1并激活p38信號通路來抑制3T3-L1前脂肪細胞增殖。然而，盡管已有證據表明了G3BP1在前脂肪細胞增殖中的作用，但其在畜禽領域中的關聯性尚未得到驗證。因此，本研究較為系統地研究了G3BP1基因對固始雞肌內前脂肪細胞增殖和分化的影響，并在固始雞F 2資源群中篩選了該基因的遺傳變異位點，旨在開發與雞IMF性狀相關的分子標記。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

試驗用DNA血樣來自于河南農業大學家禽中心實驗室構建的固始雞F 2資源群，構建方法及飼養管理條件等細節參考文獻［23］。試驗動物為固始雞，取材于河南農業大學家禽種質資源場。

1.2 RNA提取、cDNA合成和實時熒光定量PCR（qRT-PCR）

Trizol法提取雞原代前脂肪細胞總RNA，使用PrimeScriptTM RT reagent Kit with gDNA Eraser（TaKaRa，日本）試劑盒進行cDNA的合成。實時熒光定量以cDNA為模板，使用SYBR Green（TaKaRa，日本）染料進行，反應體系為20 μL：2×SYBR Green Mix 10 μL，cDNA模板 1 μg，上、下游引物各 0.2 μmol·L^- RNase Free dH 2O 補足20 μL。反應程序為：95 ℃ 5 min；95 ℃ 5 s，60 ℃ 15 s，循環 40 次。雞的GAPDH基因作為內參基因，每個樣品均進行3次技術重復，用 2^{-△△CT［24］}方法計算相對表達量，引物序列如表1所示。

1.3 原代肌內前脂肪細胞的分離和誘導分化

利用2～3周齡的固始雞胸肌組織分離原代肌內前脂肪細胞。無菌條件下，取2～3周齡的固始雞腹部脂肪組織，用1%鏈霉素/青霉素PBS溶液沖洗胸肌組織3次，再用眼科剪剪碎組織后用細胞消化液（組織塊∶消化液=1∶5）在37 ℃水浴鍋消化60 min，消化中間每5 min振蕩1次。待完全消化后，加入完全培養基終止消化，分別經100、200和500目的篩網過濾后，500 g離心10 min，然后用紅細胞裂解液重懸并在溫室下孵育10 min，然后細胞沉淀用完全培養基反復重懸、離心2次后，將細胞懸液接種到細胞培養瓶中，置于 37℃、5% CO 2培養箱中進行細胞培養，2 h后換液得到肌內前脂肪細胞，利用油紅O染色法鑒定細胞的純度。

分離的肌內前脂肪細胞被接種到6孔板中，待細胞融合達到90%后，用誘導分化培養基代替完全培養基培養48 h，最后使用完全培養基直至10 d后完全分化。誘導分化培養基的配制如下：將6.3 μL油酸標準品與1 mL DMSO混合配制為油酸原液，取400 μL油酸原液與50 mL完全培養基混合配制成誘導分化培養基。

1.4 CCK-8和細胞周期檢測

CCK-8法檢測細胞增殖活力，步驟參考Cell Counting Kit-8 （美侖，中國）說明書。細胞周期檢測：收集細胞后先加入75%乙醇放置-20 ℃過夜，離心后PBS進行水合，隨后加碘化丙啶染色液進行孵育細胞，最后用流式細胞儀檢測細胞周期，計數2萬個細胞，結果用FlowJo7.6軟件分析。

1.5 油紅O染色和甘油三酯檢測

處理后的細胞移去培養基，用PBS緩沖液輕輕清洗3次后，用4% 的甲醛固定液將細胞固定40 min，然后用PBS清洗3次，最后用0.5%的油紅O染色10 min進行顯微鏡觀察。甘油三酯檢測采用甘油三酯檢測試劑盒測定（普利萊，中國），按照廠家技術說明進行操作。

1.6 數據統計分析

所有數據采用SPSS 20.0進行獨立樣本t-test分析，每組3個生物學重復 （n≥3）；Plt;0.05 表示差異顯著（用*表示），Plt;0.01 表示差異極顯著（用**表示），Plt;0.001 表示差異極顯著（用***表示），Pgt;0.05時表示無顯著性差異；結果使用GraphPad Prism 7.0軟件進行作圖，數據表示為“平均值±標準誤 （mean±SEM）”。

2 結 果

2.1 G3BP1基因突變位點的篩選

本研究前期通過全基因組關聯分析鑒定到與固始雞IMF沉積相關的候選基因G3BP 為了初步篩查G3BP1基因中的SNPs位點，首先利用300只固始雞F 2資源群的DNA混合樣品進行了PCR產物測序，共篩選到8個突變位點，所在基因上的位置如圖1A所示。此外，為了進一步鑒定G3BP1基因中的SNPs位點信息，又利用721只固始雞F 2資源群的DNA檢測，發現3個SNPs 位點在該群體中的突變頻率較高（超過10%），突變位點的測序圖譜如圖1B所示。

2.2 G3BP1基因突變位點多態性與連鎖不平衡分析

本研究對G3BP1基因的3個SNPs（13588667Ggt;A、13588768Cgt;A和13588930Cgt;T）進行基因型頻率統計，結果如表2所示，3個SNPs位點的雜合度均大于0. 說明該群體具有良好的遺傳多樣性。利用HaploView軟件進行連鎖不平衡分析，結果如圖2所示，3個SNPs位點具有強相關關系（r² gt;0.95）。

2.3 G3BP1基因變異位點與固始雞F2資源群主要肉質性狀關聯分析

選定強連鎖位點中具有代表性的13588667Ggt;A多態位點與肉質性狀進行關聯分析，結果顯示，該位點不同基因型與雞的皮脂、皮脂率和肌內脂肪顯著相關（Plt;0.05），AA基因型個體的皮脂、皮脂率和肌內脂肪值均小于GG基因型和GA基因型（表3），GA基因型的皮脂、皮脂率均顯著高于GG基因型（Plt;0.05）。

2.4 G3BP1對雞肌內前脂肪細胞增殖的影響

首先用油紅O染色法鑒定細胞的純度，發現分離的肌內前脂肪細胞純度較高（圖3A），可用作后續試驗。在肌內前脂肪細胞增殖期分別將過表達載體pcDNA3.1-G3BP1和對照空載pcDNA3.1轉染到細胞中，與對照組相比，過表達組的G3BP1表達水

平極顯著增加（Plt;0.001）（圖3B），表明G3BP1基因過表達成功。為了研究G3BP1在肌內前脂肪細胞增殖中的作用，通過在肌內前脂肪細胞增殖中過表達G3BP 檢測增殖標志基因的變化，結果發現增殖標志基因CDK1、CCNB2、PCNA和CCND1表達量均極顯著升高（Plt;0.001）（圖3C）。通過CCK-8檢測G3BP1對細胞增殖活力的影響，結果發現過表達G3BP1后24 h的細胞活力顯著升高（Plt;0.05）（圖3D）。此外，流式細胞術檢測發現過表達G3BP1后，G1/G0期細胞極顯著降低（Plt;0.01），S期細胞極顯著增多（Plt;0.01）（圖3E-G），說明 G3BP1促進了肌內前脂肪細胞的周期進程。以上結果均表明G3BP1可以促進肌內前脂肪細胞的增殖。

2.5 G3BP1對雞肌內前脂肪細胞分化的影響

為了檢測G3BP1基因對肌內前脂肪細胞分化的影響，在肌內前脂肪細胞過表達 G3BP1后，發現分化標志基因LPL顯著升高（Plt;0.05），CEBPA極顯著升高（Plt;0.001），FABP4、FABP5、FASN和PPARγ有升高趨勢，但是變化不顯著（圖4A）。過表達G3BP1后肌內前脂肪細胞中的甘油三酯（TG）含量極顯著上升（Plt;0.01）（圖4B）。此外，過表達G3BP1極顯著增加了肌內前脂肪細胞中的脂滴生成（Plt;0.01）（圖4C-E）。

3 討 論

肌內脂肪含量的適度增加可以顯著提升肉類的感官特性，已成為畜禽肉品質改良的關鍵目標之一^［25-27］。分子育種加速了動物育種的速度，通過全基因組關聯分析能夠篩選出影響重要經濟性狀的分子標記，為分子育種提供理論基礎^［28］。利用IMF性狀相關基因的分子標記進行選育，有望實現對IMF含量的精準調控^［29］。本課題組前期通過全基因組關聯分析鑒定到與固始雞IMF沉積相關的候選基因G3BP1^［11-12］，為了鑒定相關的分子標記，本研究檢測了G3BP1基因的遺傳變異位點，結果鑒定到3個SNPs位點存在強連鎖關系（r² gt;0.95），有研究表明，在遺傳學研究中，r2與關聯分析的效力密切相關，當幾個SNPs處在連鎖不平衡狀態，那么這種變異可能會比單個位點更有價值和效能^［30-31］。在鑒定到的3個緊密連鎖的位點中，選取了位點13588667Ggt;A進行深入研究。基于測序數據，對該位點進行了關聯性分析，結果表明該位點的不同基因型與雞的皮脂含量、皮脂率以及肌內脂肪含量顯著相關（Plt;0.05），攜帶AA基因型的個體在皮脂、皮脂率和肌內脂肪含量上均低于GG和GA基因型的個體，這表明GG和GA基因型是較為優良的基因型。因此，該位點有望作為一個有效的分子標記，可能實現對肌內脂肪含量的精準調控。

前脂肪細胞的增殖與分化直接影響IMF的沉積，G3BP1可能在調控肌內前脂肪細胞的增殖與分化中起關鍵作用。細胞周期蛋白（如cyclins）和細胞周期依賴性激酶（CDKs）等的活性驅動前脂肪細胞進入增殖階段^［32-33］。本研究檢測發現，G3BP1通過調控細胞周期相關基因（如CDK1、CCNB2、PCNA和CCND1）的表達，促進前脂肪細胞的增殖，且流式細胞術和CCK-8檢測結果同樣證實了G3BP1在肌內前脂肪細胞增殖中的促進作用。前脂肪細胞分化為成熟脂肪細胞是一個復雜的過程^［34］，涉及多個基因和信號通路的協同調控^［35-36］。脂肪細胞數量的增加受信號因子誘導，部分信號因子可驅動間充質干細胞向前脂肪細胞轉化，進而分化為脂肪細胞^［37-38］。本研究結果表明，G3BP1基因通過上調脂肪生成相關基因（如LPL和CEPBA）的表達，促進前脂肪細胞向成熟脂肪細胞轉化。此外，G3BP1基因還影響肌內前脂肪細胞甘油三酯的含量，促進脂滴在細胞內的形成和積累，這是成熟脂肪細胞的主要特征^［39］。G3BP1能夠促進前脂肪細胞的增殖以及脂肪細胞的生成，這一機制在肥胖相關基因 （FTO） 的信號傳導途徑中也得到證實，FTO通過調控WNT/β-catenin通路中的相關因子，進一步增強了前脂肪細胞的增殖與脂肪細胞的生成^［40］。因此，本研究明確了G3BP1在肌內前脂肪細胞增殖和脂肪細胞生成中的作用。

4 結 論

本研究明確了G3BP1基因13588667Ggt;A位點不同基因型與固始雞的皮脂、皮脂率和肌內脂肪顯著相關（Plt;0.05），該位點可以作為檢測肌內脂肪的一個重要分子標記，此外確定了G3BP1具有促進肌內前脂肪細胞增殖與脂肪細胞生成的作用。本研究為我國優質肉雞培育提供了重要的理論依據和應用價值。

參考文獻（References）：

［1］ KHAN M I，JO C，TARIQ M R.Meat flavor precursors and factors influencing flavor precursors—A systematic review［J］.Meat Sci，2015，110：278-284.

［2］ CAMERON N D，ENSER M，NUTE G R，et al.Genotype with nutrition interaction on fatty acid composition of intramuscular fat and the relationship with flavour of pig meat［J］.Meat Sci，2000，55（2）：187-195.

［3］ MATEESCU R G，GARRICK D J，GARMYN A J，et al.Genetic parameters for sensory traits in longissimus muscle and their associations with tenderness，marbling score，and intramuscular fat in Angus cattle［J］.J Anim Sci，2015，93（1）：21-27.

［4］ OKEUDO N J，MOSS B W.Interrelationships amongst carcass and meat quality characteristics of sheep［J］.Meat Sci，2005，69（1）：1-8.

［5］ BLASCO A，NAGY I，HERN NDEZ P.Genetics of growth，carcass and meat quality in rabbits［J］.Meat Sci，2018，145：178-185.

［6］ HU T T，LI Z B，GONG C S，et al.FOS inhibits the differentiation of intramuscular adipocytes in goats［J］.Genes （Basel），2023，14（11）：2088.

［7］ ZHANG Y Y，WANG Y N，WANG H B，et al.MicroRNA-224 impairs adipogenic differentiation of bovine preadipocytes by targeting LPL［J］.Mol Cell Probes，2019，44：29-36.

［8］ PEWAN S B，OTTO J R，HUERLIMANN R，et al.Genetics of omega-3 long-chain polyunsaturated fatty acid metabolism and meat eating quality in Tattykeel Australian white lambs［J］.Genes （Basel），2020，11（5）：587.

［9］ LI Y F，CHEN Y，JIN W J，et al.Analyses of MicroRNA and mRNA expression profiles reveal the crucial interaction networks and pathways for regulation of chicken breast muscle development［J］.Front Genet，2019，10：197.

［10］ 趙 峰，康相濤，白曉輝，等.父母代固始雞空腸的發育形態學研究［J］.家畜生態學報，2007，28（5）：48-51.

ZHAO F，KANG X T，BAI X H，et al.Study on the developmental morphology of the jejunum in the parental line of Gushi chickens［J］.Acta Ecologae Animalis Domastici，2007，28（5）：48-51.（in Chinese）

［11］ LI H，LI S，ZHANG H，et al.Integrated GWAS and transcriptome analysis reveals key genes associated with muscle fibre and fat traits in Gushi chicken［J/OL］.British Poultry Science，2024，doi：10.1080/00071668.2024.2400685.

［12］ FAN S X，YUAN P T，LI S H，et al.Genetic architecture and key regulatory genes of fatty acid composition in Gushi chicken breast muscle determined by GWAS and WGCNA［J］.BMC Genomics，2023，24（1）：434.

［13］ PARKER F，MAURIER F，DELUMEAU I，et al.A Ras-GTPase-activating protein SH3-domain-binding protein［J］.Mol Cell Biol，1996，16（6）：2561-2569.

［14］ TOCQUE B，DELUMEAU I，PARKER F，et al.Ras-GTPase activating protein （GAP）：A putative effector for Ras［J］.Cell Signal，1997，9（2）：153-158.

［15］ MATSUKI H，TAKAHASHI M，HIGUCHI M，et al.Both G3BP1 and G3BP2 contribute to stress granule formation［J］.Genes Cells，2013，18（2）：135-146.

［16］ TSAI W C，GAYATRI S，REINEKE L C，et al.Arginine demethylation of G3BP1 promotes stress granule assembly［J］.J Biol Chem，2016，291（43）：22671-22685.

［17］ WINSLOW S，LEANDERSSON K，LARSSON C.Regulation of PMP22 mRNA by G3BP1 affects cell proliferation in breast cancer cells［J］.Mol Cancer，2013，12（1）：156.

［18］ ZHENG X C，CHEN J W，DENG M H，et al.G3BP1 and SLU7 jointly promote immune evasion by downregulating MHC-I via PI3K/Akt activation in bladder cancer［J］.Adv Sci （Weinh），2024，11（7）：e2305922.

［19］ GE Y D，JIN J B，CHEN G，et al.Endometrial cancer （EC） derived G3BP1 overexpression and mutant promote EC tumorigenesis and metastasis via SPOP/ERα axis［J］.Cell Commun Signal，2023，21（1）：303.

［20］ 邵 琪，屈 陽，朱子晨，等.應用G3BP1穩轉細胞系監測應激狀態下的應激顆粒形成［J］.畜牧獸醫學報， 2020，51（9）：2275-2283.

SHAO Q，QU Y，ZHU Z C，et al.Monitoring of stress granule formation under stress by G3BP1 stable expressing cell line［J］.Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica，2020，51（9）：2275-2283.（in Chinese）

［21］ 張 頻，孫英杰，鄭 航，等.雞G3BP1在新城疫病毒感染誘導應激顆粒形成過程中的作用［J］.畜牧獸醫學報，2017，48（3）：515-521.

ZHANG P，SUN Y J，ZHENG H，et al.The role of chicken G3BP1 in the formation of stress granules induced by newcastle disease virus infection［J］.Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica，2017，48（3）：515-521.（in Chinese）

［22］ LV S，MA M L，SUN Y M，et al.MicroRNA-129-5p inhibits 3T3-L1 preadipocyte proliferation by targeting G3BP1［J］.Anim Cells Syst （Seoul），2017，21（4）：269-277.

［23］ HAN R L，WEI Y，KANG X T，et al.Novel SNPs in the PRDM16 gene and their associations with performance traits in chickens［J］.Mol Biol Rep，2012，39（3）：3153-3160.

［24］ BALLESTER M，CASTELL A，IB EZ E，et al.Real-time quantitative PCR-based system for determining transgene copy number in transgenic animals［J］.Biotechniques，2004，37（4）：610-613.

［25］ 馬鳳英，張景萍，付紹印，等.影響綿羊肉質因素的研究進展［J］.飼料研究，2023，46（10）：134-138.

MA F Y，ZHANG J P，FU S Y，et al.Research progress on factors affecting sheep meat quality［J］.Feed Research，2023，46（10）：134-138.（in Chinese）

［26］ PIAO M Y，YONG H I，LEE H J，et al.Comparison of fatty acid profiles and volatile compounds among quality grades and their association with carcass characteristics in longissimus dorsi and semimembranosus muscles of Korean cattle steer［J］.Livest Sci，2017，198：147-156.

［27］ 祝仁鑄.野萊F1豬肉品質及肌內脂肪沉積機理的研究［D］.泰安：山東農業大學，2013.

ZHU R Z.Study on the meat qualities and the sedimentary mechanism of intramuscular fat in YL F1 pigs［D］.Taian：Shandong Agricultural University，2013.（in Chinese）

［28］ LU T，ABDALLA GIBRIL B A，XU J G，et al.Unraveling the genetic foundations of broiler meat quality：Advancements in research and their impact［J］.Genes （Basel），2024，15（6）：746.

［29］ CAO Y Z，XING Y X，GUAN H B，et al.Genomic insights into molecular regulation mechanisms of intramuscular fat deposition in chicken［J］.Genes （Basel），2023，14（12）：2197.

［30］ NOTHNAGEL M，FRST R，ROHDE K.Entropy as a measure for linkage disequilibrium over multilocus haplotype blocks［J］.Hum Hered，2002，54（4）：186-198.

［31］ AKEY J，JIN L，XIONG M M.Haplotypes vs single marker linkage disequilibrium tests：what do we gain？［J］.Eur J Hum Genet，200 9（4）：291-300.

［32］ ZHANG W Z，WANG L，RAZA S H A，et al.MiR-33a plays a crucial role in the proliferation of bovine preadipocytes［J］.Adipocyte，202 10（1）：189-200.

［33］ ZHAO C Z，WU H G，CHEN P R，et al.MAT2A/2B promote porcine intramuscular preadipocyte proliferation through ERK signaling pathway［J］.Anim Sci J，2019，90（9）：1278-1286.

［34］ CRISTANCHO A G，LAZAR M A.Forming functional fat：a growing understanding of adipocyte differentiation［J］.Nat Rev Mol Cell Biol，201 12（11）：722-734.

［35］ ZHANG W Z，RAZA S H A，LI B Z，et al.miR-33a inhibits the differentiation of bovine preadipocytes through the IRS2-Akt pathway［J］.Genes （Basel），2023，14（2）：529.

［36］ AMBELE M A，DHANRAJ P，GILES R，et al.Adipogenesis：A complex interplay of multiple molecular determinants and pathways［J］.Int J Mol Sci，2020，21（12）：4283.

［37］ LIU S S，FANG X，WEN X，et al.How mesenchymal stem cells transform into adipocytes：Overview of the current understanding of adipogenic differentiation［J］.World J Stem Cells，2024，16（3）：245-256.

［38］ WU M Y，MI J W，QU G X，et al.Role of hedgehog signaling pathways in multipotent mesenchymal stem cells differentiation［J］.Cell Transplant，2024，33：9636897241244943.

［39］ ENGIN A B.MicroRNA and Adipogenesis［J］.Adv Exp Med Biol，2017，960：489-509.

［40］ MELNIK B C，WEISKIRCHEN R，STREMMEL W，et al.Risk of fat mass- and obesity-associated gene-dependent obesogenic programming by formula feeding compared to breastfeeding［J］.Nutrients，2024，16（15）：2451.

（編輯 郭云雁）