1株矮生嵩草根際高效溶磷菌的篩選、鑒定與促生效果研究

摘要：為挖掘青藏高原特殊環(huán)境條件下牧草根際溶磷菌資源，促進退化高寒草地的治理，本研究從青海省門源縣矮生嵩草（Kobresia humilis）根際土壤中分離到1株溶磷菌PSB，用16S rRNA基因分析法確定了其分類地位，并通過鉬銻抗比色法和盆栽試驗進行了溶磷與促生效果的研究。結果表明：菌株PSB為草假單胞菌（Pseudomonas poae），可在10℃低溫下正常生長。溶磷量高于700 μg·mL-1，可產多種有機酸，其中，草酸、乳酸、乙酸、檸檬酸、琥珀酸含量較高，總有機酸量為7461.88 μg·mL-1。同時，有產生長素（Indole-3-acetic acid，IAA）、ACC脫氨酶及鐵載體的能力。盆栽試驗結果表明，菌株PSB可以促進垂穗披堿草（Elymus nutans）生長，使植株高度增加16%，地上生物量增加12%，植株全磷含量增加10%；接種PSB對土壤全磷含量及有效磷含量均有顯著的促進作用（Plt;0.05），土壤有效磷從0.91 g·kg-1增加到1.97 g·kg-1。綜上所述，菌株PSB具有較強的溶磷和促植物生長能力，是高寒地區(qū)生產微生物菌肥的優(yōu)良菌種資源。

關鍵詞：高寒草甸；根際促生菌；溶磷菌；促生效果

中圖分類號：S812.2" " " " 文獻標識碼：A" " " " 文章編號：1007-0435（2025）02-0410-09

Screening，Identification，and Growth Promoting Effects Analysis of A Highly Efficient Phosphorus Solubilizing Bacterium

WU Yan-ru1，2， YANG Wen-quan3， LIU Jia-qing1， KOU Wei-liang1， YU Yang-hua1， LIU Qian1，

ZHANG Yang-can1， LI Xi-lai2，4， KOU Jian-cun1，2*

（1.College of Grassland Agriculture，Northwest Aamp;F University，Yangling，Shaanxi Province 712100，China；2.State Key Laboratory of Plateau ecology and Agriculture，Xining，Qinghai Province 810016，China；3.College of Life Sciences，Northwest Aamp;F University，Yangling，Shaanxi Province 712100，China；4.College of Agriculture and Animal Husbandry，Qinghai University，Xining，Qinghai Province 810016，China）

Abstract：In order to explore the resources of phosphorus solubilizing bacteria in the rhizosphere of forage under the special environmental conditions at the Qinghai Xizang Plateau to promote the management of alpine degraded grasslands. In this study，we isolated a phosphorus solubilizing bacterium PSB from the rhizosphere soil of Kobresia humilis in Menyuan County，Qinghai Province. It was classificated using 16S rRNA gene analysis. The phosphorus solubilizing and growth promoting effects were studied through the molybdenum antimony resistance colorimetry and pot experiments. The results showed that the strain PSB was belonged to Pseudomonas poae，which can grow normally at a low temperature of 10℃. Its dissolved phosphorus content was higher than 700 μg·mL-1. It can produce the various organic acids with a total content of 7461.88 μg·mL-1. The cocntents of oxalic acid，lactic acid，acetic acid，citric acid，and succinic acid were high. It also had the ability to produce IAA （Indole-3-Acetic Acid），ACC deaminase，and iron carrier. The results of the pot experiment showed that the strain PSB could promote the growth of Elymus nutans，with a 16% increase in plant height，a 12% increase in aboveground biomass，and a 10% increase in plant total phosphorus. The vaccination with PSB significantly promoted the contents of total phosphorus and available phosphorus in soil （Plt;0.05）. The available phosphorus in the soil increased from 0.91 g·kg-1 to 1.97 g·kg-1. Therefore，the strain PSB has strong ability to dissolve phosphorus and promote plant growth. It is an excellent strain resource for producing microbial fertilizers in high-altitude and cold regions.

Key words：Alpine meadows；Plant Growth Promoting Rhizobacteria；Phosphorus solubilizing bacteria；Promoting effect

青藏高原被譽為“地球第三極”，在青藏高原特有的地勢和氣候環(huán)境中，產生了該地區(qū)特有的草地類型—高寒草地［1］。高寒草地不僅在提升青藏高原農牧民經濟發(fā)展方面具有重要的作用，還具有生物多樣性保護、營養(yǎng)循環(huán)、氣候調節(jié)等多種生態(tài)功能［2］。但是，近年來由于過度放牧、草產品及畜產品不斷輸出、氣候變化等原因，致使高寒草地的土壤養(yǎng)分不斷流失、土壤肥力下降、植物生長受阻，最后導致高寒草地發(fā)生了嚴重退化［3］。對于重度退化的高寒草地，如果不進行人為干擾修復，僅靠自然恢復所需要的時間很長，可能需要幾十年甚至上百年［4］。在對退化的高寒草地進行修復時，施肥是最常用的方法，通過施肥可以顯著改善退化草地的植物健康狀況，縮短修復的時間［5］。

磷是植物生長發(fā)育所必需的三大礦質營養(yǎng)元素之一，對植物的生長發(fā)育有重要的意義，而高寒草地的退化對土壤磷含量有顯著的影響［6］。為了增加土壤中的磷含量，促進退化高寒草地的快速恢復，通常采用施磷肥的方法來解決草地土壤中磷缺少的問題［5］。但磷肥的使用有很多的弊端：一方面，磷肥的利用效率很低，只有15%～20%，其余部分因為化學沉淀而形成難溶性磷酸鹽儲存在土壤中，成為土壤磷庫的一部分［7］；另一方面，沉淀積累的磷隨后會釋放到地表水中，導致水體富營養(yǎng)化［8］。退化高寒草地缺乏植物可以利用的磷，但使用磷肥又會產生新的環(huán)境問題，因此，探索提高退化高寒草地中土壤磷含量及植物磷利用效率的方法成為當下研究的熱點。

溶磷菌是與土壤磷素轉化密切相關的土壤微生物，其可以將土壤中的有機磷轉化為無機磷或將難溶性無機磷轉化為可溶性磷酸鹽，供植物吸收利用［9］。溶磷菌之所以能溶磷，與其能分泌有機酸有直接的關系。有機酸是低分子量化合物，通過其羥基和羧基的分泌螯合磷結合的陽離子，并通過氣體交換和質子-磷酸氫鹽平衡降低根際pH值，從而釋放結合的磷［10］。同時，有些溶磷菌還兼有生產植物激素和酶、抑制病菌生長、解除重金屬毒害等作用，這也是其能促進植物生長和提高植物產量的原因之一［11］。除了可以將土壤中難溶磷礦物中的磷元素釋放之外，溶磷菌還能有效吸附植物根際周圍的Zn，Cu，Ca等微量元素，促進作物對微量元素的吸收，改善作物營養(yǎng)，增加作物生長等多種功效［12］，而且還不會造成土壤板結、污染地下水。因此，篩選高效溶磷菌并研制微生物菌肥，是解決退化高寒草地土壤中磷缺乏的有效途徑。

但是，青藏高原海拔高，環(huán)境條件嚴酷，外來微生物很難生存［13］，加之目前對溶磷菌的研究多集中在低海拔的農區(qū)，針對高寒草地溶磷菌的篩選及菌肥的研究較少［14］，這也限制了對這些特殊地區(qū)微生物資源的挖掘與利用。因此，篩選適合青藏高原特殊環(huán)境的本地土壤溶磷菌，以此來解決草地土壤磷缺乏，促進退化高寒草地的快速恢復就顯得尤為重要。為此，本研究對高寒草地植物根際土壤中的溶磷菌進行分離、純化和鑒定，并研究其促生作用及溶磷機理，以為高寒特殊地區(qū)土壤微生物資源的開發(fā)利用及通過微生物菌肥促進退化高寒草地的修復提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 樣地概況與樣品采集

采樣地點位于祁連山國家公園內門源縣硫磺溝（37°46′N，101°21′E）的高寒草甸。選取生長旺盛的矮生嵩草（Kobresia humilis），在植株周圍沿根系生長方向挖出植物根系，輕輕抖動根部，去除大量非根際土，將整個植株帶根裝入無菌袋并放入冰盒，帶回實驗室備用。

1.2 菌株篩選及保存

稱取10 g根際土，置于250 mL的三角瓶，加入90 mL無菌水，然后將三角瓶置于28℃的恒溫搖床，180 r·min-1震蕩30 min，取出后即得10-1梯度的土壤懸浮液。準備6支20 mL滅菌離心管，分別加入9 mL無菌水，用移液槍吸取1 mL10-1梯度土壤懸浮液至試管中，混勻后得到濃度為10-2梯度土壤懸浮液。重復上述步驟，分別將土壤懸浮液依次稀釋至10-4，10-5和10-6梯度，混勻后待用。用移液槍從10-4，10-5，10-6這3個梯度的離心管中分別吸取200 μL土壤懸液涂布于PKO（Pikovaskaia’s）無機磷平板，每個梯度涂3個平板。用封口膜封好后將平板倒置在28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7 d。挑選平板上菌落生長良好且周圍透明圈明顯的菌落進行純化培養(yǎng)。將獲得的單菌落接種至PKO無機磷培養(yǎng)基上，于10℃低溫下培養(yǎng)3～5 d，觀察培養(yǎng)基上菌株生長情況，能夠在選擇培養(yǎng)基上生長并有明顯透明圈的菌株即為耐低溫溶磷菌，將所有分離到的菌株于-80℃冰箱保存?zhèn)溆茫?5］。

1.3 溶磷能力的測定

1.3.1 溶磷圈直徑的測定 將分離得到的有溶磷圈的菌株在LB培養(yǎng)基上活化后接種于無機磷固體培養(yǎng)基上，28℃恒溫培養(yǎng)，培養(yǎng)5 d后用游標卡尺測定溶磷透明圈（D）及菌落直徑（d），單位為mm，根據(jù)溶磷透明圈及菌落直徑比值（D/d）的大小初步判斷菌株的溶磷能力。

1.3.2 溶磷菌磷增量測定 種子液制備：將初篩后具有較強溶磷能力的菌株接種于液體LB培養(yǎng)基中，置于28℃，180 r·min-1搖床震蕩培養(yǎng)24 h，用分光光度計測定菌液在700 nm波長處的吸光值（OD700），待其吸光值在0.8～1.0時停止培養(yǎng)，此時的菌液即為種子液。將種子液4℃保存。

磷增量測定：按1%的接種量將種子液接種到無機磷液體培養(yǎng)基中，以不接種種子液的無機磷液體培養(yǎng)基為空白對照，然后置于28℃，180 r·min-1搖床震蕩培養(yǎng)。7 d后，先測定培養(yǎng)液的pH值，然后將培養(yǎng)液用離心機在4℃，8000 r·min-1下離心20 min，取上清液用鉬銻抗比色法測定扣除對照后菌株的有效磷增量，并計算解磷率［16］。

菌株有效磷增量=（ρV×Ts）/V0；

解磷率（%）=（菌株有效磷增量×V0）/加入磷酸鈣量×100%；

式中，ρ為從標準曲線上查得有效磷的濃度（μg·mL-1），Ts為分取倍數(shù)，V0為測定培養(yǎng)液的體積（mL），V為顯色時定容體積（mL）。

1.4 溶磷菌16S rRNA序列鑒定

將獲得的溶磷菌株在PKO無機磷培養(yǎng)基上培養(yǎng)5 d后，送北京擎科生物科技有限公司，使用細菌通用引物27f（5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'）和1492r（5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3'）進行16S rRNA基因序列測定。將所得序列信息提交至NCBI，采用BLAST在線服務器（https：//blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi）對未知菌種基因序列進行同源性比對分析，比對結果相似率gt;99%為同一物種，相似率在95%～99%屬于同一屬。使用MEGA11軟件的Neighbor-Joining法構建系統(tǒng)發(fā)育樹，對菌株進行初步分類鑒定。

1.5 盆栽試驗

種植前將營養(yǎng)土置于高壓滅菌鍋中，121℃滅菌20 min，重復滅菌3次后將其作為培養(yǎng)基質，營養(yǎng)土購于品氏托普園藝（上海）有限公司。垂穗披堿草（Elymus nutans）種子由青海大學農牧學院惠贈，種子用75%酒精和2%次氯酸鈉溶液消毒，用無菌水清洗數(shù)次后進行播種。營養(yǎng)缽直徑為12 cm，高度為10 cm，每缽均勻播種30粒，出苗1周后進行接菌試驗。

用接種環(huán)挑取篩選的溶磷菌的單菌落至20 mL LB液體培養(yǎng)基中，于28℃，180 r·min-1恒溫搖床上振蕩培養(yǎng)24 h，用無菌水調節(jié)菌液，使菌液在600 nm波長處的吸光值（OD600）為1時即為制備好的PSB菌液。試驗設置接菌處理（PSB）與空白對照（CK）處理，在接菌處理中添加PSB菌液；在空白對照中添加滅菌后的LB液體培養(yǎng)基。將PSB菌液及滅菌后的LB空白培養(yǎng)基以每缽20 mL的量接種于垂穗披堿草土壤中。每隔7 d接種一次，共接種4次，每個處理3個重復。每隔7 d測量植株垂直高度。在第1次接種溶磷菌28 d后收獲地上部分，稱鮮重后置于105℃烘箱中殺青30 min，然后，在80℃下烘干至恒重，冷卻后稱干重并計算葉片含水量。硫酸-雙氧水消解，鉬銻抗比色法測定垂穗披堿草地上部分全磷及土壤全磷含量；碳酸氫鈉浸提，鉬銻抗比色法測定土壤速效磷含量，具體步驟參照鮑士旦《土壤農化分析第三版》［17］。

1.6 菌株產酸產酶能力測定

液相色譜法測定菌液有機酸含量；CAS（Chrome azurol S）培養(yǎng)基透明圈法測定鐵載體分泌能力；酶聯(lián)免疫分析法測定吲哚乙酸（IAA）含量及ACC脫氨酶（ACCdase）活性［18］。

1.7 數(shù)據(jù)處理

采用Microsoft Excel 2016對數(shù)據(jù)進行整理。SPSS22.0進行單因素方差分析（One-way ANOVA）、獨立樣本T檢驗。用派森諾云平臺作圖，并通過Kruskal-Wallis秩和檢驗和Dunn’test作為事后檢驗，驗證差異的顯著性。

2 結果與分析

2.1 耐低溫高效溶磷菌株的篩選

利用PKO無機磷培養(yǎng)基從矮生嵩草根際土壤中篩選到5株高效溶磷菌（PSB，PSZ12，PSZ10，PSZ3，PSZ13）。培養(yǎng)5 d后，5株菌在無機磷培養(yǎng)基上產生的溶磷圈直徑與菌落直徑比值在1.32～1.49，均具有較好的溶磷能力（表1）。其中，菌株PSB在PKO無機磷培養(yǎng)基上可以產生明顯透明圈（圖1），且溶磷圈直徑與菌落直徑比值最大，可達1.49，且在10℃低溫條件下生長良好，其余4株菌在低溫條件下生長速度均較PSB慢。在液體培養(yǎng)條件下，菌株PSB在第7 d時的溶磷能力測定結果顯示，有效磷增量為729.33 μg·mL-1，解磷率為14.61%，培養(yǎng)液pH值較對照組有顯著降低（Plt;0.05）（表2）。綜合固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)試驗結果，菌株PSB溶磷能力較強，解磷率顯著高于其他菌株（Plt;0.05）。且在10℃低溫條件下生長良好，因此選取其作為后續(xù)植物促生試驗的菌株。

2.2 菌株PSB的16S rRNA測序和系統(tǒng)發(fā)育樹分析

菌株PSB的16S rRNA基因序列經BLAST同源性比對分析表明，其與草假單胞菌（Pseudomonas poae）NR 028996.1具有100%的一致性，相同堿基覆蓋率超過99.7%。由構建的系統(tǒng)發(fā)育樹（圖2）可知，菌株PSB與草假單胞菌聚在同一分支上，自展支持率為84%，親緣關系密切，故判定菌株PSB為草假單胞菌（圖2）。

2.3 接種菌株PSB對垂穗披堿草的促生效果

接種菌株PSB對垂穗披堿草的室內盆栽試驗表明，菌株PSB可以促進垂穗披堿草生長，與CK相比，接種PSB第35 d后，垂穗披堿草的植株高度增加了16.01%（圖3a、圖3b），植株地上部分干重增加了12%（圖3c），但植株含水量無顯著變化（圖3d）。垂穗披堿草植株全磷含量測定結果如圖3e所示，接種PSB的垂穗披堿草植株全磷含量為3.7g·kg-1，不接種PSB的對照的垂穗披堿草植株全磷含量為3.35 g·kg-1，接種PSB后顯著提高了垂穗披堿草植株的全磷含量（Plt;0.05）。盆栽土壤全磷及速效磷含量測定結果如圖3f和3g所示，接種PSB的土壤速效磷含量為1.97 g·kg-1，極顯著高于CK的土壤速效磷含量（0.91 g·kg-1）（Plt;0.01），同時土壤全磷含量也極顯著增加（Plt;0.01）。

2.4 菌株PSB產酸產酶能力分析

菌株PSB在溶磷過程中可分泌多種有機酸，總有機酸的量為7461.88 μg·mL-1（表3）。其中，分泌的草酸、乳酸、乙酸、檸檬酸和琥珀酸量顯著高于CK（Plt;0.05），除此之外，PSB還能分泌少量的酒石酸和蘋果酸，但分泌量與CK無顯著差異。

對菌株PSB產酶特性結果研究表明，PSB有分泌IAA和ACC脫氨酶的能力，其分泌量分別為109.67 μg·L-1，162.59 U·L-1，顯著高于CK（Plt;0.05）（表4）。

通過CAS培養(yǎng)基對菌株PSB的產鐵載體能力進行初步測定發(fā)現(xiàn)，菌株PSB在CAS固體檢測培養(yǎng)基上出現(xiàn)透明圈，有產鐵載體的能力（圖4）。

3 討論

3.1 溶磷菌的分布及其在退化草地中的應用

環(huán)境是影響溶磷菌發(fā)揮溶磷作用的重要因素，不同環(huán)境分布的溶磷菌種類也有所不同。張廷銳等人在農田中篩選出9株有良好溶磷作用的菌株，初步鑒定為解鳥氨酸拉烏爾菌（Raoultella ornithinolytica）［19］。鄧小軍等人在南方紅壤區(qū)林木根際土壤中篩選出6株可以溶解無機磷的菌株，經鑒定為巨大芽孢桿菌（Bacillus megaterium）［20］。張雪梅等人在鰻草根際沉積物中分離獲得4株有較高溶磷能力的菌株，分別屬于芽孢桿菌（Bacillus altitudinis）、桑腸桿菌（Enterobacter mori）、大腸埃希氏菌（Escherichia coli）和海科貝特氏菌（Cobetia marina）［21］。不同研究所篩選的菌株種類差異較大，可能是由于試驗地的生態(tài)環(huán)境不同。在高寒地區(qū)的特殊環(huán)境下，溶磷菌種類與農田、林地及海洋中有一定的差異。張晗昱等人的研究從青藏高原多年凍土區(qū)土壤中篩選出5株有溶磷作用的假單胞菌屬（Pseudomonas）細菌［22］，李明源等人在祁連山篩選出的87株植物根際促生菌中有84.85%為假單胞菌屬細菌，占絕對優(yōu)勢［23］。假單胞菌屬細菌廣泛存在于土壤環(huán)境中，適應能力強，代謝能力強，可以利用多種氮源碳源底物［24］，先前的研究也表明假單胞菌屬細菌在高寒地區(qū)分布較為廣泛，在極端生境土壤中相對豐度較高［25］。本試驗從高寒草甸的土壤樣品中分離到的溶磷菌PSB，經鑒定為草假單胞菌（P.poae），可以通過分泌有機酸、降低溶解無機磷、分泌植物激素（IAA）、ACC脫氨酶、鐵載體等物質促進植物生長，且菌株在10℃低溫環(huán)境中可以正常生長，在高寒地區(qū)也可以有效發(fā)揮促生作用。

青藏高原的草地由于氣候特殊和過度放牧等原因發(fā)生了嚴重退化［3］，接種溶磷菌可以增加土壤及植株磷含量、促進植物生長發(fā)育，是退化草地修復的有效措施［26］。但外來微生物可能存在不能適應當?shù)丨h(huán)境、破壞原有微生物群落，甚至造成生物入侵等問題［27-28］。一些研究指出，新棲息地的有效資源量與外來微生物的存活率呈顯著的正相關［27］，退化草地植被蓋度下降，養(yǎng)分含量較低，外來微生物難以存活。本土微生物可能通過捕食、拮抗、寄生等作用調控外來微生物的行為，拮抗物質還可以通過直接消滅或者阻斷微生物群體感應作用對外來微生物產生抑制，降低其存活的成功率［29］。即使外來微生物可以適應當?shù)貧夂蚣碍h(huán)境，也有造成生物入侵的可能性。有研究報道本土微生物多樣性越高，外來微生物越難入侵［30］，但退化草地微生物群落結構較簡單，生物多樣性及系統(tǒng)穩(wěn)定性低，外來微生物入侵容易。在新環(huán)境中外來微生物和原生微生物競爭資源，破壞微生物群落結構［31］。因此，接種篩選高寒地區(qū)的本土微生物用于退化草地的恢復有一定的必要性。本研究結果表明菌株PSB可以在低溫條件下良好生長，且在盆栽試驗中表明接種菌株PSB可以有效增加植物地上生物量及土壤養(yǎng)分含量。但是，菌株PSB能否真正作為溶磷菌資源生產菌肥，以此來改善高寒退化草地，還需要經過野外試驗進一步驗證。

3.2 溶磷菌促生機理

目前關于溶磷菌促生作用的研究大部分集中在農作物上，對高寒地區(qū)篩選的溶磷菌促生作用研究較少［14］。溶磷菌促進植物生長的直接機制是通過酸化或羧酸鹽與金屬離子螯合從無機磷復合物中釋放磷［32］。本研究篩選的菌株PSB可以分泌多種有機酸，溶磷菌能夠通過分泌有機酸、羥基離子和CO2等物質來分解土壤中的難溶性磷酸鹽，產生的有機酸及其羧基和羥基離子螯合陽離子或降低pH值以釋放磷，有機酸的產生伴隨著pH值的下降，這導致微生物細胞和周圍環(huán)境的酸化，促進植物吸收磷素進而促進植物生長［33］。菌株PSB分泌草酸、乳酸、乙酸、檸檬酸和琥珀酸量較高，顯著高于CK（Plt;0.05）。但菌株PSB分泌酒石酸和蘋果酸量較少，與CK無顯著差異，菌株PSB與李海云等人在紅三葉（Trifolium pratense）中篩選的溶磷菌產有機酸種類有所不同［10］。這可能是由于不同來源土壤的溶磷菌具有不同的代謝途徑和生理特性，產生的有機酸種類和量會有所不同。李凌凌等人的研究表明，溶解土壤難溶性磷酸鹽的過程與溶磷菌分泌的有機酸有關，難溶性磷酸鹽會在石灰性土壤中轉化為磷酸鈣，在酸性土壤中轉化為磷酸鐵和磷酸鋁［34］，不同磷源會影響溶磷菌產生有機酸種類［35］。高寒地區(qū)由于海拔較高，太陽輻射強，植被以耐低溫和耐干旱的高寒草甸為主，土壤pH值通常較低，土壤大多為酸性［36］，這也解釋了本研究與前人研究結果的差異。

溶磷菌促進植物生長的間接機制為產植物激素（IAA）刺激根和根毛生長［37］、磷酸鐵的溶解，釋放與鐵結合的磷等［38］。同時，溶磷菌產生ACC脫氨酶，降解植物中的乙烯前體ACC，導致植物釋放的乙烯量減少，提高細菌定殖能力和競爭力，增強植物的抗逆性［39］。鐵載體是微生物在缺鐵脅迫下釋放的小型有機化合物［40］。一個特定的微生物物種可以產生一個或多個鐵載體，還可以吸收其他物種的鐵載體，不同鐵載體的利用對細菌的競爭力有重要作用，促進植物生長［41］。本研究也發(fā)現(xiàn)，菌株PSB可以產生IAA、ACC脫氨酶、鐵載體等物質，可能是促進植物生長的重要因素。激素和酶可以幫助植物忍受多種非生物脅迫，增強植物在低溫環(huán)境的抗逆性，促進植物在高寒地區(qū)的生長發(fā)育［11］。高寒地區(qū)的土壤條件及氣候比較特殊，氧氣含量低，馮瑞章等人的研究表明不同菌株對溶氧量有不同的需求，高寒地區(qū)篩選出的菌株對氧的敏感性較低，能夠在相對缺氧的環(huán)境中生存并發(fā)揮較強的溶磷能力［42］。在高寒地區(qū)存活的微生物資源抗逆性較好，更適合作為高寒地區(qū)的微生物肥料菌種資源。

4 結論

本研究從青海省門源縣矮生嵩草根際土壤中分離到1株高效溶磷菌株PSB，經鑒定為草假單胞菌（Pseudomonas poae），解磷率達到14.61%，溶磷量高于700 μg·mL-1。其可通過分泌草酸、乳酸、乙酸、檸檬酸、琥珀酸等有機酸溶解無機磷，總有機酸量為7461.88 μg·mL-1，還可產植物激素（IAA）、ACC脫氨酶、鐵載體等改善土壤養(yǎng)分條件、促進植物生長。盆栽試驗結果表明：接種PSB可增加垂穗披堿草的株高及地上生物量，同時可以顯著提高土壤全磷、速效磷含量及植株磷含量，是高寒地區(qū)微生物菌肥生產的良好菌種資源。

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（責任編輯" 劉婷婷）