芹菜AgDREBA6b基因的克隆及非生物脅迫響應分析

摘要：為研究DREBA6b基因在芹菜非生物脅迫中的作用機制，從轉錄組數據中篩選出芹菜DREBA6b基因參考序列并設計引物從津南實芹中克隆到該基因全長cDNA，并命名為AgDREBA6b，對該基因結構、序列特征及系統進化等進行生物信息分析，并利用qPCR檢測該基因在非生物脅迫下的表達模式。結果表明：（1）理化性質表明，AgDREBA6b含1個長度為1 023 bp的開放閱讀框，編碼340個氨基酸，含有典型的AP2轉錄因子保守結構域；AgDREBA6b 蛋白是親水性蛋白，不具有信號肽和跨膜結構。（2）同源序列比對顯示，AgDREBA6b蛋白與其他植物DREB蛋白具有高度保守性，與天竺葵和胡蘿卜親緣關系最近。啟動子分析發現含13種順式元件，其中2種植物生長發育元件、6種激素響應元件和5種脅迫響應元件。（3）qPCR分析顯示，AgDREBA6b基因在低溫、高溫、干旱、高鹽等逆境脅迫誘導下具有不同的表達模式，在低溫、干旱和鹽脅迫誘導后先上調再下調，然而高溫下隨著時間的增加呈現持續上升趨勢，說明AgDREBA6b基因受非生物脅迫誘導表達，尤其高溫響應更為顯著。

關鍵詞：芹菜；AgDREBA6b；克隆；基因表達模式；表達分析

中圖分類號：S188；S636.301" 文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2025）04-0233-09

收稿日期：2024-05-07

基金項目：塔里木大學校長基金（編號：TDZKSS202245）；大學生創新創業訓練計劃項目（編號：202310757011）；林下經濟特種經濟作物栽培技術示范基金（編號：1117989）。

作者簡介：謝芳杰（1995—），女，河南商丘人，碩士，講師，主要研究方向為蔬菜遺傳育種與分子生物學。E-mail：17778649365@163.com。

植物在自然環境狀態下遭受著各種非生物脅迫的威脅。非生物脅迫包括干旱、高溫、高鹽和低溫，對植物的適應性、生物量和產量產生負面影響［1-2］。植物可通過轉錄因子（transcription factors，TF）調節應激信號轉導途徑中眾多基因的表達來對其進行響應［3］。通常響應逆境脅迫的轉錄因子主要有AP2/ERF、WRKY（因其含色氨酸-精氨酸-賴氨酸-酪氨酸-甘氨酸-谷氨酰胺-賴氨酸保守序列得名）、bZIP、NAC和MYB等幾大類［4］。其中，DREB（dehydration responsive element-binding protein）是轉錄因子AP2/ERF基因家族的一個分支，含有1個由60～70個氨基酸殘基組成的保守結構域，位于第14位的V（纈氨酸）和第19位的E（谷氨酸）對轉錄因子與順勢元件的結合，使下游功能基因在干旱、高鹽和高溫等逆境脅迫中發揮重要調控作用［5］。

DREB基因家族在不同物種間的基因數量、基因結構及功能存在顯著差異，根據序列相似性可分為A1～A6亞族［6］。其中A1成員主要參與冷脅迫反應，A2成員主要參與干旱和高鹽應激調節。A3～A6成員的功能與植物的生長發育和非生物脅迫都有一定關系［7-9］。如大豆GmDREB2是A5組成員，它在擬南芥中的過表達使植物對干旱和高鹽脅迫的耐受性增強，而不會引起生長遲緩［10］。擬南芥A6組成員RAP2.4可在干旱脅迫條件下激活葉片中表皮蠟的生物合成［11］。作為PrPDAT2的上游調節因子，樹牡丹中PrDREB2D導致PrPDAT2表達降低，從而參與調控種子ALA積累［12］。以往大多數研究集中在A1組和A2組。然而，近年來關于A6型DREB基因研究成為國內外熱點［13］。目前已在擬南芥（Arabidopsis thaliana）［14］、蘋果（Malus pumil）［15］、大豆（Glycine max）［5，16］、小麥（Triticum aestivum）［17］、油菜（Brassica napus）［18］和菠蘿（Ananas comosus）［19］等多種植物中分別鑒定出56、60、73、48、194、20個家族基因。

芹菜（Apium graveolens L.）為傘形科一年或多年生草本植物，原產于地中海沿岸的沼澤地帶，在中國已有2 000多年的栽培史。芹菜營養豐富，具有較高的食用和藥用價值，日漸成為國內外主要栽培的重要蔬菜之一［20-21］。津南實芹是天津津南區選育的優良品種，葉片肥厚，商品性狀好，抗性強。本研究從津南實芹中克隆了1個AgDREBA6b基因，對其編碼氨基酸進行生物信息學分析和蛋白質亞細胞定位分析，并利用qPCR研究基因在非生物脅迫下（干旱、鹽、低溫和高溫）的特異性響應，旨在進一步為AgDREBA6b基因參與芹菜的抗逆性分子機制和基因功能的研究提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試材料為芹菜品種津南實芹，由南京農業大學作物遺傳與種質創新國家重點實驗室提供。試驗地點位于塔里木大學園藝與林學學院實驗室，于2023年9月將種子播種并置于人工氣候室內。參照文獻［22］設置培養條件，待芹菜植株長至4月齡，進行高溫（38 ℃）、低溫（4 ℃）、高鹽（200 mmol/L NaCl）、干旱（10%PEG-8000）脅迫，分別處理0、1、6、24 h，取成熟的葉片作為待測樣品，所有樣品均設置3次重復。放入液氮中速凍后，儲存于-80 ℃超低溫冰箱。

1.2 芹菜總RNA提取及cDNA合成

使用植物組織總RNA提取試劑盒（擎科生物科技股份有限公司，北京）提取芹菜葉片中的總RNA，并用1%（體積分數）瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計Nano Drop 2000（賽默飛世爾科技公司，美國）檢測RNA的質量及濃度。將質量檢測合格的總RNA使用GoldenstarTM RT6 cDNA Synthesis Mix Rnasin selected試劑盒（擎科，北京）中按照推薦的反應體系將其反轉錄成單鏈cDNA，并用紫外分光光度計Nano Drop 2000測定cDNA的濃度，然后保存在-20 ℃冰箱中備用，用于非生物脅迫基因表達模式分析（選用處理時間為0 h的cDNA為基因克隆試驗的擴增模板）。

1.3 AgDREBA6b基因克隆

以擬南芥AP2/ERF轉錄因子家族為信息探針，結合芹菜轉錄組為基礎，檢索得到芹菜AgDREBA6b的基因序列，使用Primer Premier 5.0軟件設計擴增引物F（5′-ATGATGACAGGTGGTATAG-3′）和R（5′-CTGACGTCATCCCTGATGTCATAA-3′）。以“津南實芹”cDNA為模板進行擴增，PCR反應條件如下：94 ℃預變性5 min；94 ℃變性30 s，55 ℃退火30 s，72 ℃延伸60 s，72 ℃延伸10 min，30個循環。將PCR擴增產物進行1.0%瓊脂糖凝膠電泳，然后用DNA凝膠回收試劑盒回收目的條帶，與pUCm-T載體連接并轉化至DH5α化學感受態細胞中，然后送至北京擎科生物科技股份有限公司進行測序。

1.4 AgDREBA6b生物信息學分析

利用ORF Finder（https：//www.ncbi.nlm.nih.gov/orffinder/）對AgDREBA6b基因序列進行翻譯并獲得其蛋白序列。運用ExPASy（https：//web.expasy.org/）預測AgDREBA6b蛋白的相對分子質量、原子總數、等電點以及親疏水性。使用SOPMA和在線網站phyre（http：//www.sbg.bio.ic.ac.uk/）分別分析該基因的二級結構和三級結構。使用WoLF PSORT預測該基因的亞細胞定位。利用TMHMM 2.0 Server在線網站（http：//www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM）和SignalP-4.1（http：//www.cbs.dtu.dk/services/SignalP/）分別預測蛋白質的跨膜結構域和信號肽。使用NCBI的BLAST搜索其他植物的DREB氨基酸序列，使用DNAMAN軟件進行氨基酸多序列比對，并使用MEGA 5.0軟件基于鄰位相連法構建系統進化樹（自展值為1 000）。使用PlantCARE在線軟件（http：//bioinformatics.psb.ugent.be/webtools/plantcare/html/）分析啟動子序列上的順式作用元件。

1.5 熒光定量qRT-PCR分析

AgDREBA6b基因引物由Primer 6.0軟件設計（F：5′-TCCAAGCCCAGATCCAACTCCA-3′；R：ACCAAAGTCGGGTTCGGTTCTT-3′）。以Actin作為內參基因，引物為（F：5′-GAAATCACAGCACTTGCACC-3′；R：5′-AAGCCTTTGATCTTGAGAGC-3′），將反轉錄產物稀釋10倍后作為qPCR反應模板。qPCR按照2×T5 Fast qPCR Mix（SYBR Green Ⅰ）（全式金生物科技股份有限公司，北京）推薦的反應體系，并使用Bio-Rad-CFX96TM實時PCR系統（Bio-Rad，CA，USA）完成擴增。每個反應3次技術重復。該基因的qPCR分析以芹菜Actin為內參基因，通過2-ΔΔCT法計算目的基因的相對表達量［23］，以相對表達平均值±標準誤表示（n= 3）。

1.6 數據處理與分析

所用數據處理軟件為SPSS 20，AgDREBA6b基因相對表達量采用單因素方差分析和多重比較Tukey檢驗顯著性，顯著差異性水平設為0.05。

2 結果與分析

2.1 芹菜AgDREBA6b基因克隆與序列分析

以芹菜葉片總RNA反轉錄得到的cDNA為模板，設計引物進行PCR擴增，得到 1 023 bp 的目的基因條帶，其長度與預期基本一致（圖1）。將其命名為AgDREBA6b基因（GenBank登錄號：OR727346）。該基因包含1個1 023 bp的完整開放閱讀框，預測編碼了340個氨基酸。保守結構域預測包含AP2結構域（PF00847），其中60個氨基酸殘基的結構域可與DNA結合，存在于轉錄過程，屬于典型的DREB1/CBF轉錄因子。

2.2 AgDREBA6b蛋白理化性質及跨膜結構分析

通過ExPASy在線軟件分析芹菜AgDREBA6b蛋白理化性質，結果（圖2）表明，芹菜AgDREBA6b蛋白分子式為C1 670H2 569N443O526S14，原子總數為 5 222，相對分子量為37.72 ku，理論等電點（PI）為6.54，表明芹菜AgDREBA6b為酸性蛋白。總平均親水性值為-0.614，具有較強的親水性。蛋白質不穩定指數為53.35，脂溶性指數為57.71，推測為不穩定性蛋白。該蛋白氨基酸序列共20種氨基酸組成，其中絲氨酸數量最多，為47個（占13.8%），半胱氨酸和色氨酸數量最少，均為4個，占比均為1.2%（表1）。共有33個帶負電荷的殘基（Asp+Glu）和32個帶正電荷的殘基（Arg+Lys）。

2.3 芹菜AgDREBA6b蛋白二、三級結構預測和亞細胞定位分析

二級結構預測結果表明，AgDREBA6b蛋白由26.47%的α-螺旋、61.76%的無規則卷曲、10%的延伸鏈、1.76%的β轉角組成（圖2-A）。根據 AlphaFold DB model（gene ID：A0A165XQ40）構建的模型與其序列的一致性達到" 87.92%， 三級結構預

測和同源建模分析表明，與二級分析結果基本一致（圖2-B）。亞細胞定位預測顯示，AgDREBA6b基因編碼的蛋白定位于細胞核。利用TMHMM 2.0 Server在線軟件預測了芹菜AgDREBA6b蛋白跨膜區，結果表明該蛋白無跨膜區，屬于非跨膜蛋白。SignalP-4.1預測結果顯示，該蛋白中存在信號肽的概率僅為0.45%，這表明芹菜AgDREBA6b為非分泌蛋白。NetPhos 3.1 Server預測存在58個磷酸化位點，其中38個是絲氨酸（Ser），17個是蘇氨酸（Thr），3個是酪氨酸（Tyr）（圖2-C）。

2.4 AgDREBA6b蛋白質的同源比對和進化分析

將AgDREBA6b基因編碼的氨基酸序列在NCBI上進行BLAST比對，結果表明AgDREBA6b與其他植物DREB轉錄因子具有較高的同源性（圖3）。它與天竺葵（Heracleum sosnowskyi，KAK1361703.1）和胡蘿卜（Daucus carota，AIX48026.1）編碼的同源蛋白質相似性達到最高，分別為89.44%和85.00%，推測它們可能具有相同的生物學功能。然而，與伊德斯種咖啡（Coffea eugenioides，XP_027178525.1）和楊梅（Morella rubra，KAB1199840.1）的相似性較低，分別為52.05%和53.35%。利用MEGA 5.0軟件將該基因編碼的氨基酸序列與NCBI數據庫中登錄的27種植物中的DREB序列構建neighbor-joining（NJ）系統進化樹（圖4）。結果表明，AgDREBA6b與天竺葵和胡蘿卜DREB蛋白聚為同一支，親緣關系較接近；與其他物種如木薯、橡膠樹、麻風樹、毛白楊和銀白楊的親緣關系較遠。

2.5 啟動子分析

順式調控序列是非編碼DNA的線性核苷酸區域，其定位會因基因活動而改變。啟動子區的順式作用元件可調控基因的轉錄活性，通過分析順式作用元件組成，可了解基因的功能及其表達潛力。通過Plant CARE分析芹菜AgDREBA6b啟動子區域 1 023 bp 序列，發現該區域含有13種順式作用元件，包括2個植物生長發育響應元件、6個植物激素響應元件、5個脅迫響應元件（表2）。植物生長發

育響應元件包含1個GATA-motif和1個GT1-motif共2個光響應元件。植物激素響應元件在3種元件中占了最大的比例，其中含有1個ABRE脫落酸響應元件，4個茉莉酸甲酯應答元件（2個CGTCA-motif和2個TGACG-motif），1個P-box赤霉素應答元件。脅迫響應元件含有2個抗氧化應答元件（ARE）、1個低溫應答元件（LTR）和2個干旱誘導元件（MBS）。總的來說，這些結果推測AgDREBA6b基因參與了芹菜對植物發育、激素及脅迫的響應。

2.6 芹菜AgDREBA6b基因在非生物脅迫下的表達水平

本研究基于轉錄組并利用qPCR技術對該基因在不同脅迫各時期下（0、1、6、24 h）的表達模式驗證分析。由圖5可知，高溫、低溫、高鹽和干旱脅迫均能誘導芹菜AgDREBA6b基因的表達。其中AgDREBA6b基因處于高溫脅迫時，表達量逐漸上升，在24 h脅迫處理時，表達量達到峰值，是0 h的15.89倍，高于同期其他脅迫下的表達量。低溫、高鹽及干旱脅迫下，AgDREBA6b基因表達量變化曲線相似，均表現為先上升，達到峰值后下降。低溫脅迫下，1 h處理時，表達量變化不明顯，到達6 h時，表達量出現峰值，約為0 h的24.39倍，高于任何時期及脅迫下的表達量，隨后表達量逐漸下降；AgDREBA6b基因對高鹽脅迫的響應相較遲鈍，1 h時，表達量有所上調，為0 h的2.47倍，在6 h時出現峰值，為0 h的6.45倍，24 h時表達量有所下降，與1 h時的表達量近乎相等；干旱脅迫下，1 h時，表達量幾乎沒有變化，6 h處理時表達量到達峰值，約為0 h的13.12倍，隨后表達量逐漸下降。

3 討論

植物在不良環境會進化出一系列自身內在的

分子機制，以響應環境脅迫。非生物脅迫是影響植物生長發育、質量和產量主要因素之一［24］。DREB轉錄因子能夠與DRE/CRT順式作用元件或具有DRE元件核心序列特異性結合，從而在植物遭遇極端溫度、干旱和高鹽等非生物脅迫反應中起著重要的調控作用［25］。本研究利用Li等已發布的芹菜基因組［26］，使用PCR擴增技術在津南實芹中克隆得到了1個AgDREBA6b基因，該基因包含高度保守的AP2/ERF DNA結合域，這與其他關于DREB轉錄因子家族研究結果［27］一致。蛋白的二級結構預測表明，無規則卷曲和α-螺旋是芹菜DREB蛋白二級機構的主要組成部分，這與譚萌萌等在細葉百合中研究［28］一致。經同源序列比對和系統進化樹分析，顯示該蛋白與天竺葵和胡蘿卜同源性相似性較高，且親緣關系較接近，暗示可能具有相似或者相近的生物學功能。對啟動子分析發現，AgDREBA6b含有13種順式作用元件，其中植物激素響應元件和脅迫響應元件比例較高，推測該基因在脅迫中起著重要轉錄調控功能。

近年來，隨著不同物種中DREB家族基因陸續被克隆和功能分析，在植物脅迫響應中的作用正逐漸被揭示。如過表達VuDREB2A-CA提高了豇豆在干旱和熱脅迫下的抗氧化能力、滲透調節能力和光合產量［29］。CiDREB6主要在高溫和干旱條件下被誘導，而在低溫和高鹽條件下則沒有被誘導［30］。在麻風樹中，冷、鹽和干旱脅迫會誘導JcDREB的表達，但ABA（脫落酸）無法誘導該基因表達［31］。藥用植物香鱗毛蕨在干旱、NaCl和高溫處理時，DfDREB基因表達均上調，但在低溫脅迫 1～6 h和24 h時無明顯變化［32］。茶樹CsDREB-A2能快速響應高溫和干旱脅迫，但對低溫脅迫的響應較為緩慢［33］。以上研究表明DREB基因可以提高植物對非生物脅迫的耐受性，但其響應的表達模式有所不同［34］。DREB通常能夠通過基因表達量上調來應對各種脅迫［24］。如苦蕎在經歷干旱脅迫 6～12 h后，FtDREB1和FtDREB2基因表達量幾小時內達到最高，之后開始下降，但均高于脅迫前［35］，二穗短柄草中DREB1G基因亦是如此［36］。在日本結縷草葉片中，ZjDREB1.4在低溫、高鹽和干旱脅迫下基因表達量均表現出上調，其中低溫脅迫中上調最為顯著［37］。李彤等的研究表明，CsDREB-A4b基因的相對表達量在高溫（38 ℃）脅迫處理后顯著高于脅迫處理前［38］。本研究中AgDREBA6b受到低溫、干旱和鹽脅迫誘導后基因表達先上調再下調，其中在6 h達到峰值，24 h表達下調。高溫脅迫下，AgDREBA6基因表達量隨著時間的增加呈現持續上升趨勢，但該脅迫處理并未出現拐點，值得進一步研究。值得注意的是，脅迫1 h時，AgDREBA6b在4種脅迫下基因表達量變化并不明顯，當處理時間增加至6 h，該基因被顯著誘導，可能由于芹菜植株在初期剛感應到脅迫信號，AgDREBA6b需進行與啟動子結合后才能被誘導表達。當脅迫在植株體內積累到一定時期，對基因轉錄量的誘導才得以體現。綜上所述，AgDREBA6b在干旱、鹽、低溫和高溫脅迫下基因表達量均高于0 h，這與前人研究一致，說明該基因積極參與芹菜非生物脅迫響應的分子信號途徑。然而，基因之間存在相互促進和制約關系，僅憑表達分析模式來確定單個基因的功能并不完全合理。因此，今后可通過在芹菜中過表達或抑制表達驗證其功能性。

4 結論

本研究從津南實芹中克隆獲得1個AgDREBA6b基因，并對AgDREBA6b基因進行生物信息學分析和基因的表達模式分析，發現AgDREBA6b在響應多種非生物脅迫時，基因表達量均出現不同程度的上調現象，從而推測AgDREBA6b是調控芹菜抗逆的關鍵轉錄因子。本研究結果為AgDREBA6b基因的后續功能驗證提供了參考，同時可為預測其他物種的功能性DREB基因提供一定的依據。

參考文獻：

［1］張 雨，蘇 旭，劉玉萍，等. 沙鞭PvDREB基因克隆與表達特異性分析［J］. 西北植物學報，2023，43（2）：202-210.

［2］Muthuramalingam P，Muthamil S，Shilpha J，et al. Molecular insights into abiotic stresses in mango［J］. Plants，2023，12（10）：1939.

［3］Zhu J K. Abiotic stress signaling and responses in plants［J］. Cell，2016，167（2）：313-324.

［4］Li T，Huang Y，Khadr A，et al. DcDREB1A，a DREB-binding transcription factor from Daucus carota，enhances drought tolerance in transgenic Arabidopsis thaliana and modulates lignin levels by regulating lignin-biosynthesis-related genes［J］. Environmental and Experimental Botany，2020，169：103896.

［5］Zhou Y X，Zhou W，Liu H，et al. Genome-wide analysis of the soybean DREB gene family：identification，genomic organization and expression profiles in response to drought stress［J］. Plant Breeding，2020，139（6）：1158-1167.

［6］Su J C，Song S L，Wang Y T，et al. Genome-wide identification and expression analysis of DREB family genes in cotton［J］. BMC Plant Biology，2023，23（1）：169.

［7］Hussain Q，Asim M，Zhang R，et al. Transcription factors interact with ABA through gene expression and signaling pathways to mitigate drought and salinity stress［J］. Biomolecules，2021，11（8）：1159.

［8］Hu X Q，Xu X M，Li C H. Ectopic expression of the LoERF017 transcription factor from Larix olgensis Henry enhances salt and osmotic-stress tolerance in Arabidopsis thaliana［J］. Plant Biotechnology Reports，2018，12（2）：93-104.

［9］Huang L Y，Wang Y X，Wang W S，et al. Characterization of transcription factor gene OsDRAP1 conferring drought tolerance in rice［J］. Frontiers in Plant Science，2018，9：94.

［10］陳金煥，夏新莉，尹偉倫. 植物DREB轉錄因子及其轉基因研究進展［J］. 分子植物育種，2007，5（增刊1）：29-35.

［11］Yang S U，Kim H，Kim R J，et al. AP2/DREB transcription factor RAP2.4 activates cuticular wax biosynthesis in Arabidopsis leaves under drought［J］. Frontiers in Plant Science，2020，11：895.

［12］Yang W Z，Xin Z W，Zhang Q Y，et al. The tree peony DREB transcription factor PrDREB2D regulates seed α-linolenic acid accumulation［J］. Plant Physiology，2024，195（1）：745-761.

［13］Mizoi J，Shinozaki K，Yamaguchi-Shinozaki K. AP2/ERF family transcription factors in plant abiotic stress responses［J］. Biochimica et Biophysica Acta，2012，1819（2）：86-96.

［14］Sakuma Y，Liu Q，Dubouzet J G，et al. DNA-binding specificity of the ERF/AP2 domain of Arabidopsis DREBs，transcription factors involved in dehydration-and cold-inducible gene expression［J］. Biochemical and Biophysical Research Communications，2002，290（3）：998-1009.

［15］沈兵琪，高曉宇，王大瑋，等. 蘋果DREB轉錄因子家族全基因組鑒定與分析［J］. 西北植物學報，2017，37（3）：460-469.

［16］孟凡立，李明月，洪志鵬，等. 轉TaDREB3a大豆品系KD1遺傳穩定性分析及抗旱性鑒定［J］. 東北農業大學學報，2021，52（8）：1-11.

［17］張 蕾，魏愛麗，張曉軍，等. 小麥苗期鹽脅迫下DREB基因的表達［J］. 西北植物學報，2022，42（9）：1477-1486.

［18］Ghorbani R，Zakipour Z，Alemzadeh A，et al. Genome-wide analysis of AP2/ERF transcription factors family in Brassica napus［J］. Physiology and Molecular Biology of Plants，2020，26（7）：1463-1476.

［19］Chai M N，Cheng H，Yan M K，et al. Identification and expression analysis of the DREB transcription factor family in pineapple ［Ananas comosus （L.） Merr.］［J］. PeerJ，2020，8：e9006.

［20］Raid R N. Celery diseases and their management［M］//Diseases of fruits and vegetables. Dordrecht：Kluwer Academic Publishers，2006：441-453.

［21］朱 鑫，沈火林. 芹菜幼苗耐熱性鑒定的主成分分析［J］. 中國蔬菜，2014（6）：28-33.

［22］楊青青，劉潔霞，徐志勝，等. 芹菜品種“津南實芹”AgICE1基因的克隆及其對非生物脅迫的響應［J］. 植物資源與環境學報，2019，28（1）：16-24.

［23］Vandesompele J，de Preter K，Pattyn F，et al. Accurate normalization of real-time quantitative RT-PCR data by geometric averaging of multiple internal control genes［J］. Genome Biology，2002，3（7）：RESEARCH0034.

［24］Zhang Y，Xia P G. The DREB transcription factor，a biomacromolecule，responds to abiotic stress by regulating the expression of stress-related genes［J］. International Journal of Biological Macromolecules，2023，243：125231.

［25］鄭佳秋，王薇薇，梅 燚，等. 辣椒DREB轉錄因子鑒定及其在澇害脅迫下的表達分析［J］. 江蘇農業學報，2023，39（1）：148-159.

［26］Li M Y，Feng K，Hou X L，et al. The genome sequence of celery （Apium graveolens L.），an important leaf vegetable crop rich in apigenin in the Apiaceae family［J］. Horticulture Research，2020，7：9.

［27］Aydn Akbudak M，Filiz E，Kontbay K. DREB2（dehydration-responsive element-binding protein 2） type transcription factor in sorghum （Sorghum bicolor）：genome-wide identification，characterization and expression profiles under cadmium and salt stresses［J］. 3 Biotech，2018，8（10）：426.

［28］譚萌萌，孫紹營，王靜文，等. 細葉百合DREB轉錄因子生物信息學及脅迫應答表達分析［J］. 西北林學院學報，2023，38（1）：95-101，198.

［29］Kumar S，Muthuvel J，Sadhukhan A，et al. Enhanced osmotic adjustment，antioxidant defense，and photosynthesis efficiency under drought and heat stress of transgenic cowpea overexpressing an engineered DREB transcription factor［J］. Plant Physiology and Biochemistry，2022，193：1-13.

［30］Niu X，Luo T L，Zhao H Y，et al. Identification of wheat DREB genes and functional characterization of TaDREB3 in response to abiotic stresses［J］. Gene，2020，740：144514.

［31］Tang M J，Liu X F，Deng H P，et al. Over-expression of JcDREB，a putative AP2/EREBP domain-containing transcription factor gene in woody biodiesel plant Jatropha curcas，enhances salt and freezing tolerance in transgenic Arabidopsis thaliana［J］. Plant Science，2011，181（6）：623-631.

［32］湯 珣，官亞琳，陳玲玲，等. 香鱗毛蕨DfDREB基因克隆與表達模式分析［J］. 西北植物學報，2020，40（7）：1105-1113.

［33］韓妙華，滕瑞敏，李 輝，等. 茶樹CsDREB-A2轉錄因子基因的克隆與非生物脅迫響應分析［J］. 核農學報，2020，34（12）：2647-2657.

［34］賈 鑫，曾 臻，陳 月，等. 月季“月月粉”RcDREB2A的克隆與表達分析［J］. 園藝學報，2022，49（9）：1945-1956.

［35］劉為遠，劉桂男，陳 雙，等. 苦蕎轉錄因子基因FtDREB1和FtDREB2的克隆及其對非生物脅迫的應答［J］. 基因組學與應用生物學，2018，37（5）：1985-1992.

［36］Elhassan E E，牛 欣，蘇亞麗，等. 二穗短柄草DREB1G基因表達模式分析和在擬南芥中的異源過量表達［J］. 西北農業學報，2019，28（1）：89-96.

［37］馮婉倩，李 京，鄒慧敏，等. 日本結縷草轉錄因子基因ZjDREB1.4的功能特征分析［J］. 西北植物學報，2019，39（5）：848-856.

［38］李 彤，嚴雅君，韓洪潤，等. 茶樹品種“安吉白茶”CsDREB-A4b基因的克隆及其對非生物脅迫的響應［J］. 植物資源與環境學報，2016，25（2）：1-9.