強脈沖光聯合重組牛堿性成纖維細胞生長因子對兔激素依賴性皮炎動物模型的作用機制研究

[摘要]目的：觀察兔激素依賴性皮炎動物模型應用強脈沖光（IPL）聯合重組牛堿性成纖維細胞生長因子凝膠（rb-bFGF）治療前后膠原纖維及基質金屬蛋白酶1（MMP1）的變化。方法：應用丙酸氯倍他索建立家兔糖皮質激素依賴性皮炎動物模型，每只兔背部隨機分為四組（即四個象限）：A組為對照組（無處理）；B組外涂rb-bFGF凝膠治療；C組IPL照射一次；D組兩者聯合應用。IPL照射一次結束后分別取不同時期各組皮膚組織觀察膠原纖維及MMP1表達量的變化。結果：家兔模型與正常家兔膠原纖維量減少及MMP1表達量的增加有差異。治療后各組與對照組進行比較，rb-bFGF凝膠組膠原纖維及MMP1表達量均無明顯差異，IPL照射組及聯合治療組膠原纖維含量增加及MMP1表達量減少有差異。結論：IPL及IPL聯合rb-bFGF凝膠治療方法均可調節MMP1的分泌，促使膠原纖維再生，但以rb-bFGF凝膠聯合IPL治療最為顯著，能更有效促進皮膚屏障的修復。

[關鍵詞]激素依賴性皮炎；強脈沖光；重組牛堿性成纖維細胞生長因子凝膠；膠原纖維；基質金屬蛋白酶

[中圖分類號]R758.22" " [文獻標志碼]A" " [文章編號]1008-6455（2025）04-0006-04

Mechanism Study on Intense Pulsed Light Combined with Recombinant Bovine Basic Fibroblast Growth Factor on Rabbit Model of Hormone-dependent Dermatitis

CHEN Xi1， ZHU Rui1， YANG Wenjia2， CHEN Hongduo2， XU Tianhua1

（ 1.Medical Cosmetic Center， Shenzhen Nanshan People’s Hospital amp; The Sixth Affiliated Hospital of Shenzhen University， Shenzhen 518052， Guangdong， China; 2.Department of Dermatology， the First Affiliated Hospital of China Medical University， Shenyang 110001， Liaoning， China ）

Abstract： Objective" To observe the changes of collagen fiber and MMP1 in rabbit model of corticosteroid-dependence dermatitis before and after treatment with IPL and rb-bFGF gel. Methods" The rabbit model of glucocorticoid-dependent dermatitis was established by clobetasol propionate. The back of each rabbit was randomly divided into four groups （four quadrants） ： Group A was the control group （no treatment）， Group B was treated with rb-bFGF gel. Group C was irradiated with IPL once， Group D combined application of both. The changes of collagen fiber and MMP1 expression in skin tissues of each group were observed at different periods after IPL irradiation. Results" There were differences between the model rabbits and the normal rabbits in the decrease of collagen fiber and the increase of MMP1 expression. After treatment， in contrast with the control group， the expression of collagen fibers and MMP1 in the rb-bFGF gel group showed no significant difference， the content of collagen fiber increased and the expression of MMP1 decreased significantly between the IPL irradiation group and the combined treatment group." Conclusion" These results indicate that both IPL and IPL combined with rb-bFGF can be regulated the secretion of MMP1 and promote the regeneration of collagen fiber， and rb-bFGF combined with IPL is the most efffective treatment， which can promote the repair of skin barrier more efficiently.

Key words： corticosteroid-dependence dermatitis; intense pulsed light; recombinant bovine basic fibroblast growth factor gel; collagenous fiber; matrix metalloproteinase

激素依賴性皮炎因長期不正當應用激素引起，目前國際上尚未統一其命名。國內許多學者將其單獨命名[1]，國外學者將其命名為激素導致的玫瑰痤瘡樣皮炎（Corticosteroid-induced rosacea-alike dermatitis，CIRD）[2]，或類固醇性玫瑰痤瘡、酒渣鼻（Steroid-rosacea）等[3-4]。其臨床表現主要有紅斑、丘疹、對外界刺激敏感、皮膚萎縮等，表現具多樣化。目前對該病的治療有多種方案，包括藥物治療[5]、物理療法[6]等。強脈沖光（IPL）、重組牛堿性成纖維細胞生長因子（rb-bFGF）已經比較廣泛的應用于激素依賴性皮炎的臨床治療中。本實驗通過建立兔激素依賴性皮炎模型，經IPL照射、rb-bFGF凝膠外用及兩者聯合治療，觀察治療前后膠原纖維及MMP1的變化，為IPL及rb-bFGF凝膠在臨床中治療激素依賴性皮炎提供理論依據。

1" 材料和方法

1.1 實驗材料：12只成年健康雄性新西蘭大白兔（沈陽寶利恒生物技術有限公司），0.02%丙酸氯倍他索乳膏（廣東華潤順峰藥業有限公司），重組牛堿性成纖維細生長因子凝膠5克/支（珠海億勝生物制藥有限公司，中國）。本實驗通過中國醫科大學倫理委員會審批。

1.2 方法：應用丙酸氯倍他索建立家兔糖皮質激素依賴性皮炎動物模型，12只白兔每只背部用動物剃毛器機械剃毛5 cm×8 cm大小范圍，充分暴露其皮膚，暴露部位皮膚每日1次外涂1/2指尖單位0.02%丙酸氯倍他索乳膏（恩膚霜）連續80 d，于兔背毛再次生長后繼續機械剃毛至不再生長。造模開始每5 d應用數碼相機拍照，觀察造模皮膚外觀變化至造模成功；模型建成后將每只兔背部分為四個象限，隨機分為A、B、C、D四組：A組為對照組（無處理）；B組外涂rh-bFGF凝膠治療，2次/天（早、晚各一次），每次1/2指尖單位；C組IPL照射一次（波長590 nm，脈寬4 ms，延遲40 ms，3個子脈沖，能量密度16 J/cm2）；D組兩者聯合應用。IPL照射一次結束后分別取第6小時、第24小時、第72小時、第7天、第14天、第21天各組皮膚組織，并觀察膠原纖維及MMP1表達量的變化。

1.3 統計學分析：本研究采用SPSS 21.0統計軟件進行數據分析，計量資料采用（xˉ±s）進行描述，方差分析進行比較。檢驗水準α=0.05，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2" 結果

2.1 各組膠原纖維表達結果：結果顯示，經rb-bFGF凝膠治療組與對照組膠原纖維表達量無明顯差異；IPL照射組較對照組膠原纖維量增多較明顯；IPL聯合rb-bFGF凝膠治療組較對照組膠原纖維量增加最為顯著（見圖1～2）。

2.2 激素依賴性皮炎動物模型治療后各組MMP1表達量結果觀察：經Western-Blot檢測MMP1表達量。模型皮膚中MMP1表達量較正常皮膚中表達量顯著增加。治療后，第21天經rb-bFGF凝膠治療組與對照組比較MMP1表達量無統計學意義；經IPL照射組與對照組比較MMP1表達量減少較明顯，于第1、2周內下降明顯，第3周下降趨勢減緩；IPL聯合rb-bFGF治療組與對照組比較MMP1減少顯著，呈遞減趨勢（見圖3～6）。

3" 討論

激素依賴性皮炎，主要是由于濫用激素或含有激素的護膚品引起皮膚干燥、脫屑、瘙癢、對外界刺激敏感，片狀紅斑、皮膚萎縮等臨床癥狀[7-8]，該病發病機制尚未明確，但國內外學者認為皮膚屏障功能損傷可能為主要發病機制[9]。

以往有學者應用香豬，豚鼠、小鼠等動物制作該疾病模型，考慮用于實驗的體表面積、經濟效益及操作便利等原因，本實驗選擇經濟、易操作的新西蘭白兔為實驗對象，因其體表面積適宜，易于觀察處理前后不同時間點皮膚變化，是研究激素依賴性皮炎理想動物模型[10]，且該動物模型在先前實驗已經成功制作[11]。

激素依賴性皮炎外用藥物治療有激素替代藥他克莫司、吡美莫司乳膏等[12-13]、系統用藥包括抗炎、抗過敏藥、中藥治療等[14]，目前效果有限，且有一定副作用。近些年隨著激光技術的不斷發展進步，有許多國內外臨床醫生應用IPL治療激素依賴性皮炎取得較好的療效[15]。有學者研究表明IPL對適當能量照射可抑制皮膚中MMP1的分泌[16]，MMP1主要裂解真皮膠原蛋白中Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白。在正常皮膚中MMP1的表達量很少，在一定的外界平衡的破壞或某些病理情況，MMP1表達量會顯著增加[17]，加速對膠原纖維的分解、破壞。本實驗研究發現在激素依賴性皮炎模型的真皮中MMP1的表達量較正常皮膚中顯著增多，而膠原纖維量也較正常皮膚顯著下降。通過IPL照射減少MMP1分泌，可促進膠原蛋白再生。另外，經IPL照射后，IPL通過波長較長部分作用于真皮中，通過光熱效應刺激真皮中成纖維細胞及基質，促進膠原纖維的合成、修復。IPL可能通過上述兩種途徑修復受損的皮膚屏障，對激素依賴性皮炎起到治療作用。單一應用IPL治療雖有一定的臨床療效，本實驗觀察到經IPL照射后MMP1表達量下降于2周內較為明顯，于第3周開始MMP1減少的趨勢出現衰減，所以一般于第3～4周再次照射比較理想。

bFGF在傷口愈合中起關鍵作用，bFGF可作用于真皮中的基質，促進成纖維細胞增殖，而膠原纖維是創面愈合中的主要成分，bFGF經常被應用于創傷愈合治療中[18-19]，也有國內外一些學者將bFGF應用燒、燙傷治療中，取得良好效果[20]。近些年有許多臨床醫生及學者將bFGF應用于激素依賴性皮炎的治療，以及敏感性皮膚[21]、各種物理治療損傷后的輔助治療中[22]。本實驗結果顯示應用rb-bFGF凝膠治療后膠原纖維及MMP1表達量與對照組無明顯差異，也說明rb-bFGF外涂在皮膚中滲透作用有限，單獨應用治療效果有限。

聯合治療是皮膚科中一種合理且較徹底的治療方案[23]，中國學者祝霞應用IPL聯合rh-EGF凝膠治療激素依賴性皮炎取得較好的臨床療效[24]，馮琴等學者將IPL聯合rb-bFGF治療面部毛細血管擴張，臨床效果很理想[25]。rhEGF及rb-bFGF都具有修復皮膚屏障的功能但rb-bFGF能促進真皮中膠原的再生，對皮膚屏障的修復具有更強的作用。本實驗發現IPL聯合rb-bFGF凝膠對皮膚中MMP1抑制作用及對真皮中膠原纖維再生促進效果最為顯著，通過抑制MMP1的表達，可以抑制對膠原的破壞，利于膠原纖維再生修復。通過真皮中膠原纖維再生修復，還可以加速表皮的修復，減少經皮膚的水分流失，進一步促進皮膚屏障的修復，減少炎性細胞的侵襲，抑制有害菌群的入侵，從而使激素依賴性皮炎得到有效的改善。另外對于臨床患者，經IPL照射后要有3～4周時間間隔進行下一次的治療，在此期間給予外用rb-bFGF凝膠不僅在治療效果上得以加強，還可以緩解期間患者病部的不適、內心的焦慮。

本實驗為IPL、rb-bFGF凝膠對激素依賴性皮炎的治療提供了理論依據，但由于實驗時間有限，未能繼續探討更多因子的作用機制，希望以后能進行更完善的研究。

[參考文獻]

[1]趙辨.芻議“激素依賴性皮炎”[J].臨床皮膚科雜志，2013，42（11）："708-709.

[2]Rosso J Q. Management of papulopustular rosacea and perioral dermatitis with emphasis on iatrogenic causation or exacerbation of inflammatory facial dermatoses： use of doxycycline-modified release 40mg capsule once daily in combination with properly selected skin care as an effective therapeutic approach[J]. J Clin Aesthet Dermatol， 2011，4（8）：20-30.

[3]Hameed A F. Steroid dermatitis resembling rosacea： a clinical evaluation of 75 patients[J]. ISRN Dermatol， 2013，2013：491376.

[4]Chen A Y， Zirwas M J. Steroid-induced rosacealike dermatitis： case report and review of the literature[J]. Cutis， 2009，83（4）：198-204.

[5] Chu" C Y. An open-label pilot study to evaluate the safety and efficacy" of topically applied pimecrolimus cream for the treatment of steroid-induced rosacea-like eruption[J]. J Eur Acad Dermatol Venereol， 2007， 21（4）： 484-90.

[6]中國醫師協會皮膚科分會美容專業組.激素依賴性皮炎診治指南[J].臨床皮膚科雜志，2009，38（8）：549-550.

[7]Sharma R， Abrol S， Wani M. Misuse of topical corticosteroids on facial skin. A study of 200 patients[J]. J Dermatol Case Rep， 2017，11（1）：5-8.

[8]詹煒，唐先發，楊森.激素依賴性皮炎研究進展[J].中國中西醫結合皮膚性病學雜志，2017，16（4）：370-372.

[9]Schoepe S， Sch?cke H， May E， Asadullah K. Glucocorticoid therapy-induced skin atrophy[J]. Exp Dermatol， 2006，15（6）：406-420.

[10]Schivo M， Aksenov A A， Pasamontes A， et al. A rabbit model for assessment of volatile metabolite changes observed from skin： a pressure ulcer case study[J]. J Breath Res， 2017，11（1）：016007.

[11]朱睿，陳茜，徐瑞雪，等.應用丙酸氯倍他索乳膏建立兔激素依賴性皮炎模型及其皮膚病理變化觀察[J].中國美容醫學，2020，29（11）：101-104.

[12]Lee D H， Li K， Suh D H. Pimecrolimus 1% cream for the treatment of steroid-induced rosacea： an 8-week split-face clinical trial[J]. Br J Dermatol， 2008，158（5）：1069-1076.

[13]李賢光，李彩霞，朱薇，等.他克莫司軟膏聯合創?？抵委熂に匾蕾囆云ぱ庄熜в^察[J].皮膚病與性病，2021，43（4）：538-540.

[14]肖茜.中藥聯合依巴斯汀治療面部糖皮質激素依賴性皮炎[J].中國美容醫學，2018，27（2）：130-132

[15]田雅蘭，陳婷婷，錢江.強脈沖光聯合舒敏保濕霜治療面部糖皮質激素依賴性皮炎療效分析[J].中國美容醫學，2021，30（6）：86-89.

[16]Gu W， Liu W， Yang X， et al. Effects of intense pulsed light and ultraviolet A on metalloproteinases and extracellular matrix expression in human skin[J]. Photomed Laser Surg， 2011，29（2）：97-103.

[17]王醒荷，羅賽，徐渴鑫，等.紫外線對皮膚基質金屬蛋白酶及相關通路影響的研究進展[J].中國美容整形外科雜志，2018，29（5）：316-318.

[18]Yang L， Zhang D， Wu H， et al. Basic fibroblast growth factor influences epidermal homeostasis of living skin equivalents through affecting fibroblast phenotypes and functions[J]. Skin Pharmacol Physiol， 2018，31（5）：229-237.

[19]Guo Y， Xu B， Wang Y， et al. Dramatic promotion of wound healing using a recombinant human-like collagen and bFGF cross-linked hydrogel by transglutaminase[J]. J Biomater Sci Polym Ed， 2019，30（17）：1591-1603.

[20]Zhan D C， Shen Y S， Zhao Y R， et al. Efficacy and safety of basic fibroblast growth factor in the treatment of burns： Protocol for a systematic review and meta-analysis of randomized controlled trials[J]. Medicine （Baltimore）， 2019，98（14）：e15102.

[21]齊顯龍，楊憲偉.敏感皮膚的整合治療[J].中國美容醫學，2018，27（10）：21-23.

[22]劉韻，展望，游文健.外用bFGF凝膠對CO2點陣激光治療痤瘡瘢痕療效的影響[J].中國美容醫學，2018，27（4）：54-57.

[23]Schilling L M， Halvorson C R， Weiss R A， et al. Safety of combination laser or intense pulsed light therapies and doxycycline for the treatment of rosacea[J]. Dermatol Surg， 2019，45（11）：1401-1405.

[24]祝霞，孫麗玲.強脈沖光聯合重組人表皮生長因子凝膠治療面部激素依賴性皮炎的療效觀察[J]中國現代醫學雜志，2017，27（2）：91-93.

[25]馮琴，梁瓊，魏林林，等.重組牛堿性成纖維細胞生長因子聯合強脈沖光對糖皮質激素依賴性皮炎患者皮膚屏障功能的影響[J].中國美容醫學，2022，31（10）：59-62

[收稿日期]2022-09-21

本文引用格式：陳茜，朱睿，楊文佳，等.強脈沖光聯合重組牛堿性成纖維細胞生長因子對兔激素依賴性皮炎動物模型的作用機制研究[J].中國美容醫學，2025，34（4）：6-9.