TGFBR1在肝癌中的表達(dá)和對肝癌細(xì)胞活性的影響

中圖分類號(hào)：R735.7 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1672-1098（2025）02-0100-09

引文格式：，.TGFBR1在肝癌中的表達(dá)和對肝癌細(xì)胞活性的影響[J].理工大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2025，45（2） ：100-108.

DOI：10.3969/j. issn.1672-1098.2025.02.013

Expression of TGFBR1 in Hepatocellular Carcinoma and Its Impact on Tumor Cell Activity LIU Xinkuang1 ，HUANG Xiaolong

（1.TheFirstHospitalofAnuiUniversityfSienceandTechnology，HuainanAnhui220o，China;2.SchoolofMedicine，Ahi Universityof Science and Technology，Huainan Anhui 232OO1，China）

Abstract： Objective To examine TGFBR1 expression in hepatocellular carcinoma （HCC）and its clinicopathological correlations，as well as validate TGF- β pathway effects on proliferation，migration and invasion.Methods TGFBR1 expression in 25 HCC tisues，from the patients who underwent hepatectomy at the first Anhui University of Technologyafiliated hospital，was assessed via immunohistochemistry.Statistical analyses linked expressionlevels to clinical features. EdU，Transwell，and scratch assays evaluated TGF- β pathway effects. Results TGFBR1 was higher in HCC than that in normal liver tissues （ Plt;0.05） ），correlating with TNM stage，AFP，ALT，and AST （20 （Plt;0.05）.TGF-β activation enhanced HCC cell proliferation，migration and invasion. Conclusion TGFBR1 is associated with HCC progression and liver dysfunction，and therefore the research may ofer therapeutic potential for patients with liver cancer.

KeyWords：Transforming growth factorbeta receptorsI（TGFBR1）;hepatocelularcarcinoma;Immunohistochemistry;prolifera tion;migration

肝細(xì)胞癌（Hepatocellular carcinoma，HCC）是全球癌癥死亡的主要原因之一[1-2]。口服索拉非尼是晚期無法切除HCC患者的標(biāo)準(zhǔn)一線治療藥物[3]。盡管索拉非尼治療后部分HCC患者的生存獲益顯著，但患者多由于獲得耐藥性而出現(xiàn)疾病進(jìn)展[4]。轉(zhuǎn)化生長因子 -β （ Transforming growth fac-tor beta， TGF-β ）過度表達(dá)在多種腫瘤類型中，是一種廣泛且與預(yù)后不良相關(guān)的分子標(biāo)志物 [5-6]TGF- ?β 可以作為預(yù)測反應(yīng)性的生物標(biāo)志物，也可以作為提高免疫療法活性的治療靶點(diǎn)[7]

人體內(nèi)有30多種 TGF- ?β 超家族配體[8]，根據(jù)序列相似性和功能可分為多個(gè)亞家族；主要亞群包括 TGF- 、激活素、抑制素、骨形態(tài)發(fā)生蛋白和生長分化因子[9]。由于在哺乳動(dòng)物中表達(dá)的3種TGF- 亞型中， TGF-β1 是最豐富的，因此得到了充分的研究[10]?；罨?TGF-β 配體以自分泌和旁分泌依賴的方式啟動(dòng)下游信號(hào)組件[1]。對于典型的 TGF- β 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，激活的 TGF-β 配體與由TGF-βI型和II型受體組成的四聚體受體復(fù)合物結(jié)合[12]。TGF-βRII 促進(jìn) TGF-βRI 的磷酸化，通過Smad2/Smad3的磷酸化傳遞信號(hào)，引發(fā)級(jí)聯(lián)反應(yīng)[13]。 TGF-β 信號(hào)通路在良性細(xì)胞中可抑制細(xì)胞生長，但在癌細(xì)胞中可促進(jìn)癌變生物學(xué)行為；這種現(xiàn)象被稱為 TGF-β 悖論。反常的 TGF-β 功能依賴于腫瘤細(xì)胞和微環(huán)境，并具有特定的分子機(jī)制[14]。 TGF-β 信號(hào)通路在肝癌中起雙重作用。在腫瘤發(fā)展的早期階段， TGF-β 途徑被抑制，導(dǎo)致活性降低。TGF- β 通路的早期衰減主要是由于抑制因子如SMAD7、SKI樣因子和 TGF-β 誘導(dǎo)因子的過度表達(dá)，這些因子作為負(fù)反饋調(diào)節(jié)因子[15]。此外，TGF- ?β 信號(hào)通路誘導(dǎo)DNA損傷基因家族成員Gadd45的表達(dá)，Gadd45參與細(xì)胞周期阻滯和凋亡[16]。在腫瘤發(fā)展的后期階段， TGF-β 通路通過促進(jìn)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化來促進(jìn)腫瘤的生長[17]。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（Epithelial-mesenchymal transition，EMT）是上皮細(xì)胞失去細(xì)胞間粘附并獲得間充質(zhì)樣特征，使上皮細(xì)胞遷移和侵襲的過程。TGF- β 通過增加間充質(zhì)標(biāo)志物如波形蛋白和減少上皮標(biāo)志物如 E- 鈣粘蛋白來促進(jìn) EMT[18]。由于 TGF-β 途徑的高活性，晚期肝癌表現(xiàn)出腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲增強(qiáng)[19]。綜上所述， TGF-β 通路通過其對早期腫瘤發(fā)展、EMT、與其他信號(hào)通路的相互作用以及對腫瘤微環(huán)境的調(diào)節(jié)而促進(jìn)肝癌的腫瘤侵襲

目前的研究進(jìn)展指出TGF- ?β 通路可以對肝癌的進(jìn)展產(chǎn)生一定程度的影響，具體表現(xiàn)為參與肝癌細(xì)胞生長、分化、凋亡和免疫等反應(yīng)。本文將針對TGFBR1在肝癌中的表達(dá)和對肝癌細(xì)胞活性的影響開展研究，研究肝細(xì)胞肝癌組織中TGFBR1的表達(dá)情況，及其與肝細(xì)胞肝癌臨床病理特征之間的關(guān)系，初步探討TGFBR1與肝癌的關(guān)系；進(jìn)一步在肝癌細(xì)胞中驗(yàn)證TGF- ?β 途徑對肝癌的生物學(xué)效應(yīng)包括增值、遷移和侵襲的影響，以此為肝癌的靶向治療提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

資料與方法

1.1 研究對象

本研究以2019年至2023年于行肝癌切除術(shù)的25例患者和行肝囊腫切除術(shù)的24例患者作為研究對象。所有患者均術(shù)后對手術(shù)標(biāo)本進(jìn)行病理活檢，并進(jìn)行TNM分期，確保獲得完整的臨床病理數(shù)據(jù)。納入與排除標(biāo)準(zhǔn)如下，納入標(biāo)準(zhǔn)： ① 病理活檢確診為肝癌； ② 圍手術(shù)期內(nèi)未出現(xiàn)死亡事件； ③ 所有病例手術(shù)前均未接受過任何放射及化學(xué)治療。排除標(biāo)準(zhǔn)： ① 臨床資料不完整； ② 合并其他惡性腫瘤； ③ 合并其他嚴(yán)重疾病。

1.2 免疫組織化學(xué)法染色及評(píng)分

常溫下解凍組織標(biāo)本，經(jīng)甲醛固定，脫水、石蠟包埋，切片，厚度為 5μm ，依次按步驟進(jìn)行烤片、脫蠟、抗原修復(fù)、內(nèi)源性過氧化物酶滅活和封閉，孵育抗TGFBRI單克隆抗體（ 1：200 稀釋，TGFBR1 An-tibody－AF5347江蘇親科生物研究中心有限公司）， 4^°C 冰箱封閉過夜，TBST浸洗切片4次（ 5min/ 次），孵育二抗（HRP 標(biāo)記的山羊抗兔 IgG 貨號(hào)GB23303，武漢賽維爾生物科技有限公司），37^°C 恒溫箱孵育 30min ，TBST浸洗切片4次（5min/次），DAB顯色，再次脫水，脫酒精，最后封片、晾干。

染色切片將使用兩種不同的技術(shù)進(jìn)行定性和定量分析。在光學(xué)顯微鏡下，從10個(gè)野外隨機(jī)選擇1個(gè)切片，棕黃色顆粒被認(rèn)為是陽性染色。結(jié)果根據(jù)染色細(xì)胞的百分比和細(xì)胞質(zhì)染色的程度進(jìn)行評(píng)分，并由2名病理學(xué)家獨(dú)立評(píng)估每個(gè)切片。接著將染色的切片在掃描儀下進(jìn)行掃描，利用SlideViewer軟件對掃描后的病理切片隨機(jī)采集6塊200倍鏡圖片，并用imageJ軟件對采集的6塊圖片進(jìn)行陽性區(qū)域量化后計(jì)算出隨機(jī)采集圖片的平均染色強(qiáng)度和平均陽性面積占比。最終將定性數(shù)據(jù)和定量數(shù)據(jù)用于統(tǒng)計(jì)分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS16.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。對于計(jì)量資料，使用均數(shù) ± 標(biāo)準(zhǔn)差表示，計(jì)數(shù)資料用百分?jǐn)?shù) （%） 表示；以Fisher確切法分析TGFBRI與病理特征的關(guān)系， Plt;0.05 則認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.4 EDU增殖實(shí)驗(yàn)

將 1×10⁵ 個(gè)細(xì)胞均勻的種在24孔板里，放在 37^°C 恒溫培養(yǎng)箱中 24h 后丟棄培養(yǎng)基，加入 500μL 含有EDU（ 10μM ）的培養(yǎng)液。繼續(xù)培養(yǎng)2h后用 4% 多聚甲醛固定 15min ，然后用 0.3% Triton通透

10min 。再按照試劑說明書加入配制好的 500μL 的click反應(yīng)液。用 3% BSA的PBS洗3次每次 3～ 5min ，用DAPI染核 10min 。最后在倒置熒光顯微鏡下觀察紅色熒光的比例以衡量細(xì)胞的增殖活力。

1.5 Transwell遷移實(shí)驗(yàn)

通過孔徑為 8μm 的Transwell室進(jìn)行細(xì)胞侵襲。首先，將無血清培養(yǎng)基（ 200μL 中的 5×10⁴ 細(xì)胞接種到Transwell的上室。然后，下室補(bǔ)充有500μL 含有 10% 胎牛血清的培養(yǎng)基。 37^°C 培養(yǎng)24h 和 48h 后，用棉簽去除膜上側(cè)未遷移的細(xì)胞，遷移的細(xì)胞用 90% 乙醇固定 30min 。最后，將細(xì)胞用結(jié)晶紫溶液染色并在顯微鏡下觀察并拍照。計(jì)算3個(gè)隨機(jī)視野中的細(xì)胞數(shù)以評(píng)估跨膜遷移。

1.6 劃痕愈合實(shí)驗(yàn)

以 5×10⁵ 個(gè)細(xì)胞/孔的密度接種細(xì)胞于12孔板中，待細(xì)胞長到鋪滿細(xì)胞培養(yǎng)瓶底壁時(shí)，用 20μL 槍頭在每孔中以豎直方向劃3條痕，吸棄上清液，更換無藥無血清培養(yǎng)基，然后在倒置顯微鏡下拍攝0、24、48h的圖片。最后評(píng)估細(xì)胞的遷移能力。

2 結(jié)果與分析

2.1 肝癌組織中TGFBR1的表達(dá)

TGFBR1在肝癌組織和正常肝組織中的表達(dá)情況如圖1所示，在肝癌組織中TGFBR1高表達(dá)（見圖1a），在正常肝細(xì)胞中TGFBR1低表達(dá)（見圖1b）;利用imageJ量化染色強(qiáng)度并計(jì)算出隨機(jī)視野下的平均染色強(qiáng)度，TGFBR1在25例肝癌組織中的平均陽性面積明顯高于24例正常肝組織的平均陽性面積（見圖1c），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ Plt; 0.05）；經(jīng)過評(píng)分得出，在肝癌組織中TGFBR1表達(dá)陽性例數(shù)為18例、陰性例數(shù)為7例，陽性率為72% ；在正常肝組織中TGFBR1表達(dá)陽性例數(shù)為3例、陰性例數(shù)為21例，陽性率為 12.5% （見圖1d）。

2.2TGFBR1表達(dá)水平與臨床特征的關(guān)系

如表1所示，TNM分期為 I～I(xiàn)I 期的肝癌中TGFBR1陽性率為 50% ，低于 I～N 期的 92.31% ；有腫瘤轉(zhuǎn)移（淋巴結(jié)、腹膜、腹水和肝臟）的肝癌組織中TGFBR1均表達(dá)為陽性，TGFBR1的表達(dá)與肝癌患者的TNM分期具有相關(guān)性，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ Plt;0. 05） ）。并且在甲胎蛋白（AlphaFetopro-tein，AFP）超過異常值的患者中TGFBR1的陽性表達(dá)率為 91.67% ，在甲胎蛋白正常的患者中TGF-BR1的陽性表達(dá)率為 53.85% ，并且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ Plt;0.05） 。而其他因素如性別、年齡、腫瘤大小、腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、Child-puge分級(jí)、WHO分級(jí)，與TGFBR1的表達(dá)未見明顯相關(guān)（ Pgt;0.05） °

2.3TGFBR1表達(dá)水平與生化指標(biāo)的關(guān)系

如表2所示，在統(tǒng)計(jì)25位肝癌患者的血清學(xué)生化指標(biāo)，并將生化指標(biāo)與其對應(yīng)的病理切片染色結(jié)果進(jìn)行卡方檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）超過正常值的患者TGFBR1的陽性表達(dá)率為 91.67% ，而在ALT和AST在正常值范圍內(nèi)的患者TGFBR1的陽性表達(dá)率為 53.85% ，并且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ Plt;0.05） 。而其他指標(biāo)如GGT、TBIL、ALB、 Pa 、WBC、PLT、RDW-SD、RDW-CV與TGFBR1的表達(dá)未見明顯相關(guān)（ ?Pgt;0.05 ）

2.4 TGF- ?_β 通路激活增強(qiáng)肝癌細(xì)胞的活性

細(xì)胞水平實(shí)驗(yàn)包括EDU增殖實(shí)驗(yàn)、Transwell實(shí)驗(yàn)和劃痕愈合實(shí)驗(yàn)在分組上采取同樣的分組方法，分別為第一組親代細(xì)胞 、第二組Hep^G2+ 索拉非尼、第三組 HepG2+ 索拉非尼 +TGF- 、第四組 Hep ⁶²⁺ 索拉非尼 SB431542。其中 TGF- _?β1 為TGFBR1配體，用于激活 TGF-β 通路；SB431542為 TGFBR1受體阻斷劑，用于阻斷TGF- ?β 通路

通過EDU增殖實(shí)驗(yàn)評(píng)估了各組肝癌細(xì)胞的增值情況，如圖2（a）所示，在肝癌細(xì)胞HepG2中加入索拉非尼可見增值的細(xì)胞大幅度減少，而在加入TGF- 后被抑制的增值呈現(xiàn)了恢復(fù)的趨勢，再繼續(xù)加入TGF- 受體抑制劑SB431542后發(fā)現(xiàn)恢復(fù)的增值再次被抑制。

接下來通過Transwell實(shí)驗(yàn)評(píng)估了各組肝癌細(xì)胞的侵襲情況，如圖2（b）所示，在肝癌細(xì)胞中加入索拉非尼可見肝癌細(xì)胞穿過小孔的數(shù)量大幅度減少，而在加入TGF- 后穿過小孔的細(xì)胞數(shù)量呈現(xiàn)了恢復(fù)的趨勢，再繼續(xù)加入 TGF-β1 受體抑制劑SB431542后發(fā)現(xiàn)穿孔的細(xì)胞數(shù)量再次減少。最后，通過劃痕愈合實(shí)驗(yàn)評(píng)估了各組肝癌細(xì)胞的遷移情況，如圖2（c）＼～圖2（d）所示，在肝癌細(xì)胞中加入索拉非尼可見傷痕愈合率明顯減少，而在加入TGF- 后傷痕愈合率增大，再繼續(xù)加入 TGF-β1 受體抑制劑SB431542后發(fā)現(xiàn)愈合再次被抑制，并且在加入TGF-β1后增高的傷痕愈合率甚至達(dá)到未加人索拉非尼時(shí)的傷痕愈合率。

3討論

目前， TGF-β 信號(hào)通路已經(jīng)成為癌癥治療的一個(gè)新興研究靶點(diǎn)，也與癌癥免疫治療的新領(lǐng)域有關(guān)[20]。 TGF-β 的信號(hào)失調(diào)明確促進(jìn)了肝癌的炎癥和上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化，但具體機(jī)制尚不清楚TGF- 不僅可以引發(fā)肝癌細(xì)胞的EMT，還可以通過免疫抑制形成有利于腫瘤發(fā)展的免疫微環(huán)境[21]。當(dāng)前在肝癌治療中遇到的諸多難題，而TGF- ?β 作為重要的細(xì)胞因子參與到肝病進(jìn)展的所有階段，從最初的肝損傷直到肝細(xì)胞癌的發(fā)生[22] 。

為了證實(shí)TGFBR1和肝癌的病理特征具有相關(guān)性，本文收集肝癌組織和正常肝組織的病理切片，經(jīng)過對TGFBR1免疫組織化學(xué)染色發(fā)現(xiàn)，在組織水平上，與正常肝組織相比較肝癌組織中TGF-BR1的表達(dá)量明顯較多，說明TGFBR1與肝臟的癌變可能存在一定的聯(lián)系。TGFBR1作為TGF- ?β 通路的I型受體蛋白，在發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)上有具有重要意義，因此 TGF-β 通路的激活也可能是肝臟癌變病理過程的重要因素之一。接著在對肝癌患者的臨床特征與TGFBR1表達(dá)情況對比分析發(fā)現(xiàn)TGFBR1的表達(dá)與肝癌患者的TNM分期和AFP具有相關(guān)性，AFP為診斷原發(fā)性肝癌的特異性指標(biāo)，約有 70% 的肝癌患者血清中甲胎蛋白會(huì)升高，因此AFP就成了診斷原發(fā)性肝癌的一個(gè)特異性臨床指標(biāo)。因此，TGFBR1的表達(dá)可以促進(jìn)肝癌的分期，并且可能作為一種診斷肝癌的特異性指標(biāo)。在對肝癌患者血清學(xué)指標(biāo)中分析發(fā)現(xiàn)TGFBR1的表達(dá)與肝癌患者的ALT、AST具有相關(guān)性。ALT與

AST主要分布在肝細(xì)胞內(nèi)，如果肝臟受損或損壞，肝細(xì)胞中的轉(zhuǎn)氨酶便進(jìn)入血液，血液中ALT和AST水平升高，提示肝臟病變信號(hào)。這提示TGF-BR1的表達(dá)與肝臟的損傷具有一定的相關(guān)性。

腫瘤細(xì)胞的增殖、浸潤和轉(zhuǎn)移等惡性生物學(xué)行為是造成患者死亡的主要原因，為了證實(shí)TGFBR1和肝癌增殖、浸潤和轉(zhuǎn)移具有相關(guān)性，在細(xì)胞水平上利用EDU增殖實(shí)驗(yàn)、Transwell實(shí)驗(yàn)和劃痕愈合實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證TGF- β 途徑對肝癌的生物學(xué)效應(yīng)的影響，結(jié)果表明隨著TGF- 通路的激活，被化療藥物抑制的肝癌細(xì)胞恢復(fù)了一定的增殖能力、遷移能力和侵襲能力。在量化數(shù)據(jù)后發(fā)現(xiàn)TGF- 通路的激活使得細(xì)胞的遷移能力恢復(fù)到未加入索拉非尼時(shí)的細(xì)胞遷移能力，在加入TGFBR1阻斷劑后TGF- 通路被部分阻斷，這時(shí)化療藥物對腫瘤的抑制作用又得到了一定的恢復(fù)，可做出以下推斷： TGF-β 通路的激活可以降低化療藥物對肝癌細(xì)胞的殺傷力，而阻斷TGF- 通路可以恢復(fù)化療藥物對肝癌細(xì)胞

的殺傷力。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)TGFBR1與肝臟的癌變具有正相關(guān)，TGFBR1的表達(dá)和肝癌的分期有相關(guān)性，并且可能作為一種診斷肝癌的特異性指標(biāo)。TGFBR1的表達(dá)與肝臟的損傷具有正相關(guān)。TGF- β_β 通路的激活可以降低肝癌細(xì)胞的化療敏感性，而阻斷 TGF-β 通路可以恢復(fù)肝癌細(xì)胞的化療敏感性。此發(fā)現(xiàn)為肝癌的治療方向提供了新的線索和證據(jù)，并為開發(fā)針對TGF- ?β 信號(hào)通路的肝癌治療策略提供了新的思路。

4結(jié)論與展望

本研究顯示，TGFBR1在肝癌中高表達(dá)，并且與疾病的進(jìn)展存在相關(guān)性。這表明肝臟組織可能通過TGF- 通路幫助演變成腫瘤并影響腫瘤的進(jìn)展，在細(xì)胞水平上， TGF-β 通路的激活和阻斷都產(chǎn)生了明顯的生物學(xué)效應(yīng)，因此如果藥物阻斷TGF- β 通路可能在一定程度上制約肝癌的增殖、遷移和侵襲等效應(yīng)。本研究通過TGFBR1在肝細(xì)胞肝癌中的表達(dá)情況與臨床病理特征之間的關(guān)系初步探討TGFBR1與肝癌的關(guān)系；進(jìn)一步在肝癌細(xì)胞中證實(shí)TGF- ?β 途徑的激活和抑制對肝癌確切的生物學(xué)效應(yīng)具有明顯影響，因此猜想對 TGF-β 通路的干預(yù)會(huì)導(dǎo)致肝癌發(fā)生發(fā)展的變化，因此本研究結(jié)果為肝癌的治療方案提供新的參考。

本研究的不足之處有以下幾點(diǎn)：在組織水平上本研究樣本量較小，所得的結(jié)果可能存在偏差，還需進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量以證實(shí)上述結(jié)果。而細(xì)胞實(shí)驗(yàn)則只驗(yàn)證了TGF- ?β 通路的激活可以降低肝癌細(xì)胞對化療藥物的敏感性，而阻斷TGF- β 通路可以恢復(fù)肝癌細(xì)胞對化療藥物的敏感性。因此在細(xì)胞水平上則需要設(shè)計(jì)更詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證TGF- ?β 通路影響肝癌進(jìn)展的生物學(xué)效應(yīng)和分子機(jī)制，最后小鼠荷瘤實(shí)驗(yàn)可以在不傷害人體的情況下驗(yàn)證TGF- ?β 通路如何影響肝癌在體內(nèi)的發(fā)生發(fā)展，因此可以設(shè)計(jì)合理的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證。TGF- ?β 在促進(jìn)肝癌進(jìn)展中的作用機(jī)制非常復(fù)雜，并涉及到各種生物學(xué)效應(yīng)和分子機(jī)制。需要進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)來探索其分子水平的作用機(jī)理來推動(dòng)臨床治療肝癌的新策略。進(jìn)一步的研究有望揭示TGF- 在肝癌發(fā)生發(fā)展中的分子機(jī)制，并為肝癌治療提供更高效的治療方法。

參考文獻(xiàn)：

[1]DYHL-POLK A，MIKKELSEN MK，LADEKARL M，et al. Clinical Trials of Immune Checkpoint Inhibitors in Hepatocellular Carcinoma[J]. Journal of Clinical Medicine，2021， 10（12） ：2662.

[2]SHRESTHA R，PRITHVIRAJ P，BRIDLE KR，et al. Combined Inhibition of TGF-β1-Induced EMT and PD-L1 Silencing Re-Sensitizes Hepatocellular Carcinoma to Sorafenib Treatment[J]. Journal of Clinical Medicine，2021， 10（9） ：1889.

[3]DAZERT E，COLOMBI M，BOLDANOVA T，et al. Quantitative proteomics and phosphoproteomics on serial tumor biopsies from a sorafenib-treated HCC patient[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，2016，113（5） ：1 381-1 386.

[4]LU LC，LEE YH，CHANG CJ，et al. Increased Expression of Programmed Death-Ligand 1 in Infiltrating Immune Cells in Hepatocellular Carcinoma Tissues after Sorafenib Treatment[J]. Liver Cancer，2019，8（2） ：110-120.

[5]LAN Y，MOUSTAFA M，KNOLL M，et al. Simultaneous targeting ofTGF-β/PD-L1 synergizes with radiotherapy by reprogramming the tumor microenvironment to overcome immune evasion. Cancer Cell，2021，39（10） ： 1 388-1 403.

[6]GOUGH NR，XIANG X，MISHRA L. TGF- ?β Signaling in Liver，Pancreas，and Gastrointestinal Diseases and Cancer[J]. Gastroenterology，2021，161（2） ：434-452.

[7]GIRAULO C，TURIELLO R， ORLANDO L，et al. The CD73 is induced by TGF-β1 triggered by nutrient deprivation and highly expressed in dedifferentiated human melanoma[J]. Biomedicine amp; Pharmacotherapy，2023， 165 ：115225.

[8］黃娜，周喜漢.TGF-β/Smad 信號(hào)通路在肝硬化中的 作用及其機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生，2024， 62（3） ：123-126.

[9]MARTINEZ-HACKERT E，SUNDAN A，HOLIEN T. Receptor binding competition： A paradigm for regulating TGF -β family action[J].Cytokine amp; Growth Factor Reviews，2021，57：39-54.

[10]KATZ LH，LIKHTER M，JOGUNOORI W，et al. TGFβ signaling in liver and gastrointestinal cancers[J]. Cancer Letters，2016，379（2） ：166-172.

[11］艾郁蔥，閆光志.生長分化因子15沉默抑制人肝癌 HepG2增殖及遷移作用研究[J].中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)， 2023，27（9） ：1 088-1 091.

[12] 劉衛(wèi)紅，楊晨，張貴平，等.TGF- ?β_β Smad通路在羊棲 菜多糖誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡過程中的作用[J].中西 醫(yī)結(jié)合肝病雜志，2023，33（11）：996-999.

[13] LIU S，REN J，TEN DIJKE P.Targeting TGFβ signal transduction for cancer therapy[J]. Signal Transductionand Targeted Therapy，2021，6（1） ：8.

[14] WU F，WEIGEL KJ，ZHOU H，et al. Paradoxical roles of TGF- β signaling in suppressing and promoting squamous cell carcinoma[J].Acta Biochimica et BiophysicaSinica，2018，50（1）：98-105.

[15] TIAN H，LIU C，YU J，et al.PHF14 enhances DNA methylation of SMAD7 gene to promote TGF- β -driven lung adenocarcinoma metastasis[J]. Cell Discovery， 2023，9（1） ：41.

[16] NAGAR H，KIM S，LEE I，et al. Downregulation of CR6- interacting factor1 suppresseskeloid fibroblast growth via the TGF-β/Smad signaling pathway[J]. Scientific Reports，2021，11（1） ：500.

[17] KATSUNO Y，DERYNCK R. Epithelial plasticity，epithelial-mesenchymal transition，and the TGF- β family [J].Developmental Cell，2021，56（6） ：726-746.

[18] 陳勝松，李歡歡，吳惠蓉.二甲雙胍阻斷TGF- β1/ STAT3信號(hào)通路對肝癌細(xì)胞黏附、遷移、侵襲及上 皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用研究[J].現(xiàn)代消化及介入診療， 2023，28（6） ：724-729.

[19] 虞胥哲.METTL5調(diào)控TGFβ2影響肝癌細(xì)胞增殖和 遷移的機(jī)制研究[D].南昌：南昌大學(xué)，2024.

[20] 易銘.TGF- ?β 和PD-L1雙特異性抗體重塑免疫微 環(huán)境及協(xié)同錳離子的抗腫瘤作用研究［D].武漢： 華中科技大學(xué)，2022.

[21] LI Y，JIANG M，AYE L，et al. UPP1 promotes lung adenocarcinoma progression through the induction of an immunosuppressive microenvironment[J].Nature Communications，2024，15（1） ：1200.

[22] SONG M，HE J，PAN QZ，et al. Cancer ?- Associated Fibroblast-Mediated Cellular Crosstalk Supports Hepatocellular Carcinoma Progression[J]. Hepatology，2021， 73（5） ：1 717-1 735.

（責(zé)任編輯：丁 寒）

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