摘要：本研究以春蘭宋梅為試驗材料，系統(tǒng)探究不同春化溫度和春化時間對其開花性狀和生理生化指標(biāo)的影響。結(jié)果表明，與室溫春化處理相比， 低溫春化可顯著提高春蘭的開花率， 低溫春化處理60d即可使春蘭開花率超過 90% ，且不影響其開花品質(zhì)。在滲透調(diào)節(jié)系統(tǒng)方面， 4‰ 低溫春化處理90d的春蘭植株可溶性糖含量顯著低于室溫春化的春蘭植株（ Plt;0.05 4⁴C 低溫春化處理90d的春蘭植株可溶性蛋白質(zhì)含量顯著高于室溫春化的春蘭植株（ Plt;0.05） ，表明 4⁴C 低溫春化能夠促進(jìn)春蘭植株中可溶性糖向可溶性蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)化。同時 4^°C 低溫春化能夠促進(jìn)春蘭植株快速合成脯氨酸，保護細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)。在抗氧化系統(tǒng)方面，隨著春化處理時間的延長， 4‰ 低溫春化處理的春蘭植株丙二醛（MDA）含量整體上持續(xù)下降，而室溫春化處理的春蘭丙二醛（MDA）含量呈波動變化，表明 低溫更有利于維持細(xì)胞膜完整性。 4^qC 低溫春化處理30d的春蘭葉片超氧化物歧化酶活性達(dá)到最大值， 4⁴C 低溫春化處理60d的春蘭葉片過氧化氫酶活性達(dá)到最大值。在長期低溫脅迫下，春蘭植株的抗氧化酶活性與丙二醛含量保持動態(tài)平衡，使其維持細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的完整性和細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)。在光合系統(tǒng)方面，隨著春化處理時間的延長， 4⁴C 低溫春化處理的春蘭葉片葉綠素含量波動但總體保持穩(wěn)定，表明 4^qC 低溫未對春蘭光合能力造成不可逆損傷，春蘭能夠通過自身調(diào)節(jié)機制維持光合器官的結(jié)構(gòu)與功能完整性。本研究結(jié)果為春蘭規(guī)?；ㄆ谡{(diào)控提供了理論依據(jù)。

中圖分類號： S353⁺ .1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號： 1000-4440（2025）07-1289-13

Effects of vernalization on flowering traits and physiological and biochemical characteristics of Cymbidium goeringii

LIU Hong， WEI Xiaoyu，MA Hui， WANG You， SUN Ye（InstituteofAgricultural SciencesofLixiaheDistricts，Yangzhou 25o7，China）

Abstract：The study used the Cymbidium goeringii Songmei asthe experimental material to systematically investigate theeffectsofdiffrentvermalizationtemperaturesanddurationsonfloweringtraitsandphysiologicalandbiochemicalindicators.The results showed that compared with room temperature vernalization，vernalization at 4°C significantly increased the floweringrate ofCymbidium goeringii.A6O-dayvernalization treatmentat 4⁹C could increase the flowering rate to over 90% ， withoutaffectingthefloweringquality.In termsofosmoticregulation，thecontentofsolublesugarinCymbidiumgoeringi plants treated with vernalization for 9O dayswas significantlylowerthan that in plants treated with room temperaturevernalization （ Plt;0.05 ），while the content of solubleproteinwas significantlyhigher（ Plt;0.05 ）. This indicated that 4 C vernalization promoted the conversion of soluble sugar to soluble proteinin Cymbidium goeringii.At the same time，4 C vernalization also promoted the rapid synthesis ofproline in Cymbidium goeringii，and protected thecell membrane structure.Regarding the antioxidant system，as the duration of vernalization treatment increased，thecontentof malondialdehyde（MDA）in Cymbidium goeringi plants treated with 4 ΔC vernalizationcontinued to declineon the whole，while the MDA content in plants treated with room temperature vernalization showed fluctuating changes. This suggestd that 4 ΔC vernalization was more conducive to maintaining cell membrane integrity.The activity of superoxide dismutase in the leaves of Cymbidium goeringi treated with 4 C vernalizationfor3Odaysreachedits maximumvalue，，andtheactivityofcatalase intheleavesofplants treatedfor6Odaysreachedits maximumvalue.Underlong-termlow-temperature stress，theactivitiesof antioxidant enzymes and MDAcontent in Cymbidium goeringiimaintainedadynamicbalance，whichhelpedtomaintaintheintegrityofcellmembranestructureandcellularhomeostasis.Intermsof thephotosyntheticsystem，asthedurationofvermalizationtreatmentincreased，thechlorophyllcontentin the leaves of Cymbidium goeringii treated with 4 C vernalization fluctuated but remained stable overall. This indicated that （204號 4°C vernalization didnotcause irreversibledamagetothephotosyntheticcapacityofCymbidium goeringii.Cymbidium goeringicouldmaintaintheintegrityof structureandfunctionof itsphotosyntheticorgansthrough itsownregulatorymechanisms. This study provides a theoretical basis for the large-scale flowering regulation of Cymbidium goeringi.

Key words：Cymbidium goeringii；vernalization；flowering traits；physiological and biochemical indicators

春蘭是蘭科蘭屬多年生草本植物，在中國已有數(shù)千年的栽培歷史。其株型典雅、瓣型豐富、花香清幽，兼具觀賞價值、經(jīng)濟價值和文化價值[1]。春蘭的花芽分化于8月完成，隨后進(jìn)入生長緩慢的半休眠狀態(tài)，自然花期集中在2-3月。然而，這種花期與春節(jié)花卉銷售旺季存在時間錯位，導(dǎo)致其市場競爭力受限，直接影響經(jīng)濟效益和產(chǎn)業(yè)發(fā)展。因此，調(diào)控春蘭花期提前至春節(jié)前，對提升其經(jīng)濟價值具有重要意義。

溫度是調(diào)控植物成花的關(guān)鍵環(huán)境因子[2]。冬性植物需通過低溫春化完成生殖生長，該過程依賴于冷刺激的定量積累[3-4]，春蘭是典型的低溫誘導(dǎo)開花植物[5-7]。研究結(jié)果表明，經(jīng)歷短時低溫或未經(jīng)歷春化處理的春蘭不能正常開花；而晝溫/夜溫 25°C/10^°C 處理40d 以上，或 3～6% 持續(xù)處理 40d 均可使春蘭花期提前[8-9]。 5°C 以下低溫累積 105～350h 可有效誘導(dǎo)春蘭花芽分化，使盛花期提前至春節(jié)前15d左右[10]。從生理機制來看，春化能夠重構(gòu)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)動態(tài)平衡、激活抗氧化酶系統(tǒng)和調(diào)控內(nèi)源激素網(wǎng)絡(luò)[1I-13]。不同物種和不同組織對春化的響應(yīng)存在顯著差異[1416] 。

本研究以春蘭品種宋梅為試驗材料，探究春化溫度與持續(xù)時間對春蘭生理生化指標(biāo)和開花性狀的影響，以期闡明春蘭春化調(diào)控機制，為春蘭花期精準(zhǔn)調(diào)控提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試材料為春蘭宋梅（Cymbidiumgoeringii SongMei），來自中國蘭種質(zhì)資源圃。栽培基質(zhì)按樹皮：草炭：植金石：草炭 =4：1：1：1 （體積比）配制。

1.2 試驗方法

1.2.1春化處理試驗于2023年10月下旬在中國蘭種質(zhì)資源圃進(jìn)行。選取長勢良好、根系完整、假鱗莖粗壯、無病蟲害且花芽出土 3～4cm 的春蘭植株，每盆3～6株苗，每株苗1～3個花芽。試驗前對植株適當(dāng)控水，葉面噴施 1g/L 磷酸二氫鉀溶液。將植株隨機分為2組，第1組春蘭在無加溫玻璃溫室中培養(yǎng)，依靠自然光照和通風(fēng)，試驗期間溫室內(nèi)環(huán)境溫度變化如圖1所示；第2組春蘭脫盆后洗凈根系，晾干表面水分，置于泡沫箱中轉(zhuǎn)入 4^°C 冷庫進(jìn)行低溫春化處理。試驗周期 90d ，每處理設(shè)3次重復(fù)。分別于處理當(dāng)天與處理 15d.30d.60d 和 90d 取春蘭葉片、花苞、假鱗莖及根部組織，分為2份，一份用于水分含量測定，另一份用于生理生化指標(biāo)測定。

1.2.2催花處理室溫春化的春蘭分別于45d（有效低溫時數(shù) 93h ）、60d（有效低溫時數(shù) 269h 、67d（有效低溫時數(shù) 291h ）、74d（有效低溫時數(shù) 316h ）轉(zhuǎn)入催花溫室（晝/夜 25～26%5～16% ）； 4°C 低溫春化的春蘭分別于 45d，60d，67d，74d 取出，在15°C 條件下適應(yīng)1d轉(zhuǎn)入催花溫室（晝溫/夜溫 25～ 。催花期間每15d葉面噴施1次0.5mg/L 磷酸二氫鉀溶液。每處理設(shè)3次重復(fù)，每重復(fù)10盆春蘭。

1.3 測定指標(biāo)與方法

1.3.1開花相關(guān)指標(biāo)測定分別記錄春蘭始花期、末花期，統(tǒng)計開花所需時間、花期、開花率，并測定始花時和開花7d時的花葶高。開花率 Σ=Σ （開花的花朵數(shù)/花芽總數(shù)） ×100% ；開花所需天數(shù)（d）：從轉(zhuǎn)入催花溫室至開花所需天數(shù)；開花持續(xù)時間（d）：從始花期至末花期持續(xù)天數(shù)；花葶高（ cm ：從假鱗莖頂部到花朵基部的距離。

圖1室溫變化Fig.1Room temperaturevariation

1.3.2生理生化指標(biāo)測定采用蒽酮比色法測定植物可溶性糖（SS）含量，采用考馬斯亮藍(lán)G-250比色法測定可溶性蛋白質(zhì)（SP）含量，采用分光光度法測定超氧化物歧化酶（SOD）活性、過氧化氫酶（CAT）活性、過氧化物酶（POD）活性以及丙二醛（MDA）含量、游離脯氨酸（ Pro） 含量，采用乙醇法測定總?cè)~綠素含量[17]

1.3.3數(shù)據(jù)處理各指標(biāo)均進(jìn)行3次重復(fù)測定，數(shù)據(jù)以平均值 ± 標(biāo)準(zhǔn)誤差表示。使用MicrosoftExcel2016進(jìn)行數(shù)據(jù)整理與初步分析；使用SPSS22.0軟件進(jìn)行單因素方差分析；使用Duncan’s法多重比較檢驗組間差異的顯著性；使用Origin2021軟件進(jìn)行相關(guān)性分析；使用GraphPadPrism6繪制圖片。

2 結(jié)果與分析

2.1不同春化溫度和春化時間對春蘭開花率的影響

春蘭植株分別在室溫和 4^°C 低溫下春化處理45d，60d，67d 和74d，轉(zhuǎn)移至溫室進(jìn)行催花并統(tǒng)計開花率。如圖2所示，室溫春化處理和 4^qC 低溫春化處理45d的春蘭開花率均為0。隨春化處理時間的延長，春蘭開花率呈上升趨勢。 4^°C 春化處理60d、67d、74d的春蘭開花率顯著高于室溫春化處理 60d，67 d、74d的春蘭開花率（ Plt;0.05） 。綜上，春蘭開花需要一定時間的春化處理，與室溫春化處理相比， 4‰ 低溫春化處理能使春蘭使開花率顯著上升。

如圖3所示，隨 4^°C 低溫春化時間的延長，春蘭達(dá)到最大開花率所需催花時間越短。 4‰ 低溫春化處理 60d.67d.74d 的春蘭達(dá)到最大開花率所需催花時間分別為 24d.22d 和 16d （204號 4^°C 低溫春化處理67d 的春蘭開花最早，于催花后第6d后開花，比4C 低溫春化處理 60d.74d 的春蘭提前2d開花。4C 低溫春化處理 60d.67d.74d 的春蘭在催花后第24d，22 d和16d開花率分別達(dá)到 92.86%.92.11% 、100.00% 。表明隨著 4^°C 低溫春化時間的延長，春蘭開花率超過 90.00% 所需的催花時間越短。

圖柱上不同小寫字母表示差異顯著 （Plt;0.05） 。圖2不同春化溫度和春化時間下春蘭的開花率Fig.2Thefloweringrateof Cymbidiumgoeringiiunderdiffer-entvernalizationtemperaturesanddurations

圖34℃低溫春化時間對春蘭開花率的影響 Fig.3 The effect of 4 C low-temperature vernalization durationonthefloweringrateof Cymbidiumgoeringii

2.2春化時間對春蘭開花所需時間和花期的影響

如圖4所示，隨著春化時間的延長，春蘭開花所需催花時間縮短。室溫春化處理60d的春蘭開花所需催花時間為13.20d，顯著高于 4^°C 低溫春化處理 60d 的春蘭（ Plt;0.05） 。 4^°C 低溫春化處理 60d 、67d.74d 的春蘭花期和室溫春化處理 60d.67d 、74d的春蘭均無顯著差異（ Pgt;0.05， 。

圖4不同春化溫度和春化時間對春蘭開花所需時間和花期的影響

圖柱上不同小寫字母表示差異顯著 Plt;0.05） 。

2.3不同春化溫度和春化時間對春蘭花葶高度的影響

如圖5所示， 4^°C 低溫春化處理 60d.67d.74 d的春蘭始花時花葶高度和室溫春化處理 60d.67d 、74d的春蘭均無顯著差異（ Pgt;0.05 。 4^°C 低溫春化處理 60d 的春蘭開花7d時花葶高度顯著高于室溫春化處理 60d 的春蘭（ Plt;0.05 ）。

圖5不同春化溫度和春化時間對春蘭花葶高度的影響

Fig.5The effects of diferent vernalization temperatures and durations on theflowering stem height ofCymbidium goeringi

圖柱上不同小寫字母表示差異顯著（ Plt;0.05） 。

2.4春化時間與春蘭開花率、開花時間、開花品質(zhì)的相關(guān)性分析

2.4.1室溫春化時間與春蘭開花性狀的相關(guān)性分析如表1所示，室溫春化條件下，春蘭春化時間與開花率呈極顯著正相關(guān)（ Plt;0.01 ）；春蘭春化時間與開花所需時間呈極顯著負(fù)相關(guān)（ Plt;0.01 ）；春蘭開花率與開花所需時間呈極顯著負(fù)相關(guān)（ Plt;0.01 ）。2.4.2 4^°C 低溫春化時間與春蘭開花性狀的相關(guān)性分析如表2所示， 低溫春化條件下，春蘭春化時間與開花率呈極顯著正相關(guān)（ Plt;0.01 ）。

2.5不同春化溫度和春化時間對春蘭滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量的影響

如圖6所示，室溫春化處理15d、30d、60d、90d的春蘭葉片可溶性糖含量均顯著高于未春化的春蘭葉片（ Plt;0.05） 。 4^°C 低溫春化處理 15d.30d.60 d的春蘭葉片可溶性糖含量均顯著高于未春化的春蘭葉片（ Plt;0.05） 。室溫春化處理30d的春蘭花苞可溶性糖含量顯著低于未春化的春蘭花苞（ Plt; 0.05）。 4^°C 低溫春化處理 15d.30d.60d 的春蘭花苞可溶性糖含量均顯著低于未春化的春蘭花苞（ Plt;0.05） ，而處理 90d 后的春蘭花苞可溶性糖含量顯著高于未春化春蘭花苞（ （Plt;0.05） 。室溫春化處理 30d 的春蘭假鱗莖可溶性糖含量顯著低于未春化的春蘭假鱗莖（ Plt;0.05） ，而處理60d的春蘭假鱗莖可溶性糖含量顯著高于未春化的春蘭假鱗莖0 （Plt;0.05） 。 4^°C 低溫春化處理60d的春蘭假鱗莖可溶性糖含量顯著高于未春化的春蘭假鱗莖（ Plt; 0.05）。室溫春化處理 15d 的春蘭根可溶性糖含量顯著低于未春化的春蘭根（ Plt;0.05， ，而室溫春化處理 90d 的春蘭根可溶性糖含量顯著高于未春化的春蘭根（ Plt;0.05） 。 4^qC 低溫春化處理 60d 的春蘭根可溶性糖含量顯著低于未春化的春蘭根（ Plt; 0.05）。 低溫春化處理 90d 的春蘭植株可溶性糖含量顯著低于室溫春化處理 90d 的春蘭植株0 （Plt;0.05） 。

表1室溫春化時間與春蘭開花性狀的相關(guān)性分析

*表示在0.05水平顯著相關(guān)，**表示在0.01水平極顯著相關(guān)。

Table1Analysisof thecorrelationbetwenroom temperature vernalization durationandflowering traitsof Cymbidiumgoeringi

表24℃低溫春化時間與春蘭開花性狀的相關(guān)性分析 Table2 Analysisof thecorrelationbetween low-temperaturevernalization durationand floweringtraitsofCymbidiumgoeringii

*表示在0.05水平顯著相關(guān)，**表示在0.01水平極顯著相關(guān)。

如圖7所示，室溫春化處理 30d.90d 的春蘭葉片可溶性蛋白質(zhì)含量均顯著低于未春化的春蘭葉片（ Plt;0.05 ），室溫春化處理 60d 的春蘭葉片可溶性蛋白質(zhì)含量顯著高于未春化的春蘭葉片（ Plt;0.05 。

4^°C 低溫春化處理 15d.30d.90d 的春蘭葉片可溶性蛋白質(zhì)含量均顯著高于未春化的春蘭葉片（ Plt; 0.05）。室溫春化處理 15d.60d 的春蘭花苞可溶性蛋白質(zhì)含量均顯著高于未春化的春蘭花苞（ Plt; 0.05），而室溫春化處理 30d 的春蘭花苞可溶性蛋白質(zhì)含量顯著低于未春化的春蘭花苞（ Plt;0.05） 。4C 低溫春化處理 90d 的春蘭花苞可溶性蛋白質(zhì)含量顯著高于未春化的春蘭花苞（ Plt;0.05 。室溫春化處理 15d.30d.60d 的春蘭假鱗莖可溶性蛋白質(zhì)含量均顯著低于未春化的春蘭假鱗莖（ （Plt;0.05） 。4C 低溫春化處理 30d.60d 的春蘭假鱗莖可溶性蛋白質(zhì)含量均顯著低于未春化的春蘭假鱗莖（ Plt; 0.05）。室溫春化處理 60d.90d 的春蘭根可溶性蛋白質(zhì)含量均顯著高于未春化的春蘭根（ Plt;0.05） 。

4^°C 低溫春化處理 15d.30d.90d 的春蘭植株可溶性蛋白質(zhì)含量均顯著高于室溫春化處理 15d 、30d.90d 的春蘭植株（ Plt;0.05） ，而 4‰ 低溫春化處理 60d 的春蘭植株可溶性蛋白質(zhì)含量顯著低于室溫春化處理 60d 的春蘭植株（ Plt;0.05 ）。

圖6不同春化溫度和春化時間對春蘭可溶性糖含量的影響

A：葉片;B：花苞;C：假鱗莖;D：根；E：植株。圖柱上不同小寫字母表示差異顯著（ Plt;0.05） 。

圖7不同春化溫度和春化時間對春蘭可溶性蛋白質(zhì)含量的影響

A：葉片;B：花苞;C：假鱗莖;D：根;E：植株。圖柱上不同小寫字母表示差異顯著（ Plt;0.05 。

如圖8所示，室溫春化處理15d、30d、60d、90d的春蘭葉片脯氨酸含量均顯著高于未春化的春蘭葉片 Plt;0.05 。 4‰ 低溫春化處理 15d，30d，60 d、90d的春蘭葉片脯氨酸含量均顯著高于未春化的春蘭葉片（ Plt;0.05， ）。室溫春化處理 15d.60d 、90d 的春蘭花苞脯氨酸含量均顯著低于未春化的春蘭花苞（ Plt;0.05 。 低溫春化處理 15d.30d 、60d.90d 的春蘭花苞脯氨酸含量均顯著低于未春化的春蘭花苞（ Plt;0.05） 。室溫春化處理15d、30d，90d 的春蘭假鱗莖脯氨酸含量均顯著低于未春化的春蘭假鱗莖（ Plt;0.05） ，而處理 60d 的春蘭假鱗莖脯氨酸含量顯著高于未春化的春蘭假鱗莖（ Plt; 0.05）。 低溫春化處理 30d.90d 的春蘭假鱗莖脯氨酸含量均顯著高于未春化的春蘭假鱗莖（ Plt;

0.05）。室溫春化處理 15d 的春蘭根脯氨酸含量顯著低于未春化的春蘭根（ ?Plt;0.05） ，而室溫春化處理60d.90d 的春蘭根脯氨酸含量均顯著高于未春化的春蘭根（ ?Plt;0.05） 。 4^°C 低溫春化處理 15d.30d 、60d的春蘭根脯氨酸含量均顯著高于未春化的春蘭根（ Plt;0.05， 。 4^°C 低溫春化處理15d的春蘭植株脯氨酸含量顯著高于室溫春化處理15d的春蘭植株（ Plt;0.05 ）。

A：葉片;B：花苞;C：假鱗莖;D：根;E：植株。圖柱上不同小寫字母表示差異顯著（ Plt;0.05） 。

圖8不同春化溫度和春化時間對春蘭脯氨酸含量的影響

Fig.8Theefectsof diferent vernalizationtemperaturesand durationsontheprolinecontentofCymbidiumgoeringi

2.6不同春化溫度和春化時間對春蘭抗氧化酶活性和丙二醛含量的影響

由圖9可知，室溫春化處理 15d，30d，60d 、90d 的春蘭葉片超氧化物歧化酶活性均顯著低于未春化的春蘭葉片（ Plt;0.05） 。 4‰ 低溫春化處理15d.60d.90d 的春蘭葉片超氧化物歧化酶活性均顯著低于未春化的春蘭葉片（ Plt;0.05， 。室溫春化處理 15d，30d，60d，90d 的春蘭花苞超氧化物歧化酶活性均顯著高于未春化的春蘭花苞（ Plt; 0.05）。 4^°C 低溫春化處理 15d.30d.90d 的春蘭花苞超氧化物歧化酶活性均顯著高于未春化的春蘭花苞（ Plt;0.05） 。室溫春化處理 15d，30d，60 d，90d 的春蘭假鱗莖超氧化物歧化酶活性均顯著高于未春化的春蘭假鱗莖（ Plt;0.05） 。 4‰ 低溫春化處理 15d，30d，60d，90d 的春蘭假鱗莖超氧化物歧化酶活性均顯著高于未春化的春蘭假鱗莖（ Plt;0.05） 。室溫春化處理 30d.90d 的春蘭根超氧化物歧化酶活性均顯著高于未春化的春蘭根（ Plt;0.05） 。 4‰ 低溫春化處理 15d.30d.90d 的春蘭根超氧化物歧化酶活性均顯著高于未春化的春蘭根（ Plt;0.05） ，而 4^°C 低溫春化處理60d的春蘭根超氧化物歧化酶活性顯著低于未春化的春蘭根（ Plt;0.05 。

4^°C 低溫春化處理 15d 的春蘭植株超氧化物歧化酶活性顯著高于室溫春化處理 15d 的春蘭植株（ Plt;0.05） ，而 4‰ 低溫春化處理 60d.90d 的春蘭植株超氧化物歧化酶活性均顯著低于室溫春化處理60d.90d 的春蘭植株（ 1lt;0.05 。

圖9不同春化溫度和春化時間對春蘭超氧化物歧化酶活性的影響

Fig.9Theefectsof diferent vernalizationtemperatures and durations onthsuperoxidedismutaseactivityof Cymbidiumgoeringi

A：葉片；B：花苞；C：假鱗莖;D：根；E：植株。圖柱上不同小寫字母表示差異顯著（ （Plt;0.05） 。

如圖10所示，室溫春化處理 60d 的春蘭葉片過氧化物酶活性顯著高于未春化的春蘭葉片（ Plt;0.05） 。4C 低溫春化處理60d的春蘭葉片過氧化物酶活性顯著低于未春化的春蘭葉片（ Plt;0.05） ，而 4^°C 低溫春化處理 90d 的春蘭葉片過氧化物酶活性顯著高于未春化的春蘭葉片（ Plt;0.05） 。室溫春化處理 15d，30d，60d，90 d的春蘭花苞過氧化物酶活性均顯著低于未春化的春蘭花苞（ Plt;0.05） 。 4^°C 低溫春化處理 15d，30d，60 d，90d 的春蘭花苞過氧化物酶活性均顯著低于未春化的春蘭花苞（ Plt;0.05） 。室溫春化處理 15d，30 d.60d 的春蘭假鱗莖過氧化物酶活性均顯著低于未春化的春蘭假鱗莖（ ?lt;0.05） 。 4‰ 低溫春化處理 15d.30d.60d.90d 的春蘭假鱗莖過氧化物酶活性均顯著低于未春化的春蘭假鱗莖（ Plt;0.05） 。室溫春化處理 30d.90d 的春蘭根過氧化物酶活性均顯著低于未春化的春蘭根（ Plt;0.05 。 4‰ 低溫春化處理 15d.30d.90d 的春蘭根過氧化物酶活性均顯著低于未春化的春蘭根（ （Plt;0.05 。

4^°C 低溫春化處理 15d.30d.60d 的春蘭植株過氧化物酶活性均顯著低于室溫春化處理 15d，30 d.60d 的春蘭植株（ Plt;0.05） 。

如圖11所示，室溫春化處理 15d，30d，60d，90 d的春蘭葉片過氧化氫酶活性均顯著低于未春化的春蘭葉片（ Plt;0.05： 。 4^°C 低溫春化處理 15d.30d 、90d 的春蘭葉片過氧化氫酶活性均顯著低于未春化的春蘭葉片（ Plt;0.05） ，而 4^°C 低溫春化處理60d的春蘭葉片過氧化氫酶活性顯著高于未春化的春蘭葉片 Plt;0.05） 。室溫春化處理 60d.90d 的春蘭花苞過氧化氫酶活性均顯著高于未春化的春蘭花苞（ Plt; 0.05）。 4^°C 低溫春化處理 15d，30d，60d，90d 的春蘭花苞過氧化氫酶活性均顯著高于未春化的春蘭花苞（ Plt;0.05） 。室溫春化處理 15d 的春蘭假鱗莖過氧化氫酶活性顯著低于未春化的春蘭假鱗莖（ Plt; 0.05），而室溫春化處理 30d.60d.90d 的春蘭假鱗莖過氧化氫酶活性均顯著高于未春化的春蘭假鱗莖C （Plt;0.05） 。 4^°C 低溫春化處理 30d.60d.90d 的春蘭假鱗莖過氧化氫酶活性均顯著高于未春化的春蘭假鱗莖（ （Plt;0.05） 。室溫春化處理 15d 的春蘭根過氧化氫酶活性顯著低于未春化的春蘭根（ Plt;0.05） ，而室溫春化處理 30d.60d.90d 的春蘭根過氧化氫酶活性均顯著高于未春化的春蘭根（ Plt;0.05） 。 4^°C 低溫春化處理 15d.30d.60d.90d 的春蘭根過氧化氫酶活性均顯著高于未春化的春蘭根（ Plt;0.05 ）。

低溫春化處理 15d.60d 的春蘭植株過氧化氫酶活性均顯著高于室溫春化處理 15d.60d 的春蘭植株（ Plt;0.05 ，而 4‰ 低溫春化處理 90d 的春蘭植株過氧化氫酶活性顯著低于室溫春化處理90d 的春蘭植株（ Plt;0.05 。

圖10不同春化溫度和春化時間對春蘭過氧化物酶活性的影響Fig.10The efects of diferent vernalization temperaturesand durations ontheperoxidase activityof Cymbidium goeringi

A：葉片；B：花苞；C：假鱗莖;D：根;E：植株。圖柱上不同小寫字母表示差異顯著（ Plt;0.05） 。

圖11不同春化溫度和春化時間對春蘭過氧化氫酶活性的影響

Fig.11The effects of diferent vernalization temperatures and durations on the catalase activityof Cymbidium goeringi

A：葉片；B：花苞;C：假鱗莖;D：根;E：植株。圖柱上不同小寫字母表示差異顯著（ Plt;0.05）

如圖12所示，室溫春化處理 15d.60d 的春蘭葉片丙二醛含量均顯著高于未春化的春蘭葉片（ Plt; 0.05），而室溫春化處理 30d.90d 的春蘭葉片丙二醛含量均顯著低于未春化的春蘭葉片 （ （Plt;0.05） 。4^°C 低溫春化處理 15d.30d 的春蘭葉片丙二醛含量均顯著高于未春化的春蘭葉片（ Plt;0.05） ，而 4^°C 低溫春化處理 90d 的春蘭葉片丙二醛含量顯著低于未春化的春蘭葉片（ Plt;0.05） ）。室溫春化處理15d的春蘭花苞丙二醛含量顯著高于未春化的春蘭花苞（ Plt;0.05） ，而室溫春化處理 60d.90d 的春蘭花苞丙二醛含量均顯著低于未春化的春蘭花苞（ Plt; 0.05）。 4^°C 低溫春化處理 15d.30d.60d 的春蘭花苞丙二醛含量均顯著低于未春化的春蘭花苞（ Plt; 0.05）。室溫春化處理 15d.30d.90d 的春蘭假鱗莖丙二醛含量均顯著低于未春化的春蘭假鱗莖（ Plt; 0.05）。 低溫春化處理 30d 的春蘭假鱗莖丙二醛含量顯著高于未春化的春蘭假鱗莖（ （Plt;0.05） ，而4^°C 低溫春化處理 60d.90d 的春蘭假鱗莖丙二醛含量均顯著低于未春化的春蘭假鱗莖（ Plt;0.05） 。室溫春化處理 30d.60d.90d 的春蘭根丙二醛含量顯著低于未春化的春蘭根（ Plt;0.05） 。 4‰ 低溫春化處理 15d.30d.60d 的春蘭根丙二醛含量均顯著低于未春化的春蘭根（ Plt;0.05. 。

4^°C 低溫春化處理 30d.90d 的春蘭植株丙二醛含量均顯著高于室溫春化處理 30d.90d 的春蘭植株（ Plt;0.05 ，而 4‰ 低溫春化處理 60d 的春蘭植株丙二醛含量顯著低于室溫春化處理 60d 的春蘭植株（ Plt;0.05， 。

A：葉片;B：花苞;C：假鱗莖;D：根；E：植株。圖柱上不同小寫字母表示差異顯著（ Plt;0.05） 。

圖12不同春化溫度和春化時間對春蘭丙二醛含量的影響

.12The efects of diferent vernalization temperatures and durations on the malondialdehyde content of Cymbidium goer

2.7春化時間對春蘭葉片葉綠素含量的影響

2.8春化時間與春蘭生理生化指標(biāo)的相關(guān)性分析

如圖13所示，室溫春化處理 30d.60d.90d 的春蘭葉片葉綠素含量顯著高于未春化的春蘭葉片以及室溫春化處理 15d 的春蘭葉片（ Plt;0.05， 。 4‰ 低溫春化處理 60d 的春蘭葉片葉綠素含量顯著高于未春化的春蘭葉片以及 4^°C 低溫春化處理 15d 、30d.90d 的春蘭葉片（ Plt;0.05） 。 低溫春化處理 15d.60d 的春蘭葉片葉綠素含量分別顯著高于室溫處理 15d.60d 的春蘭葉片，而 4^°C 低溫春化處理 30d.90d 的春蘭葉片葉綠素含量分別顯著低于室溫處理 30d.90d 的春蘭葉片（ Plt;0.05 。

如圖14所示，室溫春化條件下，春蘭春化時間與可溶性糖含量（SS）、可溶性蛋白含量 （SP） 呈顯著正相關(guān)（ Plt;0.05 ），相關(guān)系數(shù)分別為0.63、0.66；春蘭春化時間與脯氨酸含量、葉綠素含量呈極顯著正相關(guān)（ Plt;0.01 ），相關(guān)系數(shù)分別為0.82、0.85；春蘭春化時間與過氧化物酶活性 （POD） ）丙二醛含量（MDA）呈極顯著負(fù)相關(guān)（ Plt;0.01 ），相關(guān)系數(shù)分別為 ^{-0.80，-0.68} 。表明室溫春化條件下，春化時間對春蘭滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量、抗氧化酶活性及光合能力具有顯著影響。 4‰ 低溫春化條件下，春化時間與過氧化氫酶活性 （CAT） 呈極顯著正相關(guān)（ Plt;0.01? ），相關(guān)系數(shù)為0.77。表明 4‰ 低溫春化條件下，春化時間對春蘭抗氧化酶活性具有極顯著影響。

3 結(jié)論與討論

3.1春化溫度和春化時間對春蘭滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量的影響

在低溫春化過程中，可溶性糖（SS）、可溶性蛋白（SP）和脯氨酸（Pro）通過滲透調(diào)節(jié)和代謝調(diào)控幫助植物抵御低溫脅迫[18-20]。低溫春化初期，植株通過主動積累可溶性糖提升細(xì)胞液濃度，增強抗寒能力以應(yīng)對低溫脅迫；低溫春化中后期，莖尖分生組織感知春化信號，可溶性糖含量逐漸下降，植物從營養(yǎng)生長向生殖發(fā)育過渡[21]。本研究中， 4^°C 低溫春化處理 90d 的春蘭植株可溶性糖含量顯著低于室溫春化處理的春蘭植株（ Plt;0.05， ， 低溫春化處理90d的春蘭植株可溶性蛋白質(zhì)含量均顯著高于室溫春化處理的春蘭植株（ Plt;0.05 。表明 4‰ 低溫春化能夠促進(jìn)春蘭植株中可溶性糖向可溶性蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)化，與前人研究結(jié)果[22]相似。

圖14春化時間與春蘭生理生化指標(biāo)的相關(guān)性分析

14Analysis of the correlation between vernalizationduration and physiological and biochemical indicators of Cymbidium go

圖柱上不同小寫字母表示差異顯著（ Plt;0.05） 。

圖A為室溫春化；圖B為 低溫春化。 VT ：春化時間；SS：可溶性糖含量； SP ：可溶性蛋白含量； Pro ：脯氨酸含量； soD ：超氧化物歧化酶活性； CAT ：過氧化氫酶活性； POD ：過氧化物酶活性；MDA：丙二醛含量； Chl ：葉綠素含量。*表示在0.05水平顯著相關(guān)，**表示在0.01水平極顯著相關(guān)。

脯氨酸作為重要的滲透保護物質(zhì)，其含量可反映植物的抗逆能力[23-24]。本研究發(fā)現(xiàn)， 4‰ 低溫春化處理 15d 的春蘭植株脯氨酸含量顯著高于室溫春化處理 15d 的春蘭植株（ Plt;0.05） 。表明 4‰ 低溫春化能夠促進(jìn)春蘭植株快速合成脯氨酸，保護細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，在苦瓜中也有相似的響應(yīng)模式[25]

3.2春化溫度和春化時間對春蘭抗氧化酶活性、丙二醛含量的影響

丙二醛（MDA）作為植物細(xì)胞膜脂過氧化的產(chǎn)物，其含量變化可有效反映細(xì)胞膜受氧化損傷的程度，丙二醛含量可用于評估逆境脅迫下植物膜系統(tǒng)穩(wěn)定性及抗逆性[26-33]。本研究結(jié)果表明，不同春化溫度處理下MDA含量呈現(xiàn)顯著差異。隨著 4^°C 低溫春化處理時間的延長，春蘭植株丙二醛含量整體呈持續(xù)下降趨勢；而隨著室溫春化處理時間的延長，春蘭內(nèi)二醛含量則呈現(xiàn)出明顯的波動。表明穩(wěn)定的低溫環(huán)境更有利于維持春蘭細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的完整性，而室溫條件下，晝夜溫度波動較大，可能導(dǎo)致春蘭膜系統(tǒng)遭受嚴(yán)重的氧化脅迫。

超氧化物歧化酶（SOD）過氧化物酶（ （POD） 和過氧化氫酶 （CAT） 共同清除活性氧自由基，抵抗活性氧的侵害[34]。本研究中，春蘭的抗氧化酶系統(tǒng)對 低溫春化呈現(xiàn)動態(tài)響應(yīng)特征。 4^°C 低溫春化處理 15d.60d.90d 的春蘭葉片超氧化物歧化酶活性與 4^°C 低溫春化處理 15d.30d.90d 的春蘭葉片過氧化氫酶活性均顯著低于未春化的春蘭（ Plt;0.05， 。其中， 低溫春化處理 30d 的春蘭葉片超氧化物歧化酶活性達(dá)到最大值， 4‰ 低溫春化處理60d的春蘭葉片過氧化氫酶活性達(dá)到最大值，符合低溫誘導(dǎo)的活性氧清除系統(tǒng)激活規(guī)律。 低溫春化處理15d的春蘭葉片超氧化物歧化酶活性驟降，可能是由于在這個階段，春蘭中的能量代謝轉(zhuǎn)向滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)合成，導(dǎo)致抗氧化酶合成能力降低，與前人研究結(jié)論[35]一致。該結(jié)果揭示了春蘭通過抗氧化酶活性的動態(tài)變化來實現(xiàn)低溫脅迫下的平衡。在低溫脅迫前期，春蘭主要依靠超氧化物歧化酶與過氧化氫酶的協(xié)同作用清除活性氧，減少氧化損傷；而在低溫脅迫后期，隨著能量代謝的重新分配，植物通過抑制代謝活動降低能量消耗，減少對抗氧化酶的依賴，同時利用滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)維持細(xì)胞的滲透壓和穩(wěn)定性。這種獨特的適應(yīng)策略使春蘭能夠在長期低溫脅迫下保持細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)。

3.3春化溫度和春化時間對春蘭葉綠素含量的影響

葉綠素作為光合作用的關(guān)鍵色素，其含量變化可直觀反映植物對低溫脅迫的光合適應(yīng)能力[36]本研究結(jié)果表明， 低溫春化處理 15d.60d.90 d的春蘭葉片葉綠素含量顯著高于未春化的春蘭葉片（ Plt;0.05） ，這可能是由于低溫誘導(dǎo)細(xì)胞脫水，導(dǎo)致葉綠素含量濃縮[37]； 4^°C 低溫春化處理30d的春蘭葉片葉綠素含量與未春化的春蘭葉片無顯著差異（ Pgt;0.05） 。表明 4^°C 低溫未對春蘭光合能力造成不可逆損傷，春蘭能夠通過自身調(diào)節(jié)機制維持光合器官的結(jié)構(gòu)與功能完整性。該適應(yīng)性機制可能是春蘭長期進(jìn)化過程中形成的低溫響應(yīng)策略。

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（責(zé)任編輯：成紓寒）

收稿日期：2024-11-29

基金項目：2024年省級農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新與推廣補助專項[揚農(nóng)辦（2024）101號]；省農(nóng)業(yè)種質(zhì)資源保護與利用平臺項目（JSGB2018-1）；里下河地區(qū)農(nóng)科所科研發(fā)展專項基金項目[SJ（22）105]

作者簡介：劉紅（1986-），女，黑龍江伊春人，碩士，助理研究員，主要從事花卉遺傳育種與產(chǎn)業(yè)化關(guān)鍵技術(shù)研究。（E-mail）liuhong_ivy@126.com

通訊作者：孫葉，（E-mail） sunye9999@126.com