豬流行性腹瀉病毒的流行現狀、檢測方法及防控技術

豬流行性腹瀉（porcineepidemicdiarrhea，PED）是由豬流行性腹瀉病毒（porcineepidemicdiarrheavirus，PEDV引起的一種急性、高度接觸性腸道傳染病，發病豬以腹瀉、嘔吐、脫水為主要臨床特征，病理變化為剖檢可見小腸擴張，腸壁變薄，腸系膜淋巴結水腫，小腸絨毛變短等。PED冬季多發，各年齡的豬均易感，其中哺乳仔豬發病最重，發病率可達 100% ，7日齡以內仔豬感染PED，死亡率可達 50%～10% 。2010年以來，PED在我國的主要流行毒株從經典毒株轉變為變異毒株，變異毒株發病率高、病死率高、傳播性強、流行范圍廣，給我國養豬業造成巨大威脅。本文對PEDV基因組及結構蛋白進行概括，對近年來我國PED流行現狀、檢測方法及防控技術進行總結，以期為我國PED的防控及促進養豬業健康發展提供參考。

1基因組及結構蛋白

PEDV是一種直徑在 95～190nm 的單股正鏈RNA病毒，屬于冠狀病毒科。基因組由7個開放閱讀框（openreadingframes，ORFs）ORFla、ORF1b和ORF2-6組成，共編碼21種蛋白，長度約為28kb[1]，見圖1。其中ORF1a和ORF1b編碼包括nspl-nspl6在內的16種非結構蛋白，ORF2和ORF4-6編碼外膜蛋白（S蛋白）、包膜蛋白（E蛋白）、膜蛋白（M蛋白）和核衣殼蛋白（N蛋白）的4種結構蛋白；ORF3編碼輔助蛋白ORF3[1]。這些蛋白在PEDV存活和逃避宿主免疫中起著至關重要的作用[2]。

S蛋白的S1結構域與受體結合影響PEDV的人侵和釋放，S2結構域參與病毒融合宿主細胞膜的過程。M蛋白、N蛋白在病毒顆粒的組裝和釋放中發揮作用，N蛋白同時還能夠通過下調IFN-β和干擾素刺激基因的表達從而參與PEDV逃避宿主天然免疫機制，ORF3輔助參與PEDV與宿主細胞的相互作用。E蛋白、非結構蛋白nsp1能夠抑制IFN的產生，非結構蛋白nsp1也會與多種IFN調控因子的其他成員相互作用，從而逃避宿主的先天免疫應答2，見圖1。

圖1PEDV基因組結構（A）和顆粒結構（B）示意圖注：圖片來自參考文獻[1]。

2 流行現狀

2010年以前PEDV主要呈散發性流行趨勢，2010年以后PEDV毒株發生變異，以G2型毒株為主的高致病性PEDV流行毒株開始在全球范圍內流行。程亞豪等3對2015—2021年我國東部地區PEDVS1基因的遺傳進化分析表明，目前東部地區PEDV流行株的主要基因型為G2-b亞型。齊海濤等4在2017—2020年期間，于我國華北地區對218個規模化養豬場進行采樣，對4030份腹瀉仔豬病料樣品進行檢測。結果表明，2017—2020年，樣品PEDV核酸陽性率分別為20.21% 、 15.28% 、 10.88% 、 18.80% ，PEDV流行毒株均為G2基因型。樊毛迪等[5采集了2022年江蘇省不同豬場的病豬腹瀉病料36份，結果表明，2022年江蘇PEDV流行毒株為G2-b亞群，且PEDV流行毒株S1蛋白區域存在氨基酸的突變、插入及缺失。

3 檢測方法

3.1PCR

PCR方法因其具有高特異性、高靈敏的特性，在動物病原檢測中被廣泛應用。隨著PCR檢測技術的發展，多重RT-PCR、實時熒光定量RT-PCR（RT-qPCR）、納米RT-PCR等也逐漸應用于實驗室檢測。其中RTqPCR為世界動物衛生組織推薦的病原體檢測方法。多重RT-PCR可同時進行多種病原微生物的鑒定。曹洪志等針對PEDVE基因，結合微芯片技術，建立了PEDV微芯片熒光定量RT-qPCR檢測方法。

3.2LAMP

新型等溫核酸擴增技術主要有環介導等溫擴增技術（LAMP）、重組酶聚合酶等溫擴增技術（RPA）滾環擴增技術（RCA）、鏈置換擴增技術（SDA）、解旋酶依賴性擴增技術（HDA）。LAMP和RPA因其操作簡便快速，在即時檢測中應用最多，尤其適用于現場或資源有限環境。與PCR等病原核酸檢測技術相比，LAMP具有操作簡單、快速靈敏、無需精密儀器、結果可視化等優點，適用于基層或現場病原的快速檢測。李林岳等根據PEDVORF1a/b基因的保守序列設計特異性引物，加入甲酚紅使結果可視化，初步建立了PEDV可視化RT-LAMP檢測方法，見表1。

表15種等溫核酸擴增技術的對比

3.3ELISA

ELISA方法是通過抗原抗體特異性識別特性建立的一種快速檢測方法，目前市面上已有多種商品化PEDVELISA試劑盒，主要包括間接ELISA、競爭ELISA、阻斷ELISA和雙抗體夾心ELISA。間接、競爭性和阻斷性ELISA可用于檢測血清、乳品等樣品中的PEDV免疫球蛋白G（IgG）或免疫球蛋白A（IgA）。雙抗體夾心ELISA可用于檢測感染后1～3d的糞便排泄物中的抗原。王婉瑩等以PEDV重組S蛋白作為包被抗原，辣根過氧化物酶標記的小鼠抗豬IgA單克隆抗體為檢測抗體，建立并優化了PEDVIgA抗體的ELISA檢測方法，既可以檢測血清中的IgA，也可以檢測分泌液中的SIgA。

3.4其他檢測方法

間接免疫熒光試驗（IFA）是先將PEDV抗原包被于玻片上，加入待檢血清，通過熒光顯微鏡觀察是否產生熒光并判斷出待檢血清中是否含有PEDV抗體。病毒中和試驗（VNT）則是把待檢血清與PEDV混合孵育后，接種到非洲綠猴腎（Vero）細胞中，通過觀察PEDV對Vero細胞的病變效應，來判定血清中中和抗體是否存在及效價。熒光免疫層析技術（LFIA）是以硝酸纖維素膜為載體，包被病毒抗原或抗體，待檢樣本借助毛細管作用在膜上移動，若樣本含病毒抗原或對應抗體時，就會與標記熒光物的抗體或抗原結合，在檢測線處形成熒光標記的免疫復合物，再通過熒光讀數儀檢測熒光信號以判定其結果。此外，CRISPR/Cas核酸檢測技術、基因芯片技術、熒光微珠免疫試驗（FMIA）、橫向流量測試（ICA）、均相光激化學發光免疫分析技術（AlphaLISA）等技術在PEDV檢測中都具有巨大的臨床應用潛力[1]。

4 防控技術

4.1疫苗免疫

疫苗接種是PED防控中最為有效的手段。當前我國市面上PEDV商品化疫苗種類豐富，涵蓋滅活疫苗、活疫苗、二聯活疫苗、三聯活疫苗、二聯滅活疫苗、三聯滅活疫苗、基因工程亞單位疫苗等。2018—2023年已獲臨床批件的PED商品疫苗主要包括豬傳染性胃腸炎（transmissiblegastroenteritisvirus，TGEV）、PEDV、豬德爾塔冠狀病毒（porcinedeltacortonavirus，PDCoV）三聯滅活疫苗，PEDV、豬輪狀病毒（porcinerotavirus，PoRV）二聯滅活疫苗，PDCoV、PEDV二聯滅活疫苗，TGEV、PEDV二聯活疫苗，PEDV滅活疫苗，PEDV基因工程亞單位疫苗。采用的毒株包括ZJ/15株、CHO-3G12株、J01株、HB17株、FJ-2013株、HuN16株、HX115株在內的PEDV流行變異毒株，這與當前豬場病毒性腹瀉流行情況相吻合。2024年在簽批發的PED商品疫苗主要圍繞豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯疫苗進行研發，采用的毒株主要包括CV777株、ZJ-08株、LW/L株、SCSZ-1株、AJ1102-R株，其中CV777株、ZJ-08株為PEDV經典毒株，LW/L株、SCSZ-1株、AJ1102-R株為變異毒株]。

4.2中藥及植物提取物

研究發現，多種中藥成分及植物提取物如甘草、穿心蓮、單寧酸等對PEDV有顯著抑制作用，其作用機制主要是直接抑制病毒復制、吸附和進入，抑制病毒在復制過程中關鍵酶和蛋白的活性，調節宿主細胞抗病毒免疫應答和腸黏膜免疫，以及調控細胞信號通路或抑制細胞因子等。

4.3益生菌

腸道菌群（GM）的改變將影響PEDV的感染，如普氏桿菌、擬桿菌和副球菌等優勢細菌比例降低可能會導致仔豬更易感染PEDV，仔豬感染PEDV后體內有益細菌數量下降，而腸炎魏氏梭菌數量顯著增加[1]。益生菌不僅可以維持腸道菌群結構平衡，還對致病菌的生長和繁殖起到抑制作用，國內外學者已借助益生菌抗PEDV感染進行了多項研究。研究發現，1：16的乳酸菌上清液（LAB-CFS）可顯著下調PEDV活性；地衣芽孢桿菌及其地衣芽孢桿菌粗提物（BLFP）具有明顯的抗PED作用；腸膜明串珠菌通過上調Vero細胞干擾素刺激基因15kDa蛋白（ISG15）和黏液病毒抗性蛋白1（MX1）表達來預防PEDV[10]

4.4綜合防控措施

豬場需做好生物安全管理，以防止PED感染。加強人員生物安全意識，凡進出豬場辦公區、生活區，進入生產區、豬舍的人員都必須進行隔離和消毒；豬場運豬車輛需在專門的車輛洗消中心進行徹底的清潔、消毒以及烘干等處理；食材需經兩級消毒后再轉入豬場廚房；生產區物資和生活區物資經熏蒸消毒和靜置后才能轉入物料倉庫；飼料卸至飼料中轉倉前，外部料車需進行第一輪洗消，再由場外飼料中轉車將飼料轉入中轉料塔。其次，做好分娩舍日常管理，分娩舍白天溫度不得低于 24^°C ，夜晚溫度不得低于20℃，濕度在 75% 以下為宜；飲水中添加電解多維、口服補液鹽等，以增強仔豬免疫力；密切關注豬的健康狀況，豬場一旦發生PED，需立即隔離病豬并進行全面消毒和緊急免疫，對死亡豬進行無害化處理。

結語

近年來PEDV在我國豬場較為活躍，流行毒株以G2型毒株為主，呈高陽性率和遺傳多樣性特點，這給PEDV感染的監測和防控構成了挑戰。隨著生物信息學分析和基因組測序的精度和速度不斷提高，基于新技術的PEDV檢測方法也逐漸朝著更加高效、靈敏和便捷的方向發展，使得對PEDV流行株變異情況的實時檢測成為可能。疫苗接種在防控PED過程中發揮了極其重要的作用，對中藥及植物提取物、益生菌制劑的研究也為PED的防控提供新路徑，未來可深人探索低聚木糖等中藥及植物提取物抑制PEDV的作用機制、提取工藝、療效與安全性，同時篩選抗PEDV的新型、有效且穩定的新型菌株。生產中更要從“人車物料”各方面做好生物安全防控措施。總之，PED的防控是一項系統性的工作，需要結合豬場的具體情況因場施策，才能有效防控和凈化PED。

參考文獻：

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[9]鄔沛伶，李依璇，王浩杰，等.豬流行性腹瀉疫苗研究進展［J].畜牧獸醫學報，2025，56（03）：1042-1058.

[10]張淑娟，牛錚，闞子斐，等.益生菌防治豬流行性腹瀉研究進展[J].中國獸醫雜志，2021，57（08）：64-69.

收稿日期：2025-08-14

作者簡介：謝旖（1991—），女，漢族，湖南省益陽市，碩士，副教授。研究方向：獸醫內科學。*通訊作者：代佳娣（1991—），女，土家族，貴州省遵義市，碩士，講師。研究方向：獸醫內科學。