2023一2024年雞傳染性貧血病的流行病學調查及防控策略

雞傳染性貧血病毒（chickeninfectiousanemiavirus，CIAV）是一種主要感染1～3周齡雛雞的免疫抑制性病原體，感染后可誘發再生障礙性貧血和系統性淋巴耗竭，造成宿主免疫機能嚴重降低并阻礙其生長，顯著增加繼發感染（病毒、細菌、真菌）的風險[1]。發病率和易感性隨著日齡增加而降低，有母源抗體保護的雛雞或大于3周齡的雞群感染后往往無明顯臨床癥狀。自1992年以來，雞傳染性貧血（CIA）在我國多個省份廣泛存在且感染率較高，盡管其致死率較低，但導致的免疫抑制對雞群的健康構成了雙重威脅：一方面增加其他疾病的易感性；另一方面也降低對馬立克氏病、傳染性法氏囊等疫苗的保護水平。這兩種效應的協同作用使雞群在面臨同時或繼發感染時死亡率明顯增加，給養禽業帶來重大經濟損失。本研究旨在通過流行病學調查，掌握CIAV在我國的流行規律，為制定科學有效的防控策略提供依據。

1材料與方法

1.1 材料

第一，檢測樣品。

本研究收集了2023年和2024年來自15個省市的疑似CIAV感染的病料，包括肝、脾、法氏囊、腎臟等組織。

第二，試劑與來源。

核酸提取試劑盒、PCR試劑盒、DNAMarkerDL2000、GelStain核酸染料：北京全式金生物技術有限公司；

瓊脂糖：BiowestAgarose瓊脂糖（西班牙產）；

50×TAE buffer：索萊寶公司。

第三，主要儀器與廠家。

超凈工作臺：蘇州凈化設備有限公司；

生物安全柜：北京東聯哈爾儀器制造有限公司；

高速組織研磨機：上海凈信實業發展有限公司；

離心機：ThermoFisher;

水浴鍋：北京陸希科技有限公司；

PCR儀：BIORAD;

電泳儀：北京六一生物科技有限公司；

凝膠成像儀：BIORAD;

電子天平：賽多利斯科學儀器（北京）有限公司；

移液器：eppendorf。

第四，引物設計與合成。

根據《出口禽組織中獸藥殘留檢測方法液相色譜—質譜/質譜法》（SN/T4053-2014）雞傳染性貧血檢疫技術規范，合成了用于樣本檢測的鑒定引物，引物序列如下：上游引物5'-AATGAACGCTCTCCAAGAAG-3'，下游引物5'-AGCGGATAGTCATAGTAGAT-3'，預期片段大小為 582bp 。

1.2方法

第一，病料處理。

取疑似CIAV感染的患病雞的肝臟、腎臟、脾臟、法氏囊等組織病料放入平血內，用無菌PBS（含4000IU雙抗）清洗。然后，將組織樣本剪碎，按照病料和PBS1：5的比例，加入含無菌PBS（含4000IU雙抗）的研磨管中，設置頻率為 60Hz ，研磨 120s 待研磨結束后將離心管放置在4 C 環境下離心，時間為 15min ，離心結束后吸取上清液保存在4 C 環境下以備后續實驗。

第二，樣本處理（以1個樣本為例，步驟同說明書）

一是加入 20μ LProteinaseK在一個無菌的 1.5mL 離心管中。加入 200μLBB5 ，渦旋混合 15s □

二是在離心管中加入 200μI 樣本，渦旋混合 15s_s 三是在 56^°C 環境下孵育 15min 0

四是加入 250μL 無水乙醇，渦旋 15s ，室溫放置5min 。

第三，樣本提取（以1個樣本為例，步驟同說明書）。

一是將離心管中內容物倒入離心柱中， 12 000g 離心 ?1min ，棄掉流出液。

二是加人 500μLWB5 ，12000g離心 1min ，棄掉流出液。

三是加入 500μLWB5 ，12000g離心 1min ，棄掉流出液。

四是室溫12000g離心 1min ，徹底去除殘留的乙醇。

五是將離心柱轉入一個新的 1.5mL 無酶離心管中，打開離心柱的蓋子，并向離心柱中央加入 30μL 的RNase-freeWater，室溫靜置 1min 。

六是室溫12000g離心 1min ，洗脫DNA。

七是將DNA放置 20^°C 環境中保存，備用。

第四，PCR檢測。

對提取的DNA進行擴增，擴增條件為95 °C 環境下預變性 3min ； 95°C 環境下變性 30s ， 55% 環境下退火 30s ， 72^°C 環境下延伸 45s ，共30個循環；最后72^°C 環境下延伸 7min 。將擴增產物進行 1.0% 瓊脂糖凝膠電泳鑒定，電泳條件為 150V ， 30min 。結束后用凝膠成像系統觀察并記錄結果。

2結果與分析

2.1PCR檢測結果

檢測結束后，擴增得到了582bp大小的條帶，符合預期大小。

在2023年62份疑似樣品中檢出14份CIAV陽性樣品（見圖1），陽性檢出率為 22.6% （見圖4）；在2024年112份疑似樣品中檢出40份CIAV陽性樣本（見圖2、圖3），陽性檢出率為 35.7% （見圖4）。CIAV感染率年度增幅達 13.1% 。檢測結果表明CIAV在國內雞群中普遍存在，感染率呈現上升趨勢。

圖12023年CIAV陽性樣本核酸電泳圖

圖22024年1-6月份CIAV陽性樣本核酸電泳圖

圖32024年7-12月份CIAV陽性樣本核酸電泳圖

圖42023年和2024年CIAV陽性檢出率變化

2.2VP1基因測序分型結果

根據VP1基因設計測序引物，并應用CIAV測序引物擴增2024年檢出的40份陽性樣本，經電泳確定，獲得的目的片段大小與結果一致。將擴增產物送蘇州金唯智生物科技有限公司測序。

將測序結果與NCBI下載的雞傳染性貧血核酸序列進行比較，繪制如下進化樹（見圖5、圖6）。

圖52024年1-6月份進化樹（紅色▲代表標準毒株）

圖62024年7—12月份進化樹（紅色 ▲ 代表標準毒株）

2.3 總結分析

通過以上分析，對2024年檢出的40份陽性樣本進行VP1基因測序分型，結果顯示基因A型占比較高，占比 85% ，基因C型占比 15% （見圖7）。這一結果有助于了解CIAV在我國流行的基因型分布特征。

從宿主來源看，2024年CIAV陽性樣本中，蛋雞樣本共計15份，肉雞（含黃雞和白雞）樣本共計25份（見圖7），由此可見，蛋雞和肉雞均存在高感染的壓力。

圖72024年CIAV的VP1分型比例及不同宿主間分布

3預防與控制

自2021年雞傳染性貧血病（CIA）在我國雞群中的檢出率逐年上升，陽性檢出地區和陽性宿主范圍持續擴大，覆蓋了白羽雞、黃羽雞和蛋雞的主要飼養地區。雖發病率和致死率不高，但該病引起的免疫抑制、并發或繼發感染，以及對馬立克、法氏囊等疫苗免疫效果的抑制，已經給我國家禽養殖業生產效益造成嚴重損失。為了防控其流行，必須強化生物安全防治措施，預防雞群CIAV的感染至關重要。

3.1加強生物安全

雞群對CIAV的易感性具有明顯的年齡特征，低日齡雞易感性高，隨日齡增長其易感性和發病率均下降。因此，針對易感高峰期的育雛前期和產蛋前期的雞群，實施嚴格的生物安全措施和科學的飼養管理，是防控CIAV感染和發病的有效途徑。

CIAV粒子小，對理化處理有較強抵抗力，對酚、酸性消毒劑比較敏感。因此要注意日常管理和衛生消毒措施，嚴格隔離生活區和飼養區，增加消殺頻次，加大消殺強度，減少或消滅環境中的病毒。落實日常飼養管理制度（如分區飼養、區域隔離、物流控制），阻斷傳播途徑，避免雛雞早期感染。嚴格控制引種檢疫工作，特別是產蛋雞群的引種和混群，避免該病毒傳入健康雞群。同時關注活疫苗的外源病毒污染風險，加強對禽用活疫苗的檢測工作。

3.2疫苗研發與應用

有效的母源抗體可保護雛雞抵抗CIAV的感染和傳播，因此疫苗免疫是控制CIAV感染的有效手段。通過疫苗免疫種雞以避免CIAV在雛雞間的垂直和水平傳播，降低雛雞CIA的發生率。目前商品化疫苗有兩種，第一種是雞胚生產的有毒力活疫苗，通過種雞飲水免疫有效防控子代發病；第二種是弱毒活疫苗，通過肌肉、皮下和刺翅對種雞免疫有效控制子代發病。如果后備種雞血清學抗體呈陽性反應，則不宜免疫接種。CIAV防控的兩個關鍵階段分別為避免雛雞早期感染和種雞產蛋期感染。充分利用有效母源抗體和日齡抗性這兩個有利因素。

3.3監測與隔離

鑒于CIAV可以垂直傳播導致后代雛雞感染，必須實施嚴格的凈化和防控措施。應定期開展雞群抽樣檢測，一旦檢出陽性個體應立即淘汰，并加強衛生管理，預防繼發感染和經濟損失[2]。引進種雞時，必須選擇專業正規的祖代雞場。養殖場須強化進出管理制度，原則上禁正外來人員（特別是同行獸醫、其他養殖者及畜禽交易從業人員）和車輛進入。確需進人者，須嚴格執行消毒程序，嚴防相關人員帶入外來病原[3]。加強檢測種雞群中CIAV抗體水平，避免經垂直傳播而導致子代禽體的疾病暴發，也可以檢驗疫苗免疫接種的效果。

結語

本研究通過流行病學調查和VP1基因測序分型，了解了CIAV在我國的流行規律和基因型分布特征。結果表明CIAV在國內雞群中普遍存在，以基因A型感染為主，不同品種的雞群感染率均較高，且呈逐年上升的趨勢。因此，需要加強生物安全防范及疫苗研發力度，重點做好雞群CIAV防控工作，以減少經濟損失并保障家禽產業的健康發展。

參考文獻：

[1]馮笑艷，胡明雪，林雨萌，劉長軍，李凱，祁小樂，崔紅玉，高立，王素艷，陳運通，王笑梅，張艷萍，高玉龍.雞群中雞傳染性貧血病原與抗體檢測及分離株VP1基因序列分析[J.中國家禽，2024，46（02）：52-58.

[2]馮杰.CIAV流行病學與河南分離株的生物學特性研究[D]導師：王新衛.河南農業大學，2020.

[3]周云.雞傳染性貧血病毒病的科學防控[J].當代畜牧，2023，（10）：92-93.

收稿日期：2025-08-04

作者簡介：謝妍（1988一），女，漢族，河北雄安新區，本科。研究方向：家禽病原檢測、抗體檢測等方面。