電針聯(lián)合蛇床子素對(duì)大鼠創(chuàng)傷性腦損傷的修復(fù)作用

創(chuàng)傷性腦損傷（TraumaticBrainInjury，TBI）是由機(jī)械外力直接或間接作用于大腦后，導(dǎo)致腦組織缺損和神經(jīng)功能改變的疾病，具有較高致殘率和致死率。目前臨床上的常規(guī)治療尚無法逆轉(zhuǎn)損傷的神經(jīng)功能。從全球范圍來看，創(chuàng)傷性腦損傷每年影響約1000萬(wàn)人的壽命。當(dāng)外力直接撞擊、快速加速或減速、刺入物體以及爆炸產(chǎn)生的沖擊波導(dǎo)致腦組織受損時(shí)，就會(huì)發(fā)生這種情況[1]。常見并發(fā)癥包括視覺損傷、認(rèn)知功能障礙、聽力損失及心理健康障礙等。

現(xiàn)行臨床治療方案（如手術(shù)與藥物治療）雖能控制急性期病情，但對(duì)神經(jīng)功能修復(fù)的效果有限，且長(zhǎng)期用藥易引發(fā)耐藥性與不良反應(yīng)。近年來，多項(xiàng)研究表明，中藥活性成分可通過調(diào)節(jié)調(diào)亡相關(guān)信號(hào)通路發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用，為腦病防治提供了新的思路。本團(tuán)隊(duì)前期研究發(fā)現(xiàn)，蛇床子素（osthole）作為中藥蛇床子的主要活性成分，在多個(gè)系統(tǒng)疾病中表現(xiàn)出臨床潛力。該成分能夠改善抑郁大鼠的行為表現(xiàn)，具有抗抑郁作用；還可通過擴(kuò)張血管和抗凋亡機(jī)制發(fā)揮神經(jīng)調(diào)節(jié)功能[2-3]。然而，蛇床子素能否促進(jìn)腦損傷后的運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)，尚待進(jìn)一步研究。

針灸是中醫(yī)療法之一，傳統(tǒng)針灸是用針刺，并通過捻轉(zhuǎn)等手法刺激穴位。而電針是用脈沖電流代替捻轉(zhuǎn)，達(dá)到刺激穴位效果的現(xiàn)代針灸療法。近年來電針療法的作用受到越來越多的關(guān)注和認(rèn)可，并且療效隨位置改變和刺激強(qiáng)度不同發(fā)生變化[4-5]。《黃帝內(nèi)經(jīng)》記載“頭者，精明之府”，強(qiáng)調(diào)頭部在人體生理活動(dòng)中的重要性。電針療法依據(jù)經(jīng)絡(luò)學(xué)說，通過刺激特定穴位，調(diào)節(jié)經(jīng)絡(luò)氣血運(yùn)行，達(dá)到通氣醒神、活血通絡(luò)之效。另外，針刺百會(huì)、水溝、風(fēng)府三個(gè)穴位有利于抑制神經(jīng)元凋亡并促進(jìn)腦損傷修復(fù)。如百會(huì)穴為諸陽(yáng)之會(huì)，電針刺激可激發(fā)陽(yáng)氣，促進(jìn)腦部氣血流通；水溝穴屬督脈，能醒腦開竅、復(fù)蘇神志；風(fēng)府穴位可驅(qū)腦府之風(fēng)邪[67]。三者配伍具有提神醒腦、醒神開竅的作用，可以用于治療腦部疾病，因此本研究選用百會(huì)、水溝、風(fēng)府作為電針療法的穴位[8-9]。

本實(shí)驗(yàn)擬采用聯(lián)合療法對(duì)腦損傷進(jìn)行修復(fù)，既能推動(dòng)中醫(yī)特色療法的現(xiàn)代化轉(zhuǎn)化，闡明電針與中醫(yī)藥協(xié)同作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，又可提升傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的國(guó)際認(rèn)可度，為中醫(yī)藥國(guó)際化提供循證支持。同時(shí)，其研究模式可為其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病的中西醫(yī)結(jié)合治療提供借鑒，促進(jìn)交叉學(xué)科發(fā)展。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

選擇60只雌性SD大鼠（體重為 200±20g ），由河南康達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供，動(dòng)物許可證號(hào)：SCXK（豫）2015-0004。大鼠飼養(yǎng)于南陽(yáng)醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校中心實(shí)驗(yàn)室，室溫保持在（ 25±2 ） C ，濕度維持在 50%～70% ，飼養(yǎng)環(huán)境固定在光暗交替周期為 12h/12h 循環(huán)中。本實(shí)驗(yàn)通過南陽(yáng)醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，對(duì)動(dòng)物的處理嚴(yán)格參照南陽(yáng)醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究指南進(jìn)行。

1.2主要儀器

普通光學(xué)顯微鏡、WQ-1002F韓氏多用電針儀、石蠟包埋機(jī)和石蠟切片機(jī)、腦立體定位儀、顱骨鉆等。

1.3造模方法與分組

第一，造模。造模前一天進(jìn)行24h的輕斷食。造模時(shí)用 0.1～0.2mL/100 g的戊巴比妥鈉進(jìn)行腹腔麻醉。將麻醉后的大鼠固定于腦定位儀上，沿頭部正中做1.5～2cm的縱形切口，暴露前兇，將腦立體定位儀調(diào)到兇門的正上方，進(jìn)行兇門定位。之后將定位儀向前移動(dòng) 1.0mm ，在中線旁 ：2.5mm 進(jìn)行定位，使用微型顱鉆磨除顱骨（直徑為 5mm ），保持硬腦膜完整，設(shè)置速度為 s進(jìn)行撞擊，充分止血消毒后縫合傷口。

第二，分組。選用健康雌性Wistar大鼠60只（體重 200±20g ）適應(yīng)性飼養(yǎng)7d后，隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、蛇床子素組、電針組和聯(lián)合組，每組12只。

1.4干預(yù)方法

造模10d后，模型組不進(jìn)行干預(yù)，電針組按照《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》《大鼠穴位圖譜的研制》等資料，依據(jù)大鼠體型與骨骼確定百會(huì)、水溝、風(fēng)府三個(gè)穴位，每天進(jìn)行刺激治療，1次/d；蛇床子素組每天按照 40mg/kg 劑量進(jìn)行灌胃，1次/d；聯(lián)合組每天同時(shí)進(jìn)行蛇床子素灌胃及電針治療，1次/d。

1.5觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法

療程結(jié)束后，觀察各組大鼠的前爪精細(xì)運(yùn)動(dòng)改變，觀察（a）每只爪子的調(diào)整次數(shù)，（b）進(jìn)食時(shí)間和（c）調(diào)整率（調(diào)整次數(shù)/調(diào)整時(shí)間）；

對(duì)大鼠進(jìn)行麻醉后，分別進(jìn)行心臟灌注和固定，隨后去除顱骨，將大鼠全腦完整取出，脫水后進(jìn)行石蠟包埋及切片。

通過對(duì)大腦切片的免疫熒光染色結(jié)果，判斷損傷區(qū)域神經(jīng)細(xì)胞凋亡水平，驗(yàn)證聯(lián)合治療是否可有效促進(jìn)腦損傷的組織修復(fù)。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所有數(shù)據(jù)使用SPSS26.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料符合正態(tài)分布，以均數(shù) ± 標(biāo)準(zhǔn)差表示。

采用單因素方差分析，進(jìn)行組間統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。以 Plt;0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的標(biāo)準(zhǔn)。

1.7技術(shù)路線圖

見圖1。

圖1實(shí)驗(yàn)步驟

2結(jié)果

2.1前爪調(diào)整次數(shù)定量評(píng)分

與同時(shí)點(diǎn)假手術(shù)組比較，模型組前爪的調(diào)整次數(shù)顯著下降，說明未治療組未能明顯改善運(yùn)動(dòng)功能的損傷（ Plt;0.000 1 ）。治療21d后，與同時(shí)點(diǎn)模型組比較，聯(lián)合組前爪的調(diào)整次數(shù)顯著提升（ Plt;0.000 1 ），而蛇床子素組和電針組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明單一治療組未有明顯改善（ P≥0.05 ），見圖2。

2.2前爪運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分

與同時(shí)點(diǎn)假手術(shù)組比較，模型組進(jìn)食意面的時(shí)間顯著延長(zhǎng)，說明未治療組未能明顯改善前爪運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié)功能的損傷（ Plt;0.000 1 ）。治療21d后，與同時(shí)點(diǎn)模型組比較，聯(lián)合組前爪的進(jìn)食時(shí)間顯著縮短（ Plt;0.05 ），而蛇床子素組和電針組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明單一治療組未有明顯改善（ P≥0.05 ），見圖3。

圖2各組大鼠右前爪抓取次數(shù)比較

圖3各組大鼠進(jìn)食意面時(shí)間比較

圖4各組大鼠前爪綜合抓握評(píng)分比較

2.3前爪抓握功能評(píng)分

與同時(shí)點(diǎn)假手術(shù)組比較，模型組前爪抓握評(píng)分顯著降低，說明未治療組未能明顯改善前爪協(xié)調(diào)抓握功能的損傷（ Plt;0.000 1 ）。治療21d后，與同時(shí)點(diǎn)模型組比較，聯(lián)合組前爪的前爪協(xié)調(diào)抓握評(píng)分顯著提高（ Plt;0.05 ），而蛇床子素組和電針組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明單一治療組未有明顯改善（ P≥0.05 ），見圖4。

2.4腦組織TUNEL陽(yáng)性率

與假手術(shù)組相比，模型組TUNEL表達(dá)量顯著增高（ Plt;0.01 ）；與模型組相比，單一治療組（蛇床子素組和電針組）TUNEL表達(dá)量有降低趨勢(shì)，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P≥0.05 ）；與模型組相比，聯(lián)合治療組TUNEL表達(dá)量顯著降低（ Plt;0.01 ），說明蛇床子素聯(lián)合電針治療能夠顯著降低損傷腦組織的凋亡水平，見圖5。

研究表明，創(chuàng)傷性腦損傷臨床發(fā)病率近年來逐年上升，且致死率和致殘率較高，疾病會(huì)給患者的生活造成很大的困擾，腦損傷后神經(jīng)功能恢復(fù)是臨床治療的核心難題，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雖能通過手術(shù)減壓、神經(jīng)保護(hù)藥物等手段干預(yù)急性期損傷，但對(duì)繼發(fā)性炎癥反應(yīng)、神經(jīng)再生障礙等核心病理環(huán)節(jié)的調(diào)控仍存在局限。

蛇床子素作為傘形科植物蛇床子的主要活性成分，其臨床應(yīng)用研究已覆蓋多個(gè)系統(tǒng)疾病，且循證證據(jù)不斷積累。電針療法作為針灸學(xué)與現(xiàn)代電刺激技術(shù)結(jié)合的產(chǎn)物，其臨床應(yīng)用已積累了豐富的研究經(jīng)驗(yàn)，在神經(jīng)系統(tǒng)、運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)及疼痛管理等領(lǐng)域展現(xiàn)出明確療效；電針刺激能夠激活交感神經(jīng)，調(diào)節(jié)炎癥，有效減輕創(chuàng)傷性腦損傷后的腦組織水腫及炎性反應(yīng)，促進(jìn)損傷神經(jīng)的功能恢復(fù)[1]。電針與中醫(yī)藥作為中醫(yī)特色療法，在腦損傷治療中展現(xiàn)出協(xié)同優(yōu)勢(shì)。

圖5各組大鼠TUNEL陽(yáng)性率比較

結(jié)語(yǔ)

電針聯(lián)合中醫(yī)藥治療腦損傷在機(jī)制研究與臨床療效上均顯示出獨(dú)特價(jià)值，隨著研究方法的成熟與方案的優(yōu)化，有望成為腦損傷康復(fù)治療的重要手段，二者聯(lián)合應(yīng)用的協(xié)同效應(yīng)為改善患者預(yù)后提供有效途徑，也為臨床提供了新方向，具有廣闊的轉(zhuǎn)化應(yīng)用前景[1]。從學(xué)科發(fā)展視角，電針與中醫(yī)藥的聯(lián)合干預(yù)恰好體現(xiàn)了多靶點(diǎn)、多環(huán)節(jié)調(diào)控的特點(diǎn)，為開發(fā)新型聯(lián)合治療策略奠定基礎(chǔ)，最終實(shí)現(xiàn)從“經(jīng)驗(yàn)醫(yī)學(xué)”向“精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)”的跨越，為改善腦損傷患者預(yù)后提供科學(xué)保障。

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收稿日期：2025-08-21

作者簡(jiǎn)介：張珊（1988—），女，回族，河南省南陽(yáng)市，本科，中級(jí)。研究方向：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)。