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電針聯合蛇床子素對大鼠創傷性腦損傷的修復作用

2025-11-09 00:00:00張珊
中國動物保健 2025年9期

創傷性腦損傷(TraumaticBrainInjury,TBI)是由機械外力直接或間接作用于大腦后,導致腦組織缺損和神經功能改變的疾病,具有較高致殘率和致死率。目前臨床上的常規治療尚無法逆轉損傷的神經功能。從全球范圍來看,創傷性腦損傷每年影響約1000萬人的壽命。當外力直接撞擊、快速加速或減速、刺入物體以及爆炸產生的沖擊波導致腦組織受損時,就會發生這種情況[1]。常見并發癥包括視覺損傷、認知功能障礙、聽力損失及心理健康障礙等。

現行臨床治療方案(如手術與藥物治療)雖能控制急性期病情,但對神經功能修復的效果有限,且長期用藥易引發耐藥性與不良反應。近年來,多項研究表明,中藥活性成分可通過調節調亡相關信號通路發揮神經保護作用,為腦病防治提供了新的思路。本團隊前期研究發現,蛇床子素(osthole)作為中藥蛇床子的主要活性成分,在多個系統疾病中表現出臨床潛力。該成分能夠改善抑郁大鼠的行為表現,具有抗抑郁作用;還可通過擴張血管和抗凋亡機制發揮神經調節功能[2-3]。然而,蛇床子素能否促進腦損傷后的運動功能恢復,尚待進一步研究。

針灸是中醫療法之一,傳統針灸是用針刺,并通過捻轉等手法刺激穴位。而電針是用脈沖電流代替捻轉,達到刺激穴位效果的現代針灸療法。近年來電針療法的作用受到越來越多的關注和認可,并且療效隨位置改變和刺激強度不同發生變化[4-5]。《黃帝內經》記載“頭者,精明之府”,強調頭部在人體生理活動中的重要性。電針療法依據經絡學說,通過刺激特定穴位,調節經絡氣血運行,達到通氣醒神、活血通絡之效。另外,針刺百會、水溝、風府三個穴位有利于抑制神經元凋亡并促進腦損傷修復。如百會穴為諸陽之會,電針刺激可激發陽氣,促進腦部氣血流通;水溝穴屬督脈,能醒腦開竅、復蘇神志;風府穴位可驅腦府之風邪[67]。三者配伍具有提神醒腦、醒神開竅的作用,可以用于治療腦部疾病,因此本研究選用百會、水溝、風府作為電針療法的穴位[8-9]。

本實驗擬采用聯合療法對腦損傷進行修復,既能推動中醫特色療法的現代化轉化,闡明電針與中醫藥協同作用的物質基礎,又可提升傳統醫學的國際認可度,為中醫藥國際化提供循證支持。同時,其研究模式可為其他神經系統疾病的中西醫結合治療提供借鑒,促進交叉學科發展。

1 材料與方法

1.1實驗動物

選擇60只雌性SD大鼠(體重為 200±20g ),由河南康達實驗動物有限公司提供,動物許可證號:SCXK(豫)2015-0004。大鼠飼養于南陽醫學高等專科學校中心實驗室,室溫保持在( 25±2 ) C ,濕度維持在 50%~70% ,飼養環境固定在光暗交替周期為 12h/12h 循環中。本實驗通過南陽醫學高等專科學校實驗動物倫理委員會批準,對動物的處理嚴格參照南陽醫學高等專科學校實驗動物研究指南進行。

1.2主要儀器

普通光學顯微鏡、WQ-1002F韓氏多用電針儀、石蠟包埋機和石蠟切片機、腦立體定位儀、顱骨鉆等。

1.3造模方法與分組

第一,造模。造模前一天進行24h的輕斷食。造模時用 0.1~0.2mL/100 g的戊巴比妥鈉進行腹腔麻醉。將麻醉后的大鼠固定于腦定位儀上,沿頭部正中做1.5~2cm的縱形切口,暴露前兇,將腦立體定位儀調到兇門的正上方,進行兇門定位。之后將定位儀向前移動 1.0mm ,在中線旁 :2.5mm 進行定位,使用微型顱鉆磨除顱骨(直徑為 5mm ),保持硬腦膜完整,設置速度為 s進行撞擊,充分止血消毒后縫合傷口。

第二,分組。選用健康雌性Wistar大鼠60只(體重 200±20g )適應性飼養7d后,隨機分為假手術組、模型組、蛇床子素組、電針組和聯合組,每組12只。

1.4干預方法

造模10d后,模型組不進行干預,電針組按照《實驗針灸學》《大鼠穴位圖譜的研制》等資料,依據大鼠體型與骨骼確定百會、水溝、風府三個穴位,每天進行刺激治療,1次/d;蛇床子素組每天按照 40mg/kg 劑量進行灌胃,1次/d;聯合組每天同時進行蛇床子素灌胃及電針治療,1次/d。

1.5觀察指標及檢測方法

療程結束后,觀察各組大鼠的前爪精細運動改變,觀察(a)每只爪子的調整次數,(b)進食時間和(c)調整率(調整次數/調整時間);

對大鼠進行麻醉后,分別進行心臟灌注和固定,隨后去除顱骨,將大鼠全腦完整取出,脫水后進行石蠟包埋及切片。

通過對大腦切片的免疫熒光染色結果,判斷損傷區域神經細胞凋亡水平,驗證聯合治療是否可有效促進腦損傷的組織修復。

1.6統計學處理

所有數據使用SPSS26.0軟件進行統計學分析。計量資料符合正態分布,以均數 ± 標準差表示。

采用單因素方差分析,進行組間統計學分析。以 Plt;0.05 為差異有統計學意義的標準。

1.7技術路線圖

見圖1。

圖1實驗步驟

2結果

2.1前爪調整次數定量評分

與同時點假手術組比較,模型組前爪的調整次數顯著下降,說明未治療組未能明顯改善運動功能的損傷( Plt;0.000 1 )。治療21d后,與同時點模型組比較,聯合組前爪的調整次數顯著提升( Plt;0.000 1 ),而蛇床子素組和電針組無統計學意義,表明單一治療組未有明顯改善( P≥0.05 ),見圖2。

2.2前爪運動功能評分

與同時點假手術組比較,模型組進食意面的時間顯著延長,說明未治療組未能明顯改善前爪運動調節功能的損傷( Plt;0.000 1 )。治療21d后,與同時點模型組比較,聯合組前爪的進食時間顯著縮短( Plt;0.05 ),而蛇床子素組和電針組無統計學意義,表明單一治療組未有明顯改善( P≥0.05 ),見圖3。

圖2各組大鼠右前爪抓取次數比較

圖3各組大鼠進食意面時間比較

圖4各組大鼠前爪綜合抓握評分比較

2.3前爪抓握功能評分

與同時點假手術組比較,模型組前爪抓握評分顯著降低,說明未治療組未能明顯改善前爪協調抓握功能的損傷( Plt;0.000 1 )。治療21d后,與同時點模型組比較,聯合組前爪的前爪協調抓握評分顯著提高( Plt;0.05 ),而蛇床子素組和電針組無統計學意義,表明單一治療組未有明顯改善( P≥0.05 ),見圖4。

2.4腦組織TUNEL陽性率

與假手術組相比,模型組TUNEL表達量顯著增高( Plt;0.01 );與模型組相比,單一治療組(蛇床子素組和電針組)TUNEL表達量有降低趨勢,但無統計學意義( P≥0.05 );與模型組相比,聯合治療組TUNEL表達量顯著降低( Plt;0.01 ),說明蛇床子素聯合電針治療能夠顯著降低損傷腦組織的凋亡水平,見圖5。

研究表明,創傷性腦損傷臨床發病率近年來逐年上升,且致死率和致殘率較高,疾病會給患者的生活造成很大的困擾,腦損傷后神經功能恢復是臨床治療的核心難題,現代醫學雖能通過手術減壓、神經保護藥物等手段干預急性期損傷,但對繼發性炎癥反應、神經再生障礙等核心病理環節的調控仍存在局限。

蛇床子素作為傘形科植物蛇床子的主要活性成分,其臨床應用研究已覆蓋多個系統疾病,且循證證據不斷積累。電針療法作為針灸學與現代電刺激技術結合的產物,其臨床應用已積累了豐富的研究經驗,在神經系統、運動系統及疼痛管理等領域展現出明確療效;電針刺激能夠激活交感神經,調節炎癥,有效減輕創傷性腦損傷后的腦組織水腫及炎性反應,促進損傷神經的功能恢復[1]。電針與中醫藥作為中醫特色療法,在腦損傷治療中展現出協同優勢。

圖5各組大鼠TUNEL陽性率比較

結語

電針聯合中醫藥治療腦損傷在機制研究與臨床療效上均顯示出獨特價值,隨著研究方法的成熟與方案的優化,有望成為腦損傷康復治療的重要手段,二者聯合應用的協同效應為改善患者預后提供有效途徑,也為臨床提供了新方向,具有廣闊的轉化應用前景[1]。從學科發展視角,電針與中醫藥的聯合干預恰好體現了多靶點、多環節調控的特點,為開發新型聯合治療策略奠定基礎,最終實現從“經驗醫學”向“精準醫學”的跨越,為改善腦損傷患者預后提供科學保障。

參考文獻:

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收稿日期:2025-08-21

作者簡介:張珊(1988—),女,回族,河南省南陽市,本科,中級。研究方向:基礎醫學。

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