近年來,隨著養雞業的規模化、集約化發展,雞傳染性支氣管炎的發病頻率和危害程度持續上升,特別是在疫病防控體系不健全的地區,該病的流行更為嚴重,由于IBV的高變異性和免疫逃逸能力,為更好地防控該種疾病就需要深入研究雞傳染性支氣管炎的流行病學特征,掌握其傳播規律和致病機制,然后制定出科學有效的防控策略,以提高養殖業的疫病防控能力。
1流行特點
雞傳染性支氣管炎的流行特點呈現鮮明的時間與群體特征,養殖場中在5~10月份的夏秋季節呈高發趨勢,高溫高濕(平均溫度 525‰ ,濕度 gt;65% ),能有效延長病毒在環境中的存活時間,導致發病率顯著升高。另外,春秋季晝夜溫差 gt;8 ℃時,雞群會出現應激反應,從而導致其免疫力下降,增加了疫情暴發風險。該種疾病呈現出地域性聚集的特點,在高密度養殖模式下,疾病呈現出高發流行的趨勢。若養殖場周邊3公里內存在活禽交易市場,則會增加輸入風險[1]。
2 臨床癥狀
IB的臨床表現和病理損傷因其毒株類型、宿主日齡、免疫狀態及混合感染情況而存在差異。呼吸道型臨床癥狀表現為咳嗽、啰音、伸頸呼吸、流涕,雛雞死亡率為 15%~20% ;腎病型臨床癥狀表現為飲水量增加 30% 、水樣腹瀉、糞便含白色尿酸鹽、脫水、皮膚皺縮、精神狀態沉郁,死亡率為 5%~10% ;生殖道型臨床癥狀表現為蛋雞產蛋率下降,達不到產蛋高峰期、薄殼蛋/畸形蛋率顯著升高、蛋清稀薄。
3病理學變化
呼吸道病變主要表現為黏膜充血、出血,腔內含有黃色黏液或干酪樣栓子,有時還能夠觀察到氣管環狀出血,肺臟充血水腫,支氣管周圍有淋巴細胞浸潤。腎臟病變主要表現為腎臟腫大、蒼白,腎小管擴張,表面呈“雪花樣”尿酸鹽沉積,輸尿管增粗,內含白色結晶物。不同年齡雞群的生殖系統也會出現損傷,雛雞表現為發育停滯,成年雞萎縮,黏膜水腫,卵泡破裂,部分病例見卵黃性腹膜炎,成熟卵泡減少,出血性退化,組織學觀察可以發現氣管黏膜纖毛脫落,上皮細胞壞死,有大量淋巴細胞和漿細胞浸潤,腎小管上皮細胞變性壞死,間質淋巴細胞浸潤,尿酸鹽結晶沉積,輸卵管黏膜的假復層纖毛柱狀上皮脫落,腺體萎縮,呈現纖維化[2]。
4實驗室診斷
4.1病料采集
針對雞傳染性支氣管炎(IB)當前臨床診斷最常用的方法是RT-PCR檢測,采集病雞的氣管拭子或肺/腎組織,或者采集泄殖腔拭子、盲腸扁桃體或糞便,拭子使用無菌滌綸拭子,浸入含1mL病毒保存液的離心管中,組織樣本取0.5g組織,剪碎后加入1mLTRIzol或專用RNA保存液,在 .80°C 條件下凍存,避免反復凍融。
4.2RNA提取
RNA以磁珠法為主,使用商品化的磁珠法RNA提取試劑盒(如TIANGENDP431),并準備好生物安全柜、離心機、渦旋振蕩器。將 200μI 樣本液與 500μL 裂解液充分混勻,室溫靜置 5min ,加入 50μL 磁珠懸液,渦旋 10s ,室溫孵育 3min ,磁力吸附棄上清,用 700μ LWashBuffer洗滌兩次,每次磁吸后棄液,加入 50μ LRNase-free水,渦旋混勻,磁吸后取上清,立即用于反轉錄酶,在 -20°C 條件下暫存,加入內參(如雞 β -actin基因)判斷RNA完整性,若為OD260/280=1.8-2.0 ,表明純度合格。
4.3引物與探針設計
根據IBVS1基因保守區及雄縣流行毒株的特點,設計多重RT-PCR引物和探針,通用IBV正向引物(F1)CGTTGGAACATGTGTAACCA,目的產物大小為500 bp,反向引物(RI)GTACTCACACCAGTCATCA,QX型探針(FAM標記)FAM-TGGCAAGGTGACACCGTA-BHQ1,目的產物大小為 300bp ,TW-型探針(HEX標記)HEX-CCATGCCTGACAATTGCT-BHQ1,目的產物大小為250bp[3] 。
4.4反轉錄(RT)與PCR擴增
20μL 的反轉錄體系是RNA模板: 5μL
5× RTBuffer: 4μL 、dNTPs( 10mM ): 1μL 、隨機引物( 50μM) : 1μL, 逆轉錄酶( 200U/μL ): 1μL RNase抑制劑( 40UμL ): 05μL 、去離子水: 75μL 反應條件為:在25℃條件下反應5min→在42℃條件下反應
在85 C 條件下反應5s(滅活酶)。 25μLPCR 擴增體系為cDNA模板: 2μL , -2x TaqMasterMix:12.5μL 、通用引物( 10μM ):各 0.5μL 、特異性探針( 10μM :各 0.5μL 、去離子水: 9μL ,預變性:在95°C 條件下反應3min,循環(40次):在95 °C 條件下反應15
在55 °C 條件下反應 30s (熒光采集) $$ 在72 °C 條件下反應 30so
4.5結果判讀與分型
常規PCR ?+ 電泳(若無雙熒光通道設備)主要是擴增后取5 μL 產物進行 1.5% 瓊脂糖凝膠電泳(電壓為 120V ,時間為 20min ),EB染色后進行紫外成像,陽性樣本顯示為 500bp (通用)及分型條帶。
5治療方案
在進行西藥治療時,主要以加速黏膜恢復和增強抗感染能力為出發點,在雞群的飲用水中可以添加恩諾沙星可溶粉、黃芪多糖可溶粉以及維生素C可溶粉,添加量分別為 2.5g/L 、 400mg/L 和 500mg/L ,1次/d,連續飲水 3~5d 在進行中藥治療時,主要進行辨證施治。急性期主要辨證為風熱犯肺型,推薦使用銀翹散加減。中藥方劑為:金銀花 30g 、連翹 30g 、桔梗20g 、薄荷 15g 、牛蒡子 20g 、甘草 10g (每100只雞每日用量),加水 800mL ,煎煮至剩余藥液為 300mL ,按照 5% 的比例添加到飲用水中,1次/d,連用 5d 重癥期主要辨證為肺熱壅盛型,推薦使用麻杏石甘湯加減。中藥方劑為:麻黃 10g 、杏仁 20g 、石膏 ?50g 、黃芩 20g 、桑白皮 20g 、甘草 10g (每100只雞每日用量),加水 800mL ,煎煮至剩余藥液 250mL ,稀釋10倍供飲用,連用5~7d,恢復期可以在整個雞群的飼料中添加扶正解毒散,中藥方劑為:黃芪 30g 、黨參 20g 、白術 20g 、茯苓 20g 、板藍根 30g 、甘草10g ,粉碎后按 1% 比例拌料,連用7d,以增強其免疫力。
6綜合預防
6.1完善疫苗免疫程序
在開展疫苗免疫接種過程中,要注重完善疫苗免疫接種程序。1~3日齡雛雞用H120+QX型二聯苗滴鼻(1羽份)。在14日齡時使用滅活苗(含TW-I型)加強免疫,肌注 0.3mL 只。蛋雞開產前換用生殖道型多價苗,如M41+4/91株,肌注 0.5mL 只。免疫接種之后,應定期抽檢抗體水平,并進行ELISA檢測,S/P值 ≥2.0 為合格,免疫后14d抗體不達標者進行補免。
6.2生物安全管理
生產環節應將整個養殖區域劃分為生產區、隔離區、廢棄物處理區。隔離區域主要用于對新引進的雞群進行隔離觀察,廢棄物處理區域要距離雞舍 50mL 上,嚴格執行“進場淋浴一更衣一消毒”的操作流程,工作服每日進行紫外照射 30min ,運輸車輛用 3% 過氧乙酸噴霧,用量為 300mL/m3 ,密閉 30min. 后沖洗;飼料袋、蛋托等采用臭氧熏蒸,濃度
,作用2 h
6.3環境控制標準
生產環節要注重做好雞舍溫濕度調控。雛雞期雞舍溫度應保持在 33~35°C ,濕度應保持在 60%~65% 以防止呼吸道黏膜干燥;育成期溫度應保持在20~25‰ ,濕度應保持在 50%~55% ,以抑制氣溶膠傳播。在此基礎上,要注重做好通風換氣工作。冬季最小通風量為 0.7m3/(h?kg) ,夏季為 2.0m3/(h?kg) ,氨濃度 lt;15ppm 。雞舍采用負壓風機
側墻進風口,風速 ≤2m/s ,以避免出現冷應激。
6.4飼養管理優化
生產環節要注重加強養殖密度調控。平養模式下白羽肉雞 ≤12 只 /m2 ,籠養模式下蛋雞 ≤6 只 /m2 。在疾病發病高峰期,要注重加強營養強化。飲用水中應添加維生素C可溶粉 500mg/L ,飼料中添加硒酵母 0.3mg/kg ,以提高其黏膜免疫力。每日應清洗水線,用 1% 的檸檬酸進行沖洗,抑制水中病原繁殖。
結語
總之,IBV的持續變異、跨宿主傳播潛力及環境介導的傳播途徑,要求防控策略必須突破單一依賴疫苗或藥物的傳統模式,轉向為多維度、動態化的綜合管理。在開展疾病診斷過程中,需要依托分子診斷技術并實現早期預警與毒株分型,結合疫苗設計的精準迭代以應對病毒進化。在此基礎上,強化生物安全管理,通過環境調控阻斷傳播鏈,并推動中西醫結合治療在緩解臨床癥狀、保護靶器官中的協同作用。
參考文獻:
[1]陳玉勝.雞傳染性支氣管炎的流行病學特征及防控策略[J].畜牧業環境,2024,(19):77-78.
[2]袁穎琳.雞傳染性支氣管炎流行特點與防控難點分析[J]中國動物保健,2023,25(9):50-51.
[3]李橋生,賀初勤.禽傳染性支氣管炎的流行病學與綜合防控措施[J].畜牧業環境,2024,(11):98-99.
收稿日期:2025-08-06
作者簡介:李永超(1977—),男,漢族,河北省滄州市,本科,高級獸醫師。研究方向:動物疫病防控、動物醫學。
*通訊作者:李昕(1973—),男,滿族,吉林省通化市,獸醫師。研究方向:畜牧獸醫。