一種檢驗長效多西環素注射劑安全性的方法

摘要：介紹了用肌肉(血管)刺激性試驗來測定長效多西環素注射劑安全性的方法，應用該方法的試驗結果表明，20％濃度的長效多西環素注射劑的局部試驗對動物肌肉血管的刺激性較弱，符合安全性試驗標準。

關鍵詞：刺激性；多西環素注射劑；安全性；制劑；活性成分

中圖分類號：R965.3文獻標識碼：A文章編號：1006—6500(2008)03—0025—02

多西環素(Doxycycline)是四環素類抗生素，其抗菌譜廣，臨床上應用于立克次體、支原體、衣原體及回歸熱螺旋體等非細菌所致的呼吸道性感染和布氏桿菌病，以及敏感菌、膽道、尿路及皮膚軟組織等部位的感染。此外，多西環素還有許多非抗菌作用，例如該藥物還具有消除和抑制中性粒細胞產生的氧自由基的作用，抗炎作用，以及抗甲狀腺、抗逆轉錄病毒、抗潰瘍的作用。但近年來，隨著長效多西環素在臨床上的大量應用，其安全性問題成為人們廣泛討論的熱點。本研究主要介紹了用肌肉(血管)刺激性試驗來測定長效多西環素注射劑安全性的方法。此方法簡單易行，檢測效果可靠，不僅能測定活性成分的刺激性，也能測定制劑中其他成分的刺激性。因此，具有很好的臨床應用前景。

1 材料和方法

1.1 材料

試驗器具：移液器(購于上海滬西分析儀器有限公司)，一次性無菌注射器(購于揚州長城醫療器械有限公司)，酒精棉球，剪毛剪，解剖剪，燒杯，一次性手套(均取自揚州大學藥理實驗室)。

試驗動物：取體質量2kg以上的健康家兔4只，雌性應無孕(揚州大學藥理實驗室)。

試劑：鹽酸多西環素注射劑(濃度為20％)。

1.2 方法

取體質量2kg以上的健康家兔兩只，分別在其左右兩腿股四頭肌內以無菌操作方法各注射供試品1mL，注射后48h處死動物，解剖取出股四頭肌，縱向切開，觀察注射部位局部刺激反應，評價標準如表1。再取取體質量2kg以上的健康家兔兩只，操作同上，在注射7d后處死動物，解剖取出股四頭肌，縱向切開，觀察注射部位局部刺激反應病變的消退情況。

1.3 試驗結果評定方法

計算出4塊股四頭肌反應級的總和。如果股四頭肌的最高與最底組之差大于2時，則另取兩只家兔重新試驗。在初試或重試的兩只家兔四塊股四頭肌反應級之和小于10時，則認為供試品的局部試驗符合規定，但連續注射7d以上，其總和應小于6。

2 結果與分析

本試驗先對2只雌性無孕家兔進行初步刺激性試驗，結果四條腿的股四頭肌基本為中度出血，有的出血斑顏色較深，且有散在出血點，無肌肉變性現象。反應級別為1～2級，總合為7級，小于10級，且最高與最低組的級別之差小于2(表2)。試劑注射入試驗動物48h后，動物食欲與飲欲稍下降，且四肢從外觀上觀察無明顯變化，運動正常。接著對另外2只雌性無孕兔進行初步刺激性試驗，6d后解剖，結果四條腿的股四頭肌基本為輕度出血，有的具有散在出血點的痕跡，無肌肉變性現象，反應級別為1級左右，總合為5級，小于6級，且最高與最低組的級別之差小于2(表3)。7d后試驗動物的肌肉病變明顯改善。試劑注射入試驗動物7d內，動物食欲與飲欲無明顯下降，四肢從外觀上觀察無明顯變化，起初幾天動物喜蜷腿，后幾天運動正常。

因此，試驗表明20％濃度的供試品的局部試驗對動物肌肉血管的刺激性較弱，符合安全性試驗標準。

3 討論

利用該方法試驗時，要注意下列幾點：確定好肌肉注射位置，注射前應確定好進針位置，最好選擇肌肉豐富處進針，進針的深度不宜太深，否則影響藥效；解剖前注意給動物禁食，禁水，避免動物應激性反應；解剖時注意肌肉的完整性，避免對肌肉的不必要損傷，否則影響肉眼觀察的結果；試驗刺激性出血結果應注意與解剖時血管破裂出血相區別。

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