CRP cTnT TSLP miR-30c-5p水平與穩定型心絞痛患者冠狀動脈病變嚴重程度關系

黃玉冰, 廖 旺

(海南省人民醫院/海南醫學院附屬海南醫院心血管內科, 海南 海口 570311)

冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(Coronary atherosclerotic heart disease,CHD)簡稱冠心病，是因為動脈粥樣硬化導致的心血管疾病[1]。穩定型心絞痛(Stable angina pectoris,SAP)是最常見的CHD類型之一，系因勞累過度導致的心肌缺血，出現胸部及周圍部位不適感的一類疾病，可伴有一定程度的心功能障礙，好發于40歲以上的男性群體[2]。研究表明，SYNTAX評分是基于冠狀動脈造影(Coronary arteriongraphy,CAG)結果評估冠狀動脈病變嚴重程度的一種手段，但其評估過程復雜且耗時較長[3]。因此，尋找能快速準確反映冠狀動脈病變嚴重程度的生物學指標對改善SAP患者的預后尤為重要[4]。本研究探討了C反應蛋白(CRP)、血清肌鈣蛋白T(cTnT)、胸腺基質淋巴細胞生成素(TSLP)、miR-30c-5p水平與SAP患者冠狀動脈病變嚴重程度的關系，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料:回顧性分析2016年5月至2019年5月間醫院收治的經CAG證實的90例SAP患者的臨床資料，根據SYNTAX評分分為輕度組(0～22分，41例)、中度組(23～32分，32例)、重度組(≥33分，17例)。納入標準：①經CAG證實存在一支或以上冠狀動脈狹窄≥50%；②年齡≤75歲。排除標準：①合并嚴重心、肝、肺、腎等臟器功能不全患者；②惡性腫瘤患者；③合并血液系統疾病患者；④過往卒中、急性心梗、心律失常、經皮冠狀動脈介入治療、冠狀動脈旁路移植術史患者；⑤不穩定性心絞痛患者；⑥合并瓣膜性心臟病、慢性肺組疾病患者；⑦CAG禁忌(對碘或造影劑過敏、電解質紊亂等)患者；⑧合并感染性、炎癥性疾病患者。輕度組中，男30例、女11例，年齡為40～75歲，平均(57.63±9.61)歲。中度組中，男23例、女9例，年齡為42～74歲，平均(57.70±9.64)歲。重度組中，男12例、女5例，年齡為41～75歲，平均(57.80±9.70)歲。

1.2方法:收集患者的性別、年齡、病程、體質指數(BMI)、吸煙史、糖尿病、高血壓、高脂血癥、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)等一般資料。CAG檢查：使用島津國際貿易(上海)有限公司生產的Bransist Safire型號心血管造影系統行CAG檢查。采用Judkins法分別經橈動脈或股動脈入路完成左右冠狀動脈造影，多體位投照，左冠狀動脈6個體位，右冠狀動脈3個體位。造影結果由兩名資深介入心臟外科醫師評估，采用目測直徑法分析冠狀動脈狹窄程度。并將造影結果輸入至SYNTAX官網中的SYNTAX評分系統中，獲得SYNTAX分值，其中SYNTAX評分為0～22分則為冠狀動脈輕度病變、23～32分則為冠狀動脈中度病變、≥33分則為冠狀動脈重度病變。CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平檢測：采集5ml患者入院后第2d清晨空腹狀態肘靜脈血，室溫下靜置30min，3000r/min，離心處理15min，分離血清，取上層血清，-80℃冷存待檢。①CRP：采用固相夾心法法檢測樣本中的CRP水平，試劑盒由上海酶聯生物科技有限公司提供，嚴格按照試劑盒說明書進行操作，結果使用貝克曼庫爾特AU5800全自動生化分析儀判讀；②cTnT：采用電化學發光法檢測樣本中的cTnT水平，試劑盒由德國羅氏公司提供，嚴格按照試劑盒說明書進行操作，結果使用Cobas e 601電化學發光全自動免疫分析系統判讀；③TSLP：采用酶聯免疫吸附法檢測樣本中的TSLP水平，試劑盒由武漢默沙克生物科技有限公司提供，嚴格按照試劑盒說明書進行操作，結果使用貝克曼庫爾特AU5800全自動生化分析儀判讀；④miR-30c-5p：采用實時定量聚合酶鏈反應(RT-qPCR)法檢測樣本中的miR-30c-5p水平，提取樣本中總DNA后分析行測定RNA純度及濃度、逆轉錄、熒光定量PCR擴增等操作，內參基因為cel-miR-39，并采用2-△△CT法測定miR-30c-5p水平。

1.3觀察指標:比較三組患者的CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平及SYNTAX評分。

2 結 果

表1 三組患者的一般資料比較

2.1三組患者的一般資料比較:三組患者的性別、年齡、病程、BMI、吸煙史、糖尿病、高血壓、高脂血癥、LDL-C、HDL-C、TG、TC等一般資料比較，差異均無統計學意義(P均>0.05)，見表1。

2.2三組患者的CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平及SYNTAX評分比較:三組患者的CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平及SYNTAX評分比較，差異均具有統計學意義(P均<0.05)，兩兩對比LSD-t檢驗，差異均具有統計學意義(P均<0.05)，見表2。

表2 三組患者的CRP cTnT TSLP miR-30c-5p水平及SYNTAX評分比較

2.3CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平與SAP患者冠狀動脈病變嚴重的程度關系:Pearson相關性分析顯示，CRP、cTnT、TSLP與SYNTAX評分均呈顯著正相關(P<0.01)，而miR-30c-5p與SYNTAX評分呈顯著負相關(P<0.01)，見表3。

表3 CRP cTnT TSLP miR-30c-5p水平與SAP患者冠狀動脈病變嚴重的程度關系

3 討 論

穩定性心絞痛的病理基礎為動脈粥樣硬化，而現有研究證實，局部、全身性炎癥反應參與了動脈粥樣硬化發生進展的整個過程，損傷機體的心肌功能及內皮功能[5]。因此，炎癥因子、心肌損傷標志物及影響內皮功能的標志物能體現出冠狀動脈病變的嚴重程度[6]。

CRP是一類常用的全身性炎癥反應標志物，其在炎癥反應早期即可迅速增高，且在48～72h時達到峰值[7]。研究表明，CRP在心肌缺血時，CRP水平會顯著升高，且其升高程度和患者的預后密切相關，臨床中亦被用作評估硬化病灶穩定性指標之一[8]。研究顯示[9]，血清CRP水平和冠狀動脈病變嚴重程度有關，其在病變程度較高的患者中的水平要明顯高于程度較輕的患者，表明CRP和冠狀動脈病變嚴重程度顯著相關。本研究結果顯示，重度組患者的CRP水平要明顯高于中度組及輕度組患者，且Pearson相關性分析顯示，CRP與SYNTAX評分呈顯著正相關，即CRP水平越高，SYNTAX評分越高，冠狀動脈病變越嚴重。分析其機制可能為：炎癥反應對血管內皮功能造成影響，削弱機體抗凝、抗黏附功能。此外，炎性因子通過釋放降解基質蛋白酶(如纖溶酶原激活酶、基質金屬蛋白酶等)，降解細胞下基質，從而削弱纖維帽，進而導致冠狀動脈粥樣硬化程度加深[10]。

cTnT是臨床中常用的長效非酶性心肌損傷標志物。其在炎癥反應中升高速度較CRP更早，敏感度亦較CRP更高，常被用作急性心梗、心肌缺血的診斷中。黃增旭等[11]報道稱，cTnT水平和冠狀動脈病變支數存在相關性。現有報道關于cTnT水平和SYNTAX評分的相關性的報道較少，認為cTnT水平升高可能與冠狀動脈鈣化程度及斑塊穩定性有關。本研究結果顯示，重度組患者的cTnT水平要明顯高于中度組及輕度組患者，且Pearson相關性分析顯示，cTnT與SYNTAX評分呈顯著正相關，即cTnT水平越高，SYNTAX評分越高，冠狀動脈病變越嚴重。究其原因為：重度病變患者的冠狀動脈斑塊穩定性更低，斑塊局部破裂，引起血管堵塞，形成微小血栓，導致心肌缺血，損傷心肌細胞，故而使得cTnT水平異常升高。

TSLP是白細胞介素-7(IL-7)家族中的一員，其主要在機體的表皮角質細胞、胸腺基質細胞、上皮細胞中表達，而在腫瘤細胞、滋養細胞、樹突細胞、成纖維細胞、血管內皮細胞、血管平滑肌細胞、肥大細胞中少量表達。陳寶峰等[12]研究指出，TSLP為炎癥反應的啟動因素，其主要功能為激活樹突狀細胞。此外，TSLP能誘導巨噬細胞中的CD80表達，使其分化為樹突狀細胞。而樹突狀細胞在動脈粥樣硬化的炎癥反應中扮演至關重要的角色。本研究結果顯示，重度組患者的TSLP水平要明顯高于中度組及輕度組患者，且Pearson相關性分析顯示，TSLP與SYNTAX評分呈顯著正相關，即TSLP水平越高，SYNTAX評分越高，冠狀動脈病變越嚴重。分析機制為：血管緊張素Ⅱ能經NF-kB信號通路誘導血管平滑肌細胞中的TSLP表達，從而激活樹突狀細胞T細胞分化為Th17效應細胞，形成動脈粥樣硬化斑塊[13]。

miR-30c-5p是miRNAs的一種，而miRNAs被證實參與了動脈粥樣硬化及內皮功能的調節過程，miRNAs缺失將引起血管出血及破裂[14]。左紅等[15]研究表明，miR-30c-5p在動脈粥樣硬化、腫瘤及急性冠脈綜合征患者中的表達顯著下降。本研究結果顯示，重度組患者的miR-30c-5p水平要明顯低于中度組及輕度組患者，且Pearson相關性分析顯示，miR-30c-5p與SYNTAX評分呈顯著負相關，即miR-30c-5p水平越低，SYNTAX評分越高，冠狀動脈病變越嚴重。

綜上所述，CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平與穩定型心絞痛患者冠狀動脈病變嚴重程度存在相關性，早期檢測以上生物學標志物有助于判斷穩定性心絞痛患者的冠狀動脈病變嚴重程度。