摘 要:利用自行設計的方法分離提取總RNA,通過一對特異引物,分別擴增出不同梨樹品種上蘋果銹果類病毒的特異片段,通過對庫爾勒香梨品種上獲得的特異片段回收、克隆和測序。結果表明,該片段長250bp,與已發表的AF421195同源性為99%,在此基礎上利用克隆的ASSVd質粒,通過RT—PCR合成了生物素標記的cDNA探針,利用該探針對梨樣品進行了斑點雜交檢測,取得了很好的檢測效果。進一步證明該反應體系能很好地用于梨樹蘋果銹果類病毒的RT—PCR檢測。
關鍵詞:梨樹;新疆;蘋果銹果類病毒;RT—PCR;cDNA探針;測序
中圖分類號:S661.2
文獻標識碼:A
文章編號:1009—9980(2007)06—761—04