新紅星蘋果花芽蛋白質提取及雙向電泳的改良方法

摘 要：以新紅星蘋果花芽為材料，探索適合蛋白質的提取方法及其雙向電泳的條件。采用物理和化學2種方法充分裂解植物組織細胞，并用低溫操作加入PVP等去除植物大量的酚類物質，最后離心去除不溶性雜質的蘋果蛋白質組雙向電泳(2－DE)樣品制備方法，第1向為ISO～DALT等電聚焦，第2向為垂直平板SDS－PAGE。通過對樣品制備、雙向電泳參數的選擇及染色等方面進行優化，電泳圖譜可分辨出蛋白質斑點數在519個以上，蛋白質相對分子質量約為14.0～97.0 ku，主要分布為14.0～67.0 ku；等電點約為3.5～9.0，主要分布在4.0～7.0。

關鍵詞：蘋果；蛋白質；雙向電泳

中圖分類號：S661．1 文獻標識碼：A 文章編號：1009-9980(2007)04-549-04

隨著功能基因組學的興起，蛋白質組學(proteomics)技術已成為生命科學研究的重點，同時給果樹花芽分化分子機理研究帶來了新的機遇。雙向電泳技術是蛋白質組研究的3大關鍵核心技術之首。其基本原理是：第1向為等電聚焦(18081ectrofocusing，IEF)，根據蛋白等電點不同進行分離；第2向為SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)，是基于蛋白質亞基分子質量不同，將第1向分離后的蛋白質進一步分離。蛋白質經過電荷和質量的2次分離后，可以得到蛋白質等電點和分子量的信息。

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