智腦膠囊對(duì)血管性癡呆模型大鼠行為學(xué)及腦組織ＳＯＤ活性、ＭＤＡ含量的影響

摘要：目的：觀察智腦膠囊對(duì)血管性癡呆模型大鼠學(xué)習(xí)記憶及腦組織超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的影響。方法反復(fù)夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈(CCA)結(jié)合腹腔注射硝普鈉制備擬血管性癡呆模型大鼠，檢測(cè)模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及腦組織SOD活性、MDA含量。結(jié)果與模型組相比，智腦膠囊組能明顯改善模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力；智腦膠囊3劑量組均能提高腦組織中s(Ⅺj活性，其中以中、高劑量組為著；智腦膠囊3劑量組、尼莫通組能夠顯著降低腦組織中MDA含量。結(jié)論智腦膠囊可改善實(shí)驗(yàn)性血管性癡呆模型大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙，提高腦組織SOD活性，降低MDA含量。

關(guān)鍵詞：血管性癡呆；智腦膠囊；學(xué)習(xí)記憶能力；超氧化物歧化酶；丙二醛

中圖分類(lèi)號(hào)：R749.1 R285.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672－1349(2007)09－0833－03

血管性癡呆(vascular dementm，VD)是指腦血管病變引起的腦損害所致的癡呆，是一獲得性智能損害綜合征，在無(wú)意識(shí)障礙的狀態(tài)下，以影響病人生活和社交能力等為主要臨床表現(xiàn)的一種腦功能減退性疾病。VD目前為難治性疾病，臨床應(yīng)用智腦膠囊治療VD已顯示出較好的療效。現(xiàn)采用反復(fù)夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)合腹腔注射硝普鈉降低血壓制備的血管性癡呆大鼠模型，觀察智腦膠囊對(duì)該模型的藥效作用，同時(shí)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)性VD模型大鼠跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)記憶指標(biāo)和腦組織超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的改變，探討智腦膠囊改善模型大鼠行為學(xué)的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1．1 動(dòng)物：雄性健康Wistar大鼠，清潔級(jí)，體重350g左右，10月齡～12月齡，由安徽全椒實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1．2 藥物：智腦膠囊，由安徽中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院藥劑科提供。硝普鈉，北京雙鶴現(xiàn)代醫(yī)藥技術(shù)有限公司，批號(hào)：040706。尼莫地平片，山西亞寶藥業(yè)集團(tuán)有限公司，批號(hào)：040418。腦復(fù)康，南京白敬宇制藥有限責(zé)任公司，批號(hào)：050408。

1．3 主要試劑：考馬斯亮、超氧化物歧化酶、丙二醛試劑盒，均由南京建成生物工程研究所提供，批號(hào)分別為：20050828，20050824，20050809。

1．4 主要儀器：DDT－2跳臺(tái)儀，中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所；UV－755B型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，上海精密科學(xué)儀器有限公司；FSH－2型組織搗碎勻漿機(jī)，金壇市金城國(guó)盛實(shí)驗(yàn)儀器廠，TGL－16 G冷凍離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠；FA2004型電子天平，上海天平儀器廠生產(chǎn)。

1．5 造模試驗(yàn)分組與給藥：血管性癡呆大鼠造模力法。選擇造模成功存活的大鼠隨機(jī)分為模型組、腦復(fù)康組(0.6g/kg)、尼莫地平組(0.04g/kg)及智腦膠囊小劑量組(12.50 g/kg)、中劑量組(2500g/kg)、高劑量組(5000g/kg)，另設(shè)正常組、假手術(shù)組，正常組不作任何處理。共8組，每組10只。造模后第4天開(kāi)始灌胃給藥，正常對(duì)照組、假手術(shù)組、模型組予等容積生理鹽水，每日1次，連續(xù)灌胃15d。

1．6 檢測(cè)指標(biāo)：檢測(cè)行為學(xué)指標(biāo)(跳臺(tái)法)及VD模型大鼠腦組織中SOD活性和MDA含量。

1．7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：應(yīng)用SPSS軟件，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。

2 結(jié) 果

2．1 智腦膠囊對(duì)血管性癡呆模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響(跳合法)與正常組比較，假手術(shù)組VD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶指標(biāo)兩組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示手術(shù)對(duì)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)影響；與正常組比較，模型組大鼠學(xué)習(xí)指標(biāo)中的反應(yīng)時(shí)間和錯(cuò)誤次數(shù)明顯增加(P＜0.01)，記憶指標(biāo)中的潛伏期時(shí)間顯著減少、錯(cuò)誤次數(shù)明顯增多(P＜0.01)，顯示模型組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力顯著下降。與模型組相比，腦復(fù)康組、尼莫地平組、智腦膠囊3劑量組在學(xué)習(xí)指標(biāo)測(cè)試中的反應(yīng)時(shí)間、錯(cuò)誤次數(shù)明顯減少(P＜0.05或P＜0.01)；表明智腦膠囊對(duì)模型大鼠學(xué)習(xí)指標(biāo)有改善作用。與模型組相比，智腦膠囊各劑量組、腦復(fù)康組、尼莫地平組記憶指標(biāo)中潛伏期時(shí)間明顯延長(zhǎng)(P＜0.05)；智腦膠囊3劑量組、腦復(fù)康組、尼莫地平組均能減少模型大鼠錯(cuò)誤次數(shù)(P＜0.05或P＜0.01)，提示智腦膠囊對(duì)模型大鼠記憶指標(biāo)也有較好的改善作用。智腦膠囊改善學(xué)習(xí)記憶指標(biāo)的藥效學(xué)作用強(qiáng)度在尼莫地乎組、腦復(fù)康組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2．2 智腦膠囊對(duì)實(shí)驗(yàn)性：VD模型大鼠腦組織SOD活性、MDA含量的影響假手術(shù)組VD模型大鼠腦組織SOD活性、MDA含量與正常組比較，兩組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示手術(shù)對(duì)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)影響，與正常組相比，模型組大鼠腦組織SOD含量明顯減少(P＜0.01)，MDA含量明顯增加(P＜0.01)，提示模型組大鼠存在明顯的自由基代謝障礙。智腦膠囊3劑量組能提高VD模型大鼠腦組織SOD活性，降低MDA含量，以中、高劑量組為著(P＜0.05或P＜0.01)，尼莫地平也有提高模型大鼠腦組織SOD活性，減少M(fèi)DA含量的趨勢(shì)(P＜0.05)。腦復(fù)康組雖有提高模型大鼠腦組織SOD活性，減少M(fèi)DA含量的趨勢(shì)，但與模型組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與腦復(fù)康組、尼莫地平組相比，智腦膠囊中、低劑量組在提高VD模型大鼠腦組織SOD活性方面無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而高劑量組的作用優(yōu)于腦復(fù)康組、尼莫地平組(P＜0.01)。在降低MDA含量方面智腦膠囊中、高劑量組作用明顯優(yōu)于腦復(fù)康組(P＜0.05或P＜0.01)，智腦膠囊高劑量組優(yōu)于尼莫地平組(P＜0.05)。

智腦膠囊3劑量組之間比較，智腦膠囊高劑量能顯著提高VD模型大鼠腦組織SOD的活性，減少M(fèi)DA含量，在提高模型大鼠SOD活性方面作用優(yōu)于智腦膠囊低劑量組，在降低MDA方面作用優(yōu)于中、高劑量組。

3 討 論

血管性癡呆是由多因素參與的復(fù)雜病理過(guò)程，而氧自由基引起的組織過(guò)氧化損傷是其重要機(jī)制之一。SOD是一種富含金屬離子的蛋白質(zhì)，為機(jī)體直接清除自由基的重要酶類(lèi)。該酶存在于所有需氧代謝過(guò)程中，是抑制過(guò)氧化反應(yīng)的最重要物質(zhì)之一。其主要作用是催化生物氧化產(chǎn)生超氧自由基而起保護(hù)作用，能有效清除并阻止氧自由基引發(fā)的自由基連鎖反應(yīng)。MDA是自由基對(duì)生物細(xì)胞膜損傷的主要代謝產(chǎn)物，是脂質(zhì)過(guò)氧化物的分解產(chǎn)物，能使生物膜變性、壞死，使DNA發(fā)生突變、交鏈；同時(shí)使SOD活性降低，而造成自由基連鎖反應(yīng)的惡性循環(huán)。腦組織含有豐富的易被氧化的不飽和脂肪酸，是最易受到自由基損傷的組織。目前認(rèn)為，自由基導(dǎo)致細(xì)胞及細(xì)胞膜上不飽和脂肪酸的破壞和過(guò)氧化及MDA產(chǎn)生，從而對(duì)學(xué)習(xí)記憶有明顯的損害作用。

血管性癡呆屬于中醫(yī)善忘、癡證、呆病等范疇，病位在腦，與心、脾、腎關(guān)系密切，多為脾腎虧虛，氣陰不足，痰瘀阻竅。智腦膠囊能健脾益腎，益氣養(yǎng)陰，豁痰祛瘀，開(kāi)竅健腦，為標(biāo)本兼治之方。現(xiàn)代藥理研究表明，智腦膠囊方中黨參能增強(qiáng)自由基清除，提高機(jī)體抗應(yīng)激性和整體抗缺氧能力，抑制血小板聚集，改善缺血再灌注腦細(xì)胞能量代謝，具有腦保護(hù)等作用；黃精有提高機(jī)體免疫力，抗脂質(zhì)過(guò)氧化，延緩衰老，提高學(xué)習(xí)記憶能力等作用；川芎有改善大腦局部血液循環(huán)，減少梗死面積，促進(jìn)腦復(fù)蘇作用，并且其提純物川芎嗪能改善腦缺血后學(xué)習(xí)記憶障礙，石菖蒲有促進(jìn)小鼠記憶及膽堿能樣效應(yīng)，改善大腦去甲腎上腺素能等神經(jīng)功能，對(duì)缺血再灌注腦損傷及抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡有保護(hù)作用。

本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明：腦缺血再灌注損傷后模型大鼠腦組織中自由基大量產(chǎn)生及抗脂質(zhì)過(guò)氧化能力降低，自由基清除能力下降，模型大鼠出現(xiàn)明顯的學(xué)習(xí)記憶障礙。智腦膠囊治療后模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力有所改善，其機(jī)制可能是提高SOD活性、降低MDA含量，從而清除自由基，提高機(jī)體抗氧化能力有關(guān)；且隨著智腦膠囊劑量的增加，其具有的自由劑清除樣作用越明顯。

本文編輯 王雅潔