腦心通膠囊和辛伐他汀穩定易損斑塊的對比研究

摘要：目的觀察腦心通膠囊和辛伐他汀對易損斑塊的穩定作用。方法：32只兔給予球囊損傷腹主動脈加高脂飼料喂養，12周末30只造模兔隨機分為自然消退組、腦心通組和辛伐他汀組，每組10只。24周末在腹主動脈斑塊處轉桌攜帶人野生型P53基因，26周末給予中國斑點蝰蛇毒(CRVV)和組胺觸發斑塊破裂。于26周末測定血脂、血漿纖維蛋白原、高敏C反應蛋白(hs－CRP)和基質金屬蛋白酶1(MMP－1)水平，并進行血管內超聲檢測。結果：治療后腦心通組和辛伐他汀組的總膽固醇、低密度脂蛋白、hs－CRP及MMP－1顯著低于自然消退組(P＜0.05和P＜0.01)。與辛伐他汀組比較，腦心通組能顯著降低血漿纖雛蛋白原濃度(P＜0.05)。腦心逮組和辛伐他汀組血管外彈力膜面積(EEMA)、斑塊面積(PA)和管腔面積狹窄(LAS)百分率較之自然消退組顯著降低(P＜0.05或P＜0.01)。結論腦心通膠囊和辛伐他汀能通過降低血脂、hs－CRP和MMP－1水平等機制穩定易損斑塊。

關鍵詞：動脈粥樣硬化；血管內超聲；腦心通膠囊，辛伐他汀

中圖分類號：R543.1 R289.5 文獻標識碼：B 文章編號：1672－1349(2007)09－0825－03

動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)是由多種病理過程包括炎細胞的浸潤、平滑肌細胞的增殖、細胞外基質的增加及血栓形成等參與的慢性炎癥性疾病。腦心通膠囊是基于中醫理論研制的新型中藥，具有增加心臟供血、保護血管內皮功能及降低和控制心血管疾病危險因素的作用，但它對于易損斑塊的作用尚不明了。因此，本研究擬將較大劑量辛伐他汀和腦心通膠囊應用于兔易損斑塊模型中，觀察這兩種藥物穩定易損斑塊的療效并探討其可能的機制。

1 材料與萬法

1．1 動物雄性純種新西蘭兔32只，體重1.5 kg－2.5 kg，由山東省農業科學院提供，合格證號：SCXK(魯)20040013。

1．2 藥物辛伐他汀(商品名舒降之，杭州默沙東制藥有限公司提供，批號040805)，腦心通膠囊，每粒膠囊含生藥0.4 g，由成陽步長制藥有限公司提供，批準文號：Z20055001。

1．3 試劑與儀器攜帶人野生型P53基因的復制缺陷型重組腺病毒載體Adv P53由上海醫元生物基因科技發展公司提供，中國斑點蝰蛇毒(Chmese Russdll's Viper Venom，CRVV)由廣州蛇毒研究所提供，組胺購目上海三杰生物技術有限公司。高敏C反應蛋白(hs－CRP)和基質金屬蛋白酶－1(MMP－1)ELISA試劑盒購自美國Bionewtrans Pharmaciutical Biotechnology公司。

1．4 動物造模所有兔給予球囊損傷腹主動脈加高脂飼料喂養，造模期為12周。

1．5 干預方法 12周末隨機抽取2只兔病理學檢測證實AS形成，將剩余實驗兔隨機分為3組，每組10只，均改喂普通飼料，腦心通組加用腦心通膠囊，給藥量為生藥2g/(kg·d)，辛伐他汀組加用舒降之，給藥量為5 mg/(kg·d)；自然消退組不予藥物，干預時間為12周。

1．6 斑塊局部的基因轉染24周末，戊巴比妥鈉麻醉動物，開腹暴露腹主動脈。在高頻線陣探頭的引導下，尋找腹主動脈在右腎動脈分支處與髂總動脈之間血管段(全長2cm－3cm)中的最大斑塊處作為病毒載體的轉染部位，經導管向轉染部位的管腔中注入10μL Adv P53重組載體，注射前結扎轉染部位上下兩端的血管10 min，然后恢復血供，在結扎部位做縫線標記，關閉腹腔，靜脈給予抗生素預防感染，實驗兔繼續給予普通飼料喂養2周。

1．7 藥物觸發26周末，對實驗兔進行藥物觸發。CRW 0.15 mg/kg腹膜下注射，30 min后耳緣靜脈注射組胺0.02 mg/kg，于處死動物前24 h，48 h給予兩次藥物觸發。

1．8 血液生化檢查于26周末檢測血清總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL－C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL－C)。另一部分以枸櫞酸鈉抗凝，留取血漿測定纖維蛋白原(Rb)。

1．9 血清炎性因子檢測藥物觸發前抽取兔耳緣靜脈血/4mL，留取血清分裝于Eppendorf管中，于－86℃冰箱中凍存，按試劑盒說明測定血清中hs－CRP和MMP－1的水平。

1．10 血管內超聲檢查于26周末藥物觸發后進行腹主動脈血管內超聲檢查，病變部位及參考部位的血管外彈力膜面積(external elasttc membrance area，EEMA)、管腔面積(lumen area，LA)、斑塊面積(plaque area，PA)和管腔面積狹窄百分率(lumenarea stenosis，LAS)。

1．11 統計學處理計量資料用均數±標準差(x±s)表示，3組間各指標的比較應用單因素方差分析，應用SPSS軟件進行統計學處理，P＜0.05為有統計學意義。

2 結 果

藥物干預階段腦心通組和辛伐他汀組因腹瀉各死亡1只，自然消退組死亡2只，原因分別為尿潴留和上呼吸道感染。

2．1 血漿纖維蛋白原與血清炎性因子檢測 與辛伐他汀組比較，腦心通膠囊能顯著降低血漿纖維蛋白原濃度(P＜0.05)。與自然消退組比較，治療后腦心通組和辛伐他汀組血清hs－CRP及MMP－1的水平均顯著下降(P＜0.05或P＜0.01)。

2．2 血脂檢測與自然消退組比較，治療后腦心通組和辛伐他汀組TC和LDL－C水平均顯著降低，辛伐他汀組分別降低TC和LDL－C 68.61％和73.65％，腦心通膠囊降低TC 34.28％和LDL－C 32.04％．其中辛伐他汀降低血脂的效果更顯著。

2．3 血管內超聲檢測藥物觸發前血管內超聲未見斑塊破裂及血栓形成，藥物觸發后辛伐他汀組和腦心通組各死亡1例，自然消退組死亡2例，死亡原因推測為急性心腦血管事件。與自然消退組比較，腦心通組和辛伐他汀組實驗兔EEMA，PA，LAS顯著下降(P＜0.05或P＜0.01)，腦心通組和辛伐他汀組間的差異無統計學意義。

3 討 論

AS本身是一個炎癥與免疫反應的過程，AS易損斑塊具有薄的纖維帽，大量炎性細胞浸潤以及脂質聚集等明顯的形態學特點。穩定易損斑塊的治療主要在于降脂、抗炎、促進平滑肌及膠原的增殖。

本研究將辛伐他汀和腦心通膠囊分別應用于免易損斑塊模型中。在REVERSAL和PROVEIT試驗中證實了大劑量他汀抑制斑塊增長和減低心血管事件的作用。本研究中辛伐他汀和腦心通膠囊顯著降低血清TC和LDL－C水平，其中辛伐他汀降低血脂的效果更顯著，證明兩種藥物均可以通過降低血脂水平穩定易損斑塊。

Ross提出AS是一種炎癥性疾病，炎癥過程中最具標志性的因子C反應蛋白是目前發現的最重要的急性冠脈綜合征(ACS)的炎性標志物，是AS發生發展中具有重要預后意義的指標。本研究證實辛伐他汀和腦心通膠囊可顯著降低血hs－CRP濃度，表明這是二者穩定斑塊的主要機制。纖維蛋白原水平升高預示自發性缺血、心肌梗死和死亡的危險性增加。腦心通膠囊能顯著降低血漿纖維蛋白原濃度(P＜0.05)，在一定程度上降低血液的高凝狀態，而辛伐他汀在這方面無顯著作用。

AS斑塊纖維帽的降解是導致斑塊易損性的最重要因素，基質金屬蛋白酶具有廣譜底物選擇性，本研究中12周治療后腦心通組和辛伐他汀組MMP－1的水平均顯著下降(P＜0.01)，這可能是兩種藥物穩定斑塊的主要作用機制。血管內超聲檢測證實腦心通組和辛伐他汀組實驗兔EEMA，PA，LAS顯著下降(P＜0.01或P＜0.05)，進一步提供了兩種藥物穩定易損斑塊的證據。

許多動物實驗及臨床研究已經證實腦心通具有調脂、抗氧化等多種作用，現代藥理研究證明，黃芪對血管內皮細胞、血管平滑肌細胞的保護作用、改變血液流變學，其作用機制涉及多方面，川芎的有效成分川芎嗪具有抗凝、抑制血小板集聚、擴張血管、改善微循環、抗內皮素、保護血管內皮、抗氧化和鈣拮抗等藥理作用，川芎嗪抑制核轉錄因子－κB(NF-κB)激活從而抑制炎癥反應；丹參及其有效成分可通過降血脂、抗氧化作用、抗凝血等多種途徑抗AS，更為重要的是，它具有明顯的抗炎作用。本研究證實腦心通膠囊能通過降低血脂、hs－CRP和MMP－1水平等機制穩定易損斑塊。

根據中醫理論，氣虛血瘀為AS的主要病機，治療以益氣活血為主要治則，改善心肌缺血，穩定動脈粥樣硬化斑塊，抑制血栓形成，減少冠狀動脈事件的發生。黃芪有補氣開陽、益衛解表、利水消腫、養血安神之功效；丹參、紅花有活血祛瘀、涼血消腫、養血安神之功效；當歸、川芎、赤芍清熱涼血、祛瘀止痛、補氣活血行氣；乳香、沒藥活血止痛、消腫生肌；桂枝、地龍清熱熄風、溫陽通經、利尿通絡，全蝎、水蛭有破血逐瘀、熄風止痙、解毒散結、通經止痛之功效，諸藥合用，標本兼治，共奏益氣活血、化瘀通絡之效。

本文編輯 王雅潔