不同材質(zhì)、不同分子量的膜對ＨＸＴＬ藥液體系除雜的適用性研究

文章編號：1008-6919（2007）09-0110-02中圖分類號:R917文獻標識碼：A【實驗研究】

【摘要】 目的 考察不同材質(zhì)、不同分子量的膜對HXTL藥液體系除雜的適用性。方法采用PVDF（聚偏二氟乙烯）8-10萬、PS（聚砜）3-5萬、PS2萬、PES（聚醚砜）1萬、PS6千的膜對HXTL藥液體系進行超濾，檢查超濾前后藥液含蛋白質(zhì)，多糖，淀粉情況，測定固含物的轉(zhuǎn)移率，有效成分的轉(zhuǎn)移率，指紋圖譜，計算超濾前后指紋圖譜相似度。結(jié)果對于HXTL藥液，超濾前后均無蛋白質(zhì)存在，除PVDF8－10萬外，均能除淀粉，PES1萬、PS6千膜可除去多糖，PES超濾膜對指標性成份芍藥苷，苦杏仁苷的吸附較少，固含量轉(zhuǎn)移率較低。指紋圖譜相似度在99％以上。結(jié)論PES材質(zhì)的膜對HXTL藥液體系除雜的適用性較好，可根據(jù)需要選用不同分子量的膜。

關(guān)鍵詞：超濾；除雜；有效成分轉(zhuǎn)移率；適用性

超濾技術(shù)目前已廣泛應(yīng)用于制藥工業(yè)，因其高效、節(jié)能的優(yōu)勢已逐漸代替中藥生產(chǎn)中一些傳統(tǒng)的工藝，選擇合適的超濾膜就可將上述物質(zhì)有效截留，而又不損失有效成分，提高制劑的澄明度和穩(wěn)定性，成品質(zhì)量較原工藝為優(yōu)[1]。超濾技術(shù)的關(guān)鍵是膜材和膜孔徑的選擇，不同的膜材對某一化合物的截留可能會有較大的差異。因此，應(yīng)根據(jù)所提取中藥有效成分的需要，對超濾膜的截留情況進行考察，以避免有效成分丟失[2]。HXTL具有活血化瘀、行氣通絡(luò)之功效。本文采用PVDF（聚偏二氟乙烯）8-10萬、PS（聚砜）3-5萬、PS2萬、PES（聚醚砜）1萬、PS6千的中空纖維膜對HXTL藥液體系進行超濾，考察幾種膜對該藥液體系除雜的適用性。

1 實驗材料

1.1儀器

PBCC型蠕動泵（Milipore公司），AE240型電子分析天平（梅特勒托利多儀器（上海）有限公司），H·H·.S4型電熱數(shù)字顯示恒溫水浴鍋（上海浦東榮豐科學(xué)儀器有限公司上海圣欣科學(xué)儀器有限公司），DHG－9070A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏實驗設(shè)備有限公司），PTHW型電熱套（鞏義市英峪予華儀器廠），SHZ-D（III）型循環(huán)水式真空泵（鞏義市英峪予華儀器廠），TDL-5-A型臺式離心機，Agilent1100高效液相色譜儀（安捷倫科技有限公司）

PVDF（聚偏二氟乙烯）8-10萬、PS（聚砜）3-5萬、PS2萬、PES（聚醚砜）1萬、PS6千，均為天津膜天膜工程技術(shù)有限公司生產(chǎn)。其膜組件規(guī)格相同，面積相等。

1.2試藥

酒石酸鉀鈉（江蘇徐州試劑二廠），硫酸銅（國藥集團化學(xué)試劑有限公司，批號：F20040625），碘（國藥集團化學(xué)試劑有限公司），氫氧化鈉（上海雅貝科技有限公司，批號：20041221），磺基水楊酸（中國醫(yī)藥集團上海化學(xué)試劑公司，批號：20010717），鹽酸（南京化學(xué)試劑有限公司，批號：060230241），以上試劑均為分析純。標準品苦杏仁苷，芍藥苷均購自中國藥品生物制品檢定所。

桃仁，赤芍，川芎，均由康緣藥業(yè)倉庫提供，并經(jīng)檢驗符合2005版藥典一部標準。

2 方法

2.1 實驗方法

2.1.1超濾用藥液的制備方法：

HXTL藥液

按處方取桃仁、赤芍、川芎三味藥材，其中赤芍，川芎加10倍量水，煮沸后投入桃仁煎煮2次，每次2小時，合并煎煮液，即得HXTL提取液。

2.1.2藥液預(yù)處理方法

將藥液以5000r/min離心30min，取上清液

2.1.3超濾方法

將預(yù)處理過的藥液用不同材質(zhì)、不同分子量的膜分別超濾，超濾過程中控制一定的壓力，使進料口和超濾口保持一定的壓力差（約0.1MPa），待超濾液為原體積的2/3時，向濃縮液中加入1/3原體積的純化水，繼續(xù)超濾，收集原液體積量的超濾液，將超濾前后藥液留樣。

2.1.4考察指標

定性檢查超濾前后藥液中所含的多糖、蛋白質(zhì)、淀粉；定量測定指標性成分（芍藥苷、苦杏仁苷），并計算超濾前后轉(zhuǎn)移率，測定超濾前后指紋圖譜，并計算相似度；測定超濾前后固含量，計算固含物轉(zhuǎn)移率。

2.1.5淀粉、蛋白質(zhì)、多糖檢驗方法：

2.1.5.1淀粉、多糖檢驗：

取一定量藥液，于水浴蒸發(fā)至干。加入1ml蒸餾水，再加入乙醇5ml，如不出現(xiàn)沉淀，則表示藥液中無淀粉、多糖；如出現(xiàn)沉淀，濾過收集沉淀，用少量熱乙醇洗滌沉淀，再將沉淀物溶于3ml蒸餾水中，進行下列試驗：

①碘試驗：取上述藥液1ml，加碘試液1d，觀察顏色變化，如藥液呈藍色，加熱消失，冷至室溫后藍色再現(xiàn)，則表示藥液中含有淀粉；

②多糖水解：取上述藥液1ml，加入稀鹽酸5滴，置沸水浴加熱10－15min，后用10％氫氧化鈉中和至中性，再加新制堿性酒石酸銅試液4滴，另取檢液1ml，不加酸水解，直接加入上述試液4滴，兩管同置水浴煮沸5－6min，如水解后生成紅色沉淀物量比未經(jīng)水解者多，則示有多糖。

2.1.5.2蛋白質(zhì)檢驗

取藥液1ml，加入新配制的30％磺基水楊酸溶液1ml，混勻，放置5mn，如出現(xiàn)渾濁，則表示藥液中含有蛋白質(zhì)。如果藥液渾濁，可將其離心（1.2萬rpm/min ）5min，或通過0.45微米的濾膜，取上清液或濾液按上述方法進行測定。

2.1.6含量測定及指紋圖譜條件

HXTL指紋條件：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇－0.1％三氟乙酸水溶液（26∶74）為流動相；檢測波長為218nm。經(jīng)方法學(xué)考察，精密度和重復(fù)性符合指紋圖譜的技術(shù)要求，穩(wěn)定性試驗表明供試液在15小時內(nèi)穩(wěn)定。

苦杏仁苷及芍藥苷含測：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水（27：73）為流動相；檢測波長為218nm。經(jīng)方法學(xué)考察，苦杏仁苷濃度在0.796～0.02488mg/ml之間呈良好的線性關(guān)系，芍藥苷濃度在0.0219～0.702mg/ml之間呈良好的線性關(guān)系，精密度，重復(fù)性和加樣回收率均符合要求，穩(wěn)定性試驗表明供試液中苦杏仁苷和芍藥苷在10小時內(nèi)穩(wěn)定。指紋圖譜的相似性采用藥典委員會軟件進行評價。

2.2實驗結(jié)果：

2.2.1 有效成分和固含物轉(zhuǎn)移率及指紋圖譜相似性結(jié)果如表1所示：

由以上結(jié)果可以看出，采用五種膜對HXTL水提取液進行超濾， PES（聚醚砜）超濾膜超濾前后有效成分轉(zhuǎn)移率高，對指標性成份的吸附較少，且固含量相對較低，在對含苷類成份HXTL藥液體系進行超濾時可考慮使用。

2.2.2超濾前后蛋白質(zhì)，淀粉，多糖存在情況如表2所示：

由以上結(jié)果可以看出，PVDF8-10萬膜超濾后仍有淀粉存在，其它膜超濾后均能除去淀粉，各膜超濾前后藥液中均無蛋白質(zhì)存在，PES（聚醚砜）1萬、PS6千超濾后的藥液無多糖存在。

2.2.3 超濾所用時間如表3所示：

3 討論

3.1以上各種分子量和材質(zhì)的膜除PVDF8-10萬均可除去活血通絡(luò)水提取液中的淀粉，因此，在考慮用超濾方法除去本藥液中的淀粉時，可采用截留分子量小于8-10萬的超濾膜。

3.2在考慮除去多糖時，可采用截留分子量為1萬或6千的膜，使用PES材質(zhì)的超濾膜目標成份轉(zhuǎn)移率較高，故可采用PES1萬的膜除去，但不足之處是超濾速度較慢，超濾過程需控制相應(yīng)的條件，以提高超濾速度。

3.4各種膜超濾前后對于HXTL藥液的指紋圖譜影響較小。

3.5由于種種原因，國產(chǎn)的超濾膜的截留分子量的標定尚無統(tǒng)一的標準，這對超濾膜的推廣有一定的阻礙作用。

參考文獻

1郭立瑋，金萬勤，彭國平.21世紀的植物藥深加工現(xiàn)代化技術(shù)———膜分離[J]. 南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)，2000，16(2):66.

2普文英，張玉忠，李培等.超濾法處理板藍根水提液的實驗研究[J].中國藥房，2005，16(13):978.