鷹嘴豆降血糖有效部位的藥效學篩選

摘 要 目的:對鷹嘴豆4個提取部位對正常和高血糖模型小鼠血糖值的影響進行研究，并篩選出其中的有效部位，為進一步研究奠定基礎#65377;方法:分別對正常小鼠#65380;腎上腺素高血糖小鼠和四氧嘧啶糖尿病小鼠灌胃4個提取部位，一周后測定血糖值和肝糖原含量#65377;結果:鷹嘴豆提取部位Ⅲ可顯著性降低正常小鼠和腎上腺素高血糖小鼠的血糖值，對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖無作用#65377;結論:鷹嘴豆提取部位Ⅲ在降血糖篩選實驗中作用最顯著，故將其做為有效部位進行進一步研究#65377;

關鍵詞:鷹嘴豆 有效部位 血糖 肝糖原

維藥鷹嘴豆(Cicer arietinum L.)作為新疆藥用植物已有2500多年歷史，已收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準-維吾爾藥分冊》和《維吾爾藥志》[1]#65377;其主要化學成分為:蛋白質(zhì)#65380;脂肪油#65380;淀粉等[2]#65377;在維藥中被廣泛用于治療糖尿病#65380;高脂血癥等疾病#65377;新疆民族醫(yī)院及民間用鷹嘴豆粉來治療糖尿病#65380;陽萎#65380;腎虛#65380;營養(yǎng)不良，也有一些鷹嘴豆的保健食品#65377;為進一步研究其藥用價值，本實驗從不同提取部位著手對鷹嘴豆降糖的有效部位進行了篩選，選用正常和高血糖小鼠模型，從整體水平進行降糖作用的藥效學比較，初步確定了鷹嘴豆降血糖的有效部位，為進一步研究鷹嘴豆的有效成分，闡明其降糖機制提供參考#65377;

1 實驗材料

1.1 實驗藥物:市售奇臺產(chǎn)鷹嘴豆，鑒定人是新疆藥物研究所張彥福研究員;用系統(tǒng)溶劑分離法，從鷹嘴豆中提取分離到提取部位Ⅰ#65380;Ⅱ#65380;Ⅲ#65380;和Ⅳ，進行降糖作用試驗;消渴丸，廣州中一藥業(yè)有限公司產(chǎn)品，批號500268號#65377;

1.2 實驗動物:清潔級ICR小鼠，雄性，18～22 g之間，購自新疆醫(yī)學實驗動物中心(SCXK(新)2003-0002)#65377;

1.3 主要試劑:四氧嘧啶(Alloxan)購自北京拜爾迪生物公司，批號sigmaA7413號， 臨用時以生理鹽水配成2%水溶液，使用劑量為200 mg·kg^-1;鹽酸腎上腺素 天津金耀氨基酸有限公司產(chǎn)品，批號0607221號，臨用時用生理鹽水配成1%水溶液，使用劑量為300μg·kg^-1;葡萄糖試劑盒，中生北控生物科技股份有限公司產(chǎn)品，批號060551號;肝糖原試劑盒，南京建成生物工程研究所產(chǎn)品，批號20070905號#65377;其余所用試劑均為國產(chǎn)分析純#65377;

1.4 主要儀器:550型微孔板判斷儀(酶標儀) 江蘇中大儀器廠產(chǎn)品;BS110S電子分析天平，北京塞多利斯天平有限公司產(chǎn)品;TGL-16C型離心機，上海安亭科學儀器制造廠;UV-2501紫外分光光度計，日本導津#65377;

2 方法與結果

2.1 鷹嘴豆4個提取部位不同劑量對正常ICR小鼠空腹血糖的影響

取健康雄性ICR小鼠100只，20±2g，適應性喂養(yǎng)1d，控制每日明暗時間各12h，室溫保持在18～28℃#65377;隨機分成10組，每組10只#65377;空白對照組，每日1%CMC-Na溶液灌胃;陽性對照組，每日消渴丸灌胃;提取部位Ⅰ#65380;Ⅱ#65380;Ⅲ#65380;和Ⅳ提取物篩選組，均按原生藥20g·kg^-1#65380;40g·kg^-1的低#65380;高劑量折算灌胃給藥[3]，按體重隨時調(diào)整用藥劑量，連續(xù)灌胃7d#65377;分別于第7d，禁食5h后給藥，給藥后2h測空腹血糖#65377;各給藥組血糖值與空白組進行t檢驗，結果見表1#65377;

由表1可見鷹嘴豆提取部位Ⅱ#65380;Ⅲ不同劑量時均可降低正常雄性ICR小鼠空腹血糖，但提取部位Ⅱ低劑量時較空白對照組無顯著性差異，高劑量時較空白對照組有顯著性差異;提取部位Ⅲ低劑量時較空白對照組有顯著性差異，高劑量時較空白對照組有極顯著性差異#65377;其它組與空白對照組比較無顯著性差異#65377;綜上可見鷹嘴豆提取部位Ⅲ可明顯降低正常雄性ICR小鼠空腹血糖，并且存在一定的量效關系#65377;

2.2 鷹嘴豆4個提取部位對腎上腺素高血糖小鼠空腹血糖及肝糖原的影響[4]

取健康雄性ICR小鼠70只，20±2g，同上處理后隨機分成7組，每組10只#65377;空白對照組及動模組，每日1%CMC-Na溶液灌胃;陽性對照組，每日消渴丸灌胃;提取部位Ⅰ#65380;Ⅱ#65380;Ⅲ#65380;和Ⅳ提取物篩選組，均按原生藥40g·kg^-1的高劑量折算灌胃給藥，按體重隨時調(diào)整用藥劑量，連續(xù)灌胃7d#65377;末次給藥前禁食12h，給藥后除空白對照組腹腔注射等體積的滅菌生理鹽水外，其余各組均按300μg·kg^-1腹腔注射腎上腺素，30min后摘眼球取血#65377;處死實驗動物后，取出肝臟#65377;分別在空白對照組與動模組#65380;給藥組與動模組間進行血糖值及肝糖原的t檢驗，結果見表2#65377;

由表2可見給正常ICR小鼠腹腔注射腎上腺素后較空白對照組，小鼠血糖顯著升高，肝糖原顯著降低，為腎上腺素高血糖小鼠模型#65377;鷹嘴豆提取部位Ⅰ#65380;Ⅱ#65380;Ⅲ大劑量時均可明顯降低腎上腺素高血糖小鼠空腹血糖，其中提取部位Ⅱ#65380;Ⅲ作用極顯著，鷹嘴豆提取部位Ⅲ#65380;Ⅳ能顯著改善小鼠肝糖原的低減#65380;增加肝糖原含量#65377;

2.3 鷹嘴豆4個提取部位對四氧嘧啶糖尿病小鼠空腹血糖的影響[5][6]

健康雄性ICR小鼠85只， 20±2g，同上處理后，禁食（自由飲水）12h，按四氧嘧啶200mg·kg^-1量左下腹腔快速注射四氧嘧啶生理鹽水溶液， 于注射后3h，灌服高濃度(質(zhì)量分數(shù)50%)的葡萄糖30g·kg^-1#65377;并于實驗第3d眼眶取血，測定空腹血糖值#65377;造模后血糖值高于11mmol·L-1的小鼠為糖尿病小鼠模型#65377;

剔除不合格小鼠，選取造模成功的小鼠60只分為6組，每組10只#65377;動模對照組，每日1%CMC-Na溶液灌胃;陽性對照組，每日消渴丸灌胃;鷹嘴豆提取部位Ⅰ#65380;Ⅱ#65380;Ⅲ#65380;Ⅳ提取物篩選組，均按原生藥40g·kg^-1的高劑量折算灌胃給藥，按體重隨時調(diào)整用藥劑量，連續(xù)灌胃7d#65377;于第7d，禁食5h后給藥， 給藥后2h測血糖#65377;各給藥組血糖值分別與動模組及給藥前血糖值進行t檢驗，結果見表3#65377;

由表3可見鷹嘴豆提取部位Ⅲ用藥1周后， 血糖值與用藥前成模小鼠血糖值相比顯著降低，但隨給藥時間延長對四氧嘧啶糖尿病小鼠的降血糖作用漸減，持續(xù)用藥達2周時對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的降糖作用消失#65377;

3 結論

糖尿病是一種胰島素絕對或相對缺乏，或胰島素抵抗所致的慢性病#65377;如果胰島β細胞合成變異胰島素或胰島素原結構發(fā)生變化，不能被蛋白酶水解均可導致Ⅱ型糖尿病的發(fā)生;而如果β細胞遭到自身免疫反應或化學物質(zhì)的破壞，細胞數(shù)顯著減少，合成胰島素很少或根本不能合成胰島素，則會出現(xiàn)Ⅰ型糖尿病#65377;胰島素循環(huán)過程中抗胰島素的物質(zhì)增加也可引起糖尿病，它們可以是胰島素受體抗體或激素類物質(zhì)等#65377;受體數(shù)量減少或受體與胰島素親和力降低以及受體的缺陷，均可引起胰島素抵抗等，最終使β細胞逐漸衰竭，血漿胰島素水平下降[7]#65377;因此，在胰島素的產(chǎn)生#65380;體內(nèi)循環(huán)#65380;對靶細胞作用這三個步驟中任一環(huán)節(jié)均可引起糖尿病#65377;

通過上述實驗篩選出的提取部位Ⅲ可顯著降低正常雄性ICR小鼠空腹血糖;可顯著降低腎上腺素高血糖小鼠空腹血糖并改善小鼠肝糖原的低減#65380;增加肝糖原含量;但對四氧嘧啶糖尿病小鼠無降糖作用;根據(jù)以上試驗結果，我們認為鷹嘴豆提取部位Ⅲ是篩選后的降血糖有效部位#65377;由于四氧嘧啶糖尿病模型小鼠類似于Ⅰ型糖尿病模型，我們推測鷹嘴豆有效部位Ⅲ對Ⅰ型胰島素依賴型糖尿病無治療作用#65377;鷹嘴豆有效部位Ⅲ降糖的作用可能是通過促進外周組織和靶器官對糖的利用，通過對腎上腺素的拮抗作用而降低血糖，不排除其降糖機理與胰外途徑，特別是增加肝糖原貯存#65380;減少肝糖原分解相關;也不排除改善糖尿病小鼠肝內(nèi)糖代謝紊亂，減少糖原分解#65380;降低糖異生增強肝細胞合成糖原的功能， 從而降低血糖;也可能是通過延緩腸道對葡萄糖的吸收而降低血糖;不排除增加胰島素的敏感性改善胰島素抵抗的作用#65377;

參考文獻

1#65380;新疆維吾爾自治區(qū)衛(wèi)生廳.維吾爾藥材標準（1992年版，上冊）[M].新疆：新疆科技衛(wèi)生出版社，1992：406-407

2#65380;鄭卓杰.中國食用豆類學[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1995：265-267

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(收稿日期:2007.12.1)