燈盞細辛等８種中藥對人醛糖還原酶的抑制作用

　　摘要：目的：觀察燈盞細辛等8種中藥對人醛糖還原酶(aldose reductase，AR)活性的影響。方法：在體外模型下用酶法對8種中藥的AR活性抑制率進行了測定。結果：8種中藥對人AR均有不同程度的抑制作用，其中燈盞細辛有較強的活性，強于陽性對照藥槲皮素。結論：從中藥中尋找高效低毒的醛糖還原酶抑制劑具有很大優勢。
　　關鍵詞：醛糖還原酶；抑制作用；燈盞細辛
　　中圖分類號：R285.5　文獻標識碼：A　文章編號：1007－2349(2008)03－0042－01
　　
　　高血糖引發的糖尿病(中醫稱為“消渴病”)慢性并發癥(DCC)諸如神經、腎臟、視網膜病變和白內障等，極大地增加了心臟病、中風、失明、截肢和。腎衰竭的危險性。現代醫學研究證明DCC與多元醇通路相關，醛糖還原酶(aldosereduc－tase，AR)作為多元醇通路的限速酶，就成了延緩和防治DCC的關鍵因素，尋找有效、低毒的醛糖還原酶抑制劑對防治糖尿病并發癥具有重要意義，為此筆者研究觀察了燈盞細辛等8種常用于治療消渴病中藥對人AR的抑制作用。結果表明，這8種中藥對人AR均有不同程度的抑制作用。
　　
　　1　材料與方法
　　
　　1.1　儀器與試劑　UV－1600 SHIMADZU紫外可見分光光度計(日本島津公司)，NADPH，DL－甘油醛，槲皮素，人AR(日本大阪和光藥業公司)，其余試劑均為日本產分析純。中藥購自云南省藥材公司。
　　1.2　提取　各種中藥材10g，70％(體積百分數)乙醇100mL回流提取4h，2次，真空干燥后用DMSO配成3.3mg／mL的樣品溶液。
　　1.3　實驗方法　酶活性測定，反應液包括pH6.2的0.2mol／L磷酸鹽緩沖液700μL，1.5mmol／LNADPH 100μL，100mmol／L的DL－甘油醛100μL，3×10^2-unit／mL的人AR100μL。25℃混勻20s后反應180s，340nm處吸光值(AAbs)的下降值表示人AR活性，各個樣品測定2次取平均值。中藥對人AR的抑制率是指在上述反應體系中加入3μL樣品后酶活性的降低程度。空白測定，樣品用DMSO溶劑，人AR用磷酸鹽緩沖液；對照測定樣品用DMSO溶劑；陽性對照用3μg／mL的槲皮素(目前AR抑制劑上市數量有限，槲皮素活性適中，多數研究者選其為陽性對照)。人AR抑制率(％)=[1-(△As樣品值-△Ab空白值)／(△Ac控制樣值-△Ab空白值)]×100％。
　　
　　2　結果與討論
　　
　　8種常用于治療消渴中藥對人AR的抑制作用結果見表1。
　　
　　可以看出8種中藥對人AR均有不同程度的抑制作用。其中燈盞細辛活性強于陽性對品照槲皮素。世界各國許多科學家都在致力于尋找高效、低毒的醛糖還原酶抑制劑(ARIs)。中醫藥治療消渴病有幾千年的歷史，因此從中藥中尋找高效低毒的ARIs具有很大優勢。中醫認為消渴的發生初期為陰虛燥熱，治療多采用滋陰清熱，后期則屬久病入絡，治療多采用活血化瘀。糖尿病并發癥多在患病數年后發生，多屬于后期的久病人絡階段。本研究中的8種中藥為臨床常用于治療消渴的中藥，其中菊花、女貞子、生地、山藥、黃芪具有清熱滋陰、益氣生津作用，燈盞細辛、益母草、三七具有活血化瘀作用。抑制活性較強的燈盞細辛屬于活血化瘀之品，與中醫糖尿病并發癥屬久病入絡病機相符，近年來的臨床研究也表明燈盞細辛對糖尿病合并癥有顯著治療作用，值得對其治療機理進一步研