雙七接骨膠囊質(zhì)量標準中鑒別方法的探討

　　摘要：目的：探討雙七接骨膠囊質(zhì)量標準中鑒別的方法。方法：采用顯微、薄層色譜及理化鑒別的方法，對方中的地鱉蟲、三七、自然銅等藥物進行定性分析。結(jié)論：采用的方法，擬訂的標準能有效地控制雙七接骨膠囊的質(zhì)量。
　　關(guān)鍵詞：雙七接骨膠囊；鑒別方法；探討
　　中圖分類號：R927.11　文獻標識碼：A　文章編號：1007－2349(2008)03－0046－02
　　
　　雙七接骨膠囊(現(xiàn)獲批文為滇藥制字Z05F02806)是玉溪市中醫(yī)醫(yī)院骨傷科治療骨折、跌打損傷的專科用藥，醫(yī)院制劑室將其研制成膠囊劑供臨床使用，為有效地控制其質(zhì)量，故對其質(zhì)量標準中薄層色譜鑒別方法進行探討。
　　
　　1　試藥樣品
　　
　　1.1　試藥　使用的試劑均采用分析純試劑；薄層層析板，采用硅膠G(青島海洋化工有限公司制造)手工鋪板制備。對照品三七皂苷、人參皂苷Rbl、Rgl由中國藥品生物制品所生產(chǎn)，代碼110704－200319；0703－200120。
　　1.2　樣品　雙七接骨膠囊由玉溪市中醫(yī)醫(yī)院制劑室生產(chǎn)。
　　1.3　處方　地鱉蟲、煅自然銅、三七、血竭、續(xù)斷、乳香等。
　　1.4　制法　血竭、部分地鱉蟲，粉碎備用，其余藥物水煮提取。第1次2h，第2、3次各1h。提取液濃縮成稠膏，加入地鱉蟲細粉混勻、干燥、粉碎、加入血竭細粉，混勻后填充膠囊。調(diào)粒重為0.33g，每粒相當于原生藥約1g。成品為膠囊劑，內(nèi)容物為棕紅色至褐色的粉末；氣腥，味微苦微咸。
　　
　　2　質(zhì)量標準中鑒別標準的制定
　　
　　2.1　地鱉蟲的顯微鑒別　取膠囊的內(nèi)容物，稀甘油制片，置顯微鏡下觀察：可見地鱉蟲的體壁碎片黃色或棕紅色，有圓形毛窩，直徑5～32μm，可見長短不一的剛毛；已脫落的剛毛散在，長短不一。陰性對照品未見以上特征。(不含地鱉蟲的陰性對照品：按處方比例，取除地鱉蟲外的其余藥材，按制劑工藝制備陰性模擬制劑。)見圖1。
　　2.2　三七的薄層鑒別
　　2.2.1　樣品溶液的制備　取膠囊內(nèi)容物2g，加乙醇15mL浸漬30min以上，不時振搖(或超聲提取5rain)，濾過(藥渣備用)，濾液揮干，殘渣加水5mL充分攪拌使溶解，濾過(水不溶物備用)。濾液加水飽和的正丁醇溶液5mL提取，分取正丁醇層，加正丁醇飽和的水5mL洗滌，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液。
　　2.2.2　三七對照品溶液的制備另取人參皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷Rt對照品，加甲醇制成每1mL各含0.5mg的混合溶液，作為對照品溶液。
　　2.2.3　陰性溶液的制備 按處方比例另取除三七外的其余藥材，按制劑工藝制備陰性模擬制劑，后按上述供試品溶液制備，同法制得缺三七的陰性對照溶液。
　　2.2.4　薄層色譜鑒別 照薄層色譜法(《中國藥典》附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液15～20μl、對照品溶液2～4μl，陰性對照液15～20uｌ分別點于同一硅膠G薄層板上，以1，2二氯乙烷一正丁醇一甲醇一水(30:40:15:25)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。陰性對照無干擾。見圖2。
　　
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　　2.3　自然銅的化學鑒別取三七樣品溶液制備中的藥渣，揮干，取約0.5g，加稀鹽酸試液5mL，活性炭0.5g加熱煮沸數(shù)分鐘，濾過，取濾液4～5滴，置白瓷滴板內(nèi)，加亞鐵氰化鉀試液1～2滴，即生成深蘭色沉淀(或加硫氰酸銨試液，即顯血紅色)。不含自然銅的陰性對照溶液呈負反應。陰性對照無干擾。(陰性對照溶液的制備：按處方比例另取除自然銅外其余藥材，按制劑工藝制備陰性模擬制劑，后按上述供試品溶液制備，同法制得缺自然銅的陰性對照溶液)。
　　2.4　血竭的化學鑒別 取三七樣品溶液制備項下的水不溶物，加乙醇2mL溶解，取溶液1mL，加鹽酸10滴及水10～15滴，產(chǎn)生棕黃色沉淀。沉淀放置后逐漸凝成棕黑色樹脂狀物。而陰性對照溶液為負反應，無干擾。(陰性對照溶液的制備：按處方比例另取除血竭外的其余藥材，按制劑工藝制備陰性模擬制劑，后按供試品溶液制備，同法制得缺血竭的陰性對照溶液)。
　　
　　3　討論
　　
　　方中三七、血竭散瘀消腫，止痛止血，乳香行氣止痛，氣行則血行，瘀散則痛止。當歸、續(xù)斷、補肝腎，續(xù)筋骨，補血行血，扶正。自然銅、地鱉蟲續(xù)筋接骨止痛通經(jīng)絡(luò)，現(xiàn)代藥理研究表明兩藥相配可加快骨痂的形成，促進骨折的愈合，加快瘀血的吸收。全方共奏活血消腫止痛，續(xù)筋接骨之效。
　　本制劑工藝中其地鱉蟲加入了部分原生藥，所以實驗用顯微法，對地鱉蟲進行鑒別，將地鱉蟲體壁碎片的顯微特征列為鑒別依據(jù)，具有專屬性。
　　薄層色譜法，對三七的主要成分進行專屬性鑒別，三七主要含皂苷、黃酮苷、本實驗選用其活性成份，達瑪烷型的四環(huán)三萜皂苷的人參皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷R1為對照品，進行薄層色譜鑒別。專屬性強，陰性對照均無干擾。
　　血竭的主要成分為酸性樹脂，可溶于乙醇，在酸性條件下樹脂析出，借此對其進行鑒別。自然銅的主要成分為鐵的化合物，試驗對其中的鐵離子進行鑒別。所建立方法結(jié)果穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，專屬性強。陰性對照均無干擾。
　　
　　4　結(jié)論
　　
　　以上鑒別實驗均有較強的專屬性，結(jié)果穩(wěn)定重現(xiàn)行好，可用于該制劑質(zhì)量控