山茱萸的研究進展

中圖分類號：R97 文獻標識碼：A 文章編號：1006-1533(2008)10-04

山茱萸，別名山萸肉、蜀棗、棗皮、萸肉等，原植物為山茱木屬落葉小喬木。主要分布在我國浙江、河南、山東、安徽等地。臨床上習(xí)慣以除去種子的成熟果實入藥，其味酸、澀、微溫，歸肝腎經(jīng)。中醫(yī)認為，山茱萸具有補益肝腎、澀精固脫的功效，臨床上主治眩暈耳鳴、腰膝酸痛、陽痿遺精、崩漏帶下、遺尿尿頻、大汗虛脫、內(nèi)熱消渴等癥。本文作者查閱了近幾年文獻報道，對其化學(xué)成分、含量測定、指紋譜的質(zhì)量控制、藥理等研究進展作一綜述。

1 山茱萸的化學(xué)成分研究

山茱萸的化學(xué)成分研究始于20世紀30年代，Peter等進行治療夜盲癥生物化學(xué)試驗時，發(fā)現(xiàn)了山茱萸果實中含有維生素A類物質(zhì)，其含量為0.007 5%［1］，日本學(xué)者于20世紀80年代，系統(tǒng)地對山茱萸進行了一系列的研究 ［2～4］。新鮮山茱萸果肉中有機化學(xué)物質(zhì)主要有還原糖、多糖、有機酸、酚類、苷類、環(huán)烯醚萜類、皂苷、鞣質(zhì)、蛋白質(zhì)、氨基酸、黃酮、蒽醌、甾體、三萜、內(nèi)酯、香豆素、揮發(fā)油、維生素B1、維生素E、脂肪酸及微量元素等，果肉及果核均含有十幾種氨基酸和豐富的維生素B1、維生素C以及20多種礦物質(zhì)。果核中同樣富含營養(yǎng)素：蛋白質(zhì)、脂肪、糖、灰分及粗纖維、21種礦物元素，其中磷的含量比果肉內(nèi)的高，提示果核也有綜合利用的價值［1］。

從果肉中分離得到的主要成分可分為：1）糖類——葡萄糖、果糖、蔗糖和配糖體等。2）有機酸類及酯類——沒食子酸、蘋果酸、酒石酸。五環(huán)三萜酸及其酯類——2α-羥基熊果酸、齊墩果酸和熊果酸等。環(huán)烯醚萜類——馬鞭草苷即山茱萸苷、莫諾苷、馬錢子苷、獐牙菜苷、7-氧-甲基莫諾苷、7-脫氧馬錢子苷和脫水莫諾苷元。山茱萸苷（該苷為雙環(huán)烯醚萜類化合物，其中馬錢子苷和莫諾苷兩部分通過醚鏈相連接）。3）鞣質(zhì)——特里馬里Ⅰ和Ⅱ，異訶子素，水楊梅素D，2，3-二氧-沒食子酰-β-D-葡萄糖，來木鞣質(zhì)A～G，喜樹鞣質(zhì)A、B，沒食子酰鹽單萜葡萄糖苷。4）其它部分——β-谷甾醇、5，5-二甲糖醛醚以及5-羥甲基糖醛。

從山茱萸果核中分離得到的單體成分有：白樺脂酸、熊果酸、β-谷甾醇、沒食子酸、蘋果酸、沒食子酸酯。果核的油脂主要是月桂酸硬脂酸、棕櫚酸、油酸、亞油酸、亞麻酸等脂肪酸。不久前還發(fā)現(xiàn)一種抗氧化活性成分megallare。另外，新鮮山茱萸中主要含有鞣質(zhì)［5，6］。

2 山茱萸飲片的質(zhì)量控制

山茱萸的炮制品有酒制品、蒸制品、醋制品、鹽制品等［7］，張海珍等［8］對來源于浙江省3個主產(chǎn)區(qū)的山茱萸藥材，以薄層掃描法測定了其中的熊果酸含量，對市售三批山茱萸藥材蒸制前后的熊果酸含量變化進行了考察［9］，結(jié)果表明山茱萸蒸制前后熊果酸含量無顯著差異。席萍等［10］利用雙波長薄層掃描法測定了4批12個山茱萸樣品中熊果酸含量。杜小偉等［11］ 對不同產(chǎn)地山茱萸中馬錢子苷的含量進行測定，結(jié)果表明馬錢子苷的含量比較穩(wěn)定，但制山茱萸中馬錢子苷含量較生品有所損失，含量差異不大。王平［12］用薄層色譜分析了山茱萸及其炮制品酒山茱萸、清蒸山茱萸中的化學(xué)成分，結(jié)果顯示三者含有相同的化學(xué)成分。王曉紅［13］采用雙波長薄層掃描法考察了山茱萸經(jīng)過酒制、蒸制、醋制、鹽制后熊果酸的變化，結(jié)果表明酒制品、鹽制品炮制變化不大，蒸制品含量有所下降，而段天璇等［14］利用HPLC考察山茱萸炮制前后沒食子酸溶出及煎出量，結(jié)果生品中沒食子酸溶出量明顯低于炮制品，炮制輔料、黃酒、白酒、醋、鹽水對溶出及煎出量影響不大。不同加工方法的山茱萸中均含有一定的馬錢素，生品含量高于炮制品，果肉的含量高于果核［15］。

3 山茱萸不同活性成分的含量測定

中國藥典都以TLCS測定熊果酸的含量來控制山茱萸質(zhì)量［16］，但現(xiàn)代藥理研究證明，山茱萸調(diào)節(jié)免疫的活性成分主要在其總苷類部分［17］。同時，熊果酸在自然界分布較廣［18］，且是脂溶性成分，這和山茱萸用水煎劑或低濃度乙醇提取是不相一致的，因此，近幾年來很多學(xué)者探索用不同的方法測定山茱萸中其它活性成分的含量。劉偉等［19］采用雙波長薄層掃描法測定山茱萸中熊果酸和齊墩果酸含量。李克明等［20］用薄層掃描法測定了三批山茱萸中馬錢子含量。顧世海等［21］利用HPLC測定了2批山茱萸中馬錢素的含量。張?zhí)m桐［22］利用HPLC同時測定了山茱萸注射液中馬錢素和莫諾苷的含量。趙蓉［23］用HPLC法測定山茱萸配方顆粒中馬錢苷子的含量。沈健等［24］用HPLC法測定山茱萸環(huán)烯醚萜苷中莫諾苷的含量。徐德然［25］采用HPLC法測定山茱萸藥材、知柏地黃丸中齊墩果酸與熊果酸含量，其精密度優(yōu)于薄層掃描法。王天勇［26］用反相-HPLC測定七種中藥中的齊墩果酸。宋良科等用HPLC法測定山茱萸果實不同部位熊果酸的含量，結(jié)果顯示果皮的含量遠高于果實與果核。張聰?shù)龋?7］ 首次用HPLC對不同產(chǎn)地山茱萸中的沒食子酸與蘋果酸進行含量分析，對山茱萸的質(zhì)量控制與質(zhì)量標準研究提供了實驗依據(jù)。

綜上所述，國內(nèi)外學(xué)者在山茱萸化學(xué)成分研究方面做了大量的工作，山茱萸的活性成分，如環(huán)烯醚苷類、多糖類、多酚類等已逐漸被認識，山茱萸的質(zhì)量控制已從單一的熊果酸含量測定，到測定齊墩果酸與熊果酸，但要建立一個切實可行、更多方面反映山茱萸內(nèi)在品質(zhì)的質(zhì)量標準，還應(yīng)建立山茱萸多組分、多指標的含量控制模式。

4 山茱萸的指紋圖譜應(yīng)用及發(fā)展

每一味中藥就是一個復(fù)方制劑，任何一個成分均不能反映中醫(yī)用藥所體現(xiàn)的整體療效，因此任何單一的活性成分或指標成分都難以有效評價中藥真?zhèn)蝺?yōu)劣，更何況所測的指標成分或活性成分是多種中藥的共性成分，如齊墩果酸、熊果酸等，更降低了鑒別的準確性和專屬性。通過建立中藥指紋圖譜可以全面反映中藥所含內(nèi)在化學(xué)成分的種類與數(shù)量，進而反映中藥的質(zhì)量，確保藥品的一致性，保證療效安全可靠。

張延妮等［28］用HPLC－庫侖電極陣列法檢測山茱萸，采用保留時間和峰面積比值兩個參數(shù)與標準品比較來確定指紋圖譜。李小娜等［29］用HPLC法建立山茱萸提取液指紋圖譜，在此基礎(chǔ)上進行了山茱萸不同有效部位提取液的化學(xué)成分分析，同時首次考察了大鼠給藥后所得血清指紋圖譜，進行了體內(nèi)外指紋圖譜化學(xué)成分的分析。蔣迎道等［30］運用分離效率高、速度快、樣品量小的毛細管電泳法建立指紋圖譜。韓志慧等［31］用HPLC法對山茱萸的脂溶性成分的指紋圖譜研究表明，不同山茱萸藥材色譜圖中各共有指紋峰相對保留時間符合程度較好，但相對峰面積差異較大，可能與產(chǎn)地、采集時間、貯存條件等因素有關(guān)。張聰?shù)冗\用RP-HPLC對山茱萸的各種色譜峰的相對保留值和其相應(yīng)的相對峰面積構(gòu)成山茱萸的色譜相對保留值指紋譜，實現(xiàn)了圖譜的數(shù)據(jù)化［32］ ，引入了一系列參數(shù)：重疊率，特征指紋峰，共有峰，八強峰等。量化描述了各地山茱萸的藥材特質(zhì)，為對重要藥材的鑒定和質(zhì)量控制提供了科學(xué)依據(jù)，并用山茱萸藥材特征指紋譜對六味地黃丸中山茱萸進行了指紋鑒定。趙永席等［33］從峰重疊率評價山茱萸之間的相似度，用聚類分析從成分含量反映樣品之間的相關(guān)性。王花紅等［34］用乙腈－磷酸梯度洗脫，測定多批樣品圖譜，共確定10個共有指紋峰，計算相似度，結(jié)果表明，指紋圖譜的相似度大小與藥材品質(zhì)有關(guān)。何娟等［35］也進行了山茱萸HPLC指紋圖譜的研究。

5 藥理學(xué)研究

5.1 對免疫系統(tǒng)的影響?yīng)?/p>

5.1.1 免疫增強作用

10 g/kg-1劑量能夠升高小鼠血清溶血素抗體和血清抗體IgG、IgM含量，提示山茱萸對體液免疫有一定的增強作用［36］。

山茱萸水提物對小鼠腹腔巨噬細胞造血生長因子集落刺激因子（CSFs）沒有增強作用，而能使LPS激活小鼠腹腔巨噬細胞產(chǎn)生CSFs的作用增強，50 μg/mL時增強作用最大。同大多數(shù)植物多糖一樣，山茱萸糖具有明顯促進免疫反應(yīng)的作用，能促進吞噬、激活NK細胞和巨噬細胞系統(tǒng)刺激分泌 ［37，38］。

5.1.2 山茱萸總苷的免疫抑制作用

山茱萸總苷是一種免疫抑制劑，體內(nèi)外均能抑制淋巴細胞轉(zhuǎn)化，淋巴因子激活的殺傷細胞（LAK細胞）增殖和IL-2的產(chǎn)生，并能抑制小鼠和人混合淋巴細胞反應(yīng)（MLR）。趙武述等［17］研究了山茱萸總苷抑制小鼠免疫的體內(nèi)效應(yīng)及對移植心臟存活時間的延長作用。山茱萸總苷體外能抑制細胞毒性T細胞（CTL）的誘導(dǎo)和增殖，其抑制作用呈劑量依賴關(guān)系，并能抑制IL-2受體的表達。山茱萸總苷能抑制排斥活性，且與CsA有加和作用［39，40］。

5.2 降血糖作用

自古就有山茱萸應(yīng)用于糖尿病（中醫(yī)稱為“消渴癥”）治療的記載。20世紀80年代初期，日本學(xué)者通過對八味丸的拆方研究，發(fā)現(xiàn)其中只有山茱萸對鏈脲佐菌素（streptozolocin，STZ）誘發(fā)的大鼠糖尿病動物模型有降血糖作用，并進一步闡明其有效主要成分是熊果酸和齊墩果酸［2］。山茱萸水提取物不僅對腎上腺素或四氧嘧啶誘發(fā)的糖尿病大鼠有明顯的降血糖作用，并能降低高血糖動物的全血黏度和血小板聚集性，但對正常大鼠的血糖無明顯影響。因此山茱萸可能對Ⅰ型（胰島素依賴性）糖尿病患者有治療效果［41］。

5.3 抗癌作用

山茱萸在體外能殺死腹水癌細胞。臨床上用于放療、化療后白細胞減少癥、原發(fā)性肝癌、轉(zhuǎn)移性肝癌、宮頸癌出血等［42］。

山茱萸中的熊果酸在體外能快速有效地殺死培養(yǎng)細胞，熊果酸0.125 mg/mL時可殺死70%的艾氏腹水癌細胞、87%的SP20細胞和97%的小鼠淋巴細胞，使培養(yǎng)的淋巴細胞幾乎完全失去淋轉(zhuǎn)、IL-2生成及LAK細胞產(chǎn)生的能力；但腹腔注射熊果酸的小鼠上述3項免疫指標均明顯提高［36］。無論體內(nèi)、體外，合適濃度的山茱萸中的馬錢素則對上述3項指標有促進作用，高濃度則有抑制作用［39］。

山茱萸總多糖對HL-60細胞體外增殖具有一定的抑制作用，并呈劑量依賴性（γ=0.990 4）。山茱萸誘導(dǎo)HL-60細胞凋亡是其作用機制之一。

5.4 降血脂作用

山茱萸醇提物（200 g/kg）可明顯降低正常小鼠血糖、血清總膽固醇和三酰甘油。山茱萸醇提物對ADP誘發(fā)的家兔血小板體外聚集有明顯抑制作用。0.5、1.0 g/kg劑量整體給藥，對家兔血小板聚集有明顯抑制作用，并有不同程度的降低正常家兔全血黏度的作用。山茱萸醇提物10、20 g/kg劑量對ADP引起的血小板聚集誘發(fā)的小鼠急性肺栓塞有一定的拮抗作用［41］。

5.5 抗休克和強心作用

中醫(yī)文獻記載，山茱萸有“救脫”（抗休克）的功效，用山茱萸注射液靜脈給藥，能升高休克動物頸動脈血壓和增加血壓心搏波振幅的作用。馬允慰［43］報道，山茱萸亦有抗動物（大鼠、家兔）失血性休克的作用，在足量補液的情況下，能顯著延緩失血造成的血壓下降，延長其存活時間。山茱萸肉注射液有增加心肌收縮力、提高心率、擴張外周血管、增強心臟泵血、抑制血小板聚集和血栓形成的作用，這對改善失血性休克具有重要意義。從山茱萸中分離出2個環(huán)烯醚萜類物質(zhì)，其中之一具有抗失血性休克和心源性休克的作用。最近臨床上已有重用山茱萸肉救治成功的病例報道［44］。

5.6 抗炎和殺菌作用

山茱萸水煎劑對金葡球菌、傷寒桿菌和志賀痢疾桿菌等有抑制作用。不少研究證明，其成分沒食子酸是抑制金葡球菌的活性成分。山茱萸水煎劑還能降低大鼠腎上腺內(nèi)維生素C含量，提示其抗炎作用機制可能與興奮垂體-腎上腺皮質(zhì)系統(tǒng)有關(guān)［45］。山茱萸總苷不僅能抑制由角叉菜膠所致的大、小鼠非特異性腫脹，對弗氏完全佐劑所致的免疫性炎癥模型——大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎也有顯著抑制作用，這與上述總苷具有免疫抑制作用之說是一致的［19］。

山茱萸中的齊墩果酸有輕微強心利尿作用，臨床上也用于治療急性病毒性肝炎［1］。山茱萸有抗實驗性肝損害作用，用CCl4造成肝損害后，給予齊墩果酸，能顯著降低ALT及AST，并從肝臟的病理組織切片得到證實。

5.7 抗衰老作用

山茱萸增加血紅蛋白含量的作用極其明顯，同時具有明顯增強小鼠體力和抗疲勞能力以及提高缺氧耐受力、記憶力的作用。從而說明，該藥可增進小鼠對外界環(huán)境的適應(yīng)能力，提高小鼠體力和腦力的能力［20］。

5.8 治療不育癥

山茱萸中的馬鞭草苷環(huán)烯醚萜苷類，這類化合物具有較強的生物活性，過去報道稱它有與麥角相似的收縮子宮的作用，近年發(fā)現(xiàn)它有興奮子宮、促進子宮發(fā)育的作用，與前列腺素E2（PGE2）合用有增強效應(yīng)。但馬鞭草苷元有很強的抑制子宮興奮作用，兩者相拮抗。馬鞭草苷還可促進兔血液凝固，并能促進哺乳動物持久的乳汁分泌，其大劑量可促使蛙黏膜剝離，并引起痙攣。

山茱萸在許多國家用于治療不育癥，最近，國外學(xué)者用HPLC法從山茱萸中分離出4重組分(C1、C2、C3、C4)。其中C4組分有提高人精子活力作用。推測C4很可能是提高精子活力的有效成分。

6 結(jié)語

山茱萸是屬于常用藥材，隨著研究的深入，許多有效成分被發(fā)現(xiàn)與運用，采用指紋圖譜技術(shù)，又能全面地客觀科學(xué)地對其質(zhì)量作出評價，為在臨床上的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

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(收稿日期：2008-07-16)

魚骨鯁喉的民間驗方

驗方一：橄欖青果核磨汁，用作含咽劑，民間經(jīng)驗掘稱有顯著效果。驗方二：韭菜洗干凈，不必切，放入粥中煮，食下后，魚骨可隨韭菜條脫離喉道，與類便一同排出。驗方三：縮沙和甘草煎汁，飲后，靜臥片刻，魚骨即可溶化。驗方4：取南天之葉與柚的種子少許，煎汁服飲，魚骨即可化下。

摘自科學(xué)技術(shù)文獻出版社出版的《中國秘方全書》