松潘烏頭炮制前后生物堿類成分變化研究

賈　璞　肖美娜　崔九成

（陜西中醫(yī)學(xué)院，陜西 咸陽 712046）お

摘 要：目的：通過對松潘烏頭炮制前后生物堿類成分的比較，為進(jìn)一步制定其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。方法：對炮制前后樣品采用薄層色譜法鑒別，用酸堿滴定法測定總生物堿的含量。結(jié)論：松潘烏頭炮制前后生物堿在種類和含量上均發(fā)生了明顯變化；松潘烏頭生品總生物堿含量為0.9342%，炮制品中總生物堿含量為0.6427%，符合2005版《中國藥典》的規(guī)定。關(guān)鍵詞：松潘烏頭；生物堿；薄層色譜；含量測定

中圖分類號：R283文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1673-2197（2009）01-0025-02オ

松潘烏頭別名羊角七、火焰子、蔓烏藥、藤烏藥，為毛茛科烏頭屬植物松潘烏頭（Aconitum sungpanense Hand.-Mazz.）的塊根。性溫，味辛、苦，有大毒。具有祛風(fēng)止痛，散瘀消腫之功效。民間常用于跌打損傷、風(fēng)濕、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等引起的疼痛。據(jù)文獻(xiàn)報道，松潘烏頭的主要化學(xué)成分為多種生物堿，且以二萜類生物堿為主^[1，2]。

1 實驗材料

1.1 儀器和試藥

堿式滴定管，酸式滴定管；甲基紅指示劑，酚酞指示劑，甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑，無水碳酸鈉，固體氫氧化鈉，濃硫酸，濃鹽酸，乙醚，氯仿，乙醇，濃氨水（試劑均為分析純）。1.2 藥材

羊角七松潘烏頭藥材購于陜西眉縣槐芽鎮(zhèn)，經(jīng)陜西中醫(yī)學(xué)院生藥教研室王繼濤副教授鑒定為毛茛科植物松潘烏頭（Aconitun. sungpanense Hand.-Mazz）的根。炮制品參照2005版《中國藥典》草烏炮制方法加工而成。

2 實驗方法

2.1 薄層色譜檢識

2.1.1 薄層色譜條件

吸附劑：硅膠G板（以0.5%羧甲基纖維素鈉為粘合劑）。

展開劑：三氯甲烷-甲醇（15：1）。

2.1.2 對照品溶液制備

精密稱取烏頭堿對照品5.23mg，加無水乙醇2.6mL，溶解，使?jié)舛葹?.012mg/mL^[3]。

2.1.3 供試品溶液制備

精密稱取松潘烏頭生品及炮制品粉末各3g，加10%的氨溶液1mL，乙醚10mL浸潤，加氯仿50mL，冷浸24h，過濾，濾液揮干，殘渣三氯甲烷溶解，作為供試品溶液。

2.1.4 薄層方法與結(jié)果

分別吸取對照品溶液及供試品溶液適量，點于同一硅膠G薄層板上，置于濃氨水飽和的展開槽中，按上述展開劑展開，取出，晾干，噴以碘化鉍鉀顯色，日光下檢識顯橘紅色斑點（見圖1）。

注：1.為生品供試液，2.為炮制品供試液，3.為烏頭堿對照品。

2.2 含量測定^[4]

2.2.1 溶液配制

參照2005版《中國藥典》方法配制0.1mol/L NaOH溶液、0.5mol/L H2SO4溶液及氨試液。

2.2.2 供試品溶液制備

取松潘烏頭生品、炮制品粗粉各10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加乙醚-三氯甲烷（3：1）混合液50mL與氨試液4mL，密塞，搖勻，放置過夜，濾過，濾渣再加乙醚-三氯甲烷（3：1）的混合液50mL，連續(xù)振搖1h，濾過，濾渣以乙醚-三氯甲烷（3：1）混合液洗滌3～4次，每次15mL，濾過，洗液與濾液合并，回收至少量，低溫蒸干，殘渣加乙醇5mL使溶解，備用。

2.2.3 總生物堿含量測定

上述供試品溶液加入硫酸滴定液（0.01mol/L）15mL、水15mL與甲基紅指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液（0.02mol/L）滴定至黃色。每1mL硫酸滴定液（0.0lmol/L）相當(dāng)于12.9mg的烏頭堿（C34H47NO11）。結(jié)果見表1、表2。

注：滴定所用的氫氧化鈉溶液為2.2.1項下稀釋的溶液，濃度為0.01838mol/L。

根據(jù)所測定的數(shù)據(jù)，松潘烏頭生品中總生物堿含量為0.9342％，RSD為1.18％（n=5）。

根據(jù)所測得的結(jié)果，松潘烏頭炮制品總生物堿含量為0.6427％，RSD為0.32％（n=5）。

（1）薄層色譜結(jié)果顯示，松潘烏頭炮制前后生物堿的種類發(fā)生了明顯的變化，炮制品比生品生物堿數(shù)目增多，烏頭堿含量明顯降低，毒性降低。

（2）酸堿滴定法對總生物堿含量測定表明，炮制品總生物堿的含量（0.6427％）低于生品（0.9342％），高于0.20%，符合2005版《中國藥典》規(guī)定^[4]。

（3）本實驗僅就松潘烏頭炮制前后生物堿的變化進(jìn)行了初步的實驗研究，該品作為秦巴地區(qū)特有藥材，有待進(jìn)一步開展化學(xué)、藥效及毒理等方面的研究，為這一資源的合理利用提供科學(xué)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

［1］ 李世全.秦嶺巴山天然藥物志［M］.西安：陜西科學(xué)技術(shù)出版社，1987.

［2］ 趙汝能.甘肅中草藥資源志［M］.上冊.蘭州：甘肅科學(xué)技術(shù)出版社，2004.

［3］ 李奎鸞，柯尊洪，林濤.附子中烏頭堿的薄層鑒定［J］.中成藥，1994，16（1）：13.［4］ 國家藥典委員會.中國藥典［M］.一部.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：26-27.

（責(zé)任編輯：陳涌濤）