沙棘對小鼠免疫功能作用的研究

宓　偉　鞠艷華

（1.濱州醫學院，山東 濱洲256603；2.煙臺市警備區第二干休所，山東 煙臺 264000）お

摘 要：目的：觀察沙棘對小鼠抗體形成細胞的作用。方法：取小鼠24只，隨機分為對照組和實驗組，分別用生理鹽水和100%濃度沙棘浸出液定期給小鼠灌胃，然后進行小鼠抗體產生能力檢測、特異玫瑰花環結形成細胞檢測（SRFC）、血清IgG檢測。結果：實驗組以上三項免疫學指標均有顯著增高，與對照組相比均有非常顯著性差異。結論：沙棘有明顯促進小鼠免疫功能增強的作用。

關鍵詞：沙棘；小鼠免疫功能；研究

中圖分類號：R284文獻標識碼：A文章編號：1673-2197（2009）01-0038-02オ

沙棘（Hippophae rhamnoides L）又名醋柳、酸刺子為胡頹子科多年生灌木或小喬木沙棘的成熟果實和葉。秋、冬二季果實成熟或凍硬時采收，除去雜質，干燥或蒸后干燥。主產于陜西、四川、甘肅、寧夏、山西、遼寧等省。主要功效：益氣生津，祛痰止咳，消食止瀉，活血散瘀^[1]。其化學成分主要有黃酮類、萜類、甾體類、蛋白質和氨基酸類、油和脂肪酸類、揮發油類、有機酸類、糖及微量元素等，是一種營養豐富、藥用價值極高的植物^[5]。近年來引起國內外學者的極大重視。我們主要進行了沙棘對抗體形成細胞作用的研究，旨在為沙棘的臨床應用提供科學依據。

1 材料與方法

1.1儀器與藥物

低溫冷凍離心機（Beckmen，美國）；美國Multiskan產全自動酶標儀；恒溫水浴箱（上海）；電泳儀（上海）；100目不銹鋼網。沙棘（購于附屬醫院中藥房），取100g加水1000mL，文火煎煮2h，去渣濃縮為100mL（濃度為100%）備用。

1.2 實驗動物及分組

取BALB/C純系小鼠24只，體重18~22g，雌雄各半，隨機分為兩組，每組12只，Ⅰ組為生理鹽水對照組，Ⅱ組為藥物實驗組。

1.3 方法

Ⅰ組用生理鹽水灌胃，1次/d，0.5mL/（次?只），共灌胃10次；Ⅱ組用沙棘液灌胃，1次/d，0.5mL/（次?只），共灌胃10次。

1.4 檢測項目

（1）定量溶血分光光度測定法（QHS）^[2]。本法體外測定B細胞產生分泌抗體裂解紅細胞所釋放的血紅蛋白量（以OD值表示），其結果可反映機體體液免疫功能。實驗第5天分別將5%的綿羊紅細胞0.2mL注入各組小鼠腹腔內。第11天頸椎脫臼處死小鼠，常規取脾臟，制備脾細胞懸液，然后脾細胞計數，調整細胞濃度至1×107/mL，將脾細胞懸液均分，每組每只小鼠設3支試管，每管依次加入脾細胞懸液，0.2%綿羊紅細胞（SRBC），1∶10新鮮豚鼠血清（補體）各1mL混勻。另外分別設補體、脾細胞以及SRBC對照管各3支，置37℃水浴1h，2000轉/min離心5min。取上清液用96孔細胞培養板于全自動酶標儀450nm波長處測A值，作為QHS反應值。

（2）特異玫瑰花環形成細胞檢測（SRFC）^[3]。取脾細胞0.1mL（1×107/mL），1%SRFC 0.1mL，小牛血清0.1mL，試管內混勻，4℃放置2h，加結晶紫溶液20μL，計數500個淋巴細胞，求出SRFC/10⁶脾細胞的形成率。

（3）血清IgG檢測^[3]。采用對流免疫電泳實驗，摘除小鼠眼球取血，分離血清，取不同稀釋度血清10μL加入陰極端瓊脂板孔中，將瓊脂板陽極端孔內加入羊抗鼠IgG（1∶32）10μL，將對流免疫電泳通電30min后觀察結果，以血清最高稀釋度仍有明顯沉淀線為準。結果以稀釋度表示。

2 結果

（1）沙棘對抗體形成細胞的影響。

表1結果顯示，用藥組可促進抗體細胞形成，與對照組相比有顯著性差異（P< 0.05）。

（2）沙棘對SRFC的影響。

表2結果顯示，用藥組SRFC產生明顯增強，與對照組相比有非常顯著性差異（P< 0.01）。

（3）沙棘對小鼠IgG的影響。

表3結果顯示，用藥組可明顯促進IgG產生。與對照組相比有顯著性差異（P<0.01）。

3 討論

沙棘是臨床上常用的中藥，用于咳嗽痰多、消化不良、食積腹痛、跌打瘀腫等^[4，5]。現代研究表明：沙棘能顯著增加小鼠血清溶菌酶的含量，極顯著地提高綿羊紅細胞的滴度，也能提高巨噬細胞的吞噬功能，提高淋巴細胞轉化率和自然玫瑰花環形成率，且能明顯增加血清IgG的含量；并有抗心肌缺氧的作用、保肝的作用和抗炎抗放射的作用^[6，7]。本研究重點從細胞及分子水平探討沙棘對抗體形成細胞、IgG分子的影響。實驗證明，沙棘能增強小鼠抗體形成細胞（B細胞）活性，促進B細胞分化、增殖為漿細胞；沙棘組的QHS值增高與對照組相比有顯著性差異（P<0.05），沙棘組SRFC數目明顯高于對照組，與對照組相比有非常顯著性差異（P<0.01），沙棘組的小鼠血清IgG含量增加，與對照組相比有非常顯著性差異（P<0.01）。結果提示機體免疫功能下降者可口服沙棘

以增強機體免疫功能，預防某些疾病。本研究為臨床應用沙棘提供了實驗依據。

參考文獻：

［1］ 高學敏.中藥學［M］.下冊.北京：人民衛生出版社，2000.

［2］ 徐淑云. 藥理學實驗方法［M］.第2版.北京：人民衛生出版社，1992.

［3］ 高美華，馮獻啟，李波清，等. 磁場對SP2/O瘤鼠抗體形成細胞的作用研究［J］.中華理療雜志，1998，21（4）：225.

［4］ 王本祥.現代中藥藥理與臨床［M］.天津：天津科技翻譯出版公司，2004.

［5］ 肖培根.新編中藥志［M］.第二卷.北京：化學工業出版社，2002.

［6］ 邱世翠，李宗山，郭毅，等. 枸杞對輻射損傷小鼠造血功能恢復的影響［J］. 中國中醫藥科技，2000，7（6）：362.

［7］ 高梅，賈鐳，陳芬，等. 虎尿對小鼠淋巴細胞增殖和IL-2產生的影響［J］. 中國實驗臨床免疫學雜志，1999，11（3）：39.

（責任編輯：陳涌濤）