白藜蘆醇制備與制劑研究進(jìn)展

趙海濤　陳為濤　李萬(wàn)忠

（1.安丘市中醫(yī)院，山東 安丘 262100；2.莒南縣人民醫(yī)院，山東 莒南 276600；

3.濰坊醫(yī)學(xué)院，山東 濰坊 261042）お

摘 要：白藜蘆醇具有抗腫瘤、抗突變、抗炎、抗氧化、雌激素調(diào)節(jié)等多方面有益人類健康的生物藥理活性。白藜蘆醇作為來(lái)自種子植物中的抗毒素，對(duì)人類健康有著特殊保健功能，具有較高推廣和綜合利用價(jià)值，引起了生物醫(yī)學(xué)界工作者高度重視。綜述白藜蘆醇在制備和制劑方面的研究進(jìn)展，為開(kāi)發(fā)與利用白藜蘆醇提供依據(jù)。

關(guān)鍵詞：白藜蘆醇；制備；制劑；綜述

中圖分類號(hào)：R283文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1673-2197（2009）01-0113-03オ

迄今為止的研究表明：白藜蘆醇具有抗腫瘤、抗氧化、抗炎、抑制血小板聚集、調(diào)節(jié)免疫等作用，已成為科學(xué)家們高度重視的天然活性成分，可以廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、保健品、食品、化妝品等領(lǐng)域，具有很高的藥用價(jià)值和廣闊的市場(chǎng)前景^[1]。有關(guān)白藜蘆醇的藥理、純化、分析等方面的綜述較多，現(xiàn)就近年來(lái)有關(guān)白藜蘆醇制備與制劑研究進(jìn)展進(jìn)行概述，以期為促進(jìn)白藜蘆醇的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)和利用起到拋磚引玉的作用。

1 白藜蘆醇的生物學(xué)特性

1.1 結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

白藜蘆醇化學(xué)名稱為3，4′，5-三羥基-1，2-二苯乙烯（3，4′，5-trihydrolystilbene），是非黃酮類的多酚化合物。白藜蘆醇的分子式為Cl4H12O3，分子量為228.25，有順、反兩種結(jié)構(gòu)。白藜蘆醇為無(wú)色針狀結(jié)晶，熔點(diǎn)為256～257℃，升華點(diǎn)為261℃。白藜蘆醇易溶于乙醚、氯仿、甲醇、乙醇、乙酸乙酯等。白藜蘆醇對(duì)光不穩(wěn)定，在365 nm的紫外光照下產(chǎn)生熒光，可與三氯化鐵-鐵氰化鉀起顏色反應(yīng)^[2]。

1.2 吸收與代謝

口服白藜蘆醇在腸道以葡萄糖醛酸酯形式易于吸收，人口服白藜蘆醇1.5mg／kg于30 min血中達(dá)高峰，并在120 min恢復(fù)。白藜蘆醇按一室或二室模型分布于肝、脾等組織，主要由尿排出。白藜蘆醇苷靜脈注射兔體內(nèi)后，在體內(nèi)呈二室開(kāi)放模型，提示在兔體內(nèi)由中央室向外周室分布甚快，消除亦頗為迅速，在體內(nèi)不易蓄積^[3]。

1.3 安全評(píng)價(jià)

由于實(shí)驗(yàn)對(duì)象及防治目的不同，關(guān)于有效劑量的報(bào)告亦不同。美國(guó)推薦成人白藜蘆醇的有效劑量為4 mg／d（日服）；白藜蘆醇甙用于防治大鼠休克時(shí)的有效劑量為10 mg／kg（iv）；大鼠口服的最大耐受量達(dá)300 mg／kg；大鼠口服20 mg／d，28 d后，組織學(xué)、血象、生化指標(biāo)等均無(wú)變化；小鼠白藜蘆醇苷的LD50為1000mg／kg（Po）^[3]。

白黎蘆醇為低毒的天然藥物，存在于多種人類食物中，如桑椹、花生、風(fēng)梨、葡萄等，有著較高的使用安全性。白黎蘆醇現(xiàn)有藥理作用的研究大多集中于細(xì)胞及分子水平，而在臨床應(yīng)用方面研究較少，所以在今后的白黎蘆醇研究中，臨床應(yīng)用的安全性、有效性將是一個(gè)重點(diǎn)方向。

2 制備方法

2.1 直接提取法

白藜蘆醇存在于葡萄科、百合科、豆科、傘形科等多種植物中，在花生仁、桑椹、葡萄等中也含有此物質(zhì)^[4]。白藜蘆醇的來(lái)源廣闊，是生產(chǎn)藥品以及保健食品的理想原料^[5]。

2.1.1 滲漉法

將原料粉末用95％（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的乙醇滲漉提取，減壓回收溶劑，用5％（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）酒石酸溶解提取物，酸溶液乙醚萃取得白藜蘆醇提取物^[6]。滲漉法多用不同濃度的乙醇或水作溶劑在室溫下進(jìn)行，適于遇熱不穩(wěn)定成分或含大量多糖藥材的提取。滲漉過(guò)程中，能夠保持一定的濃度差，所以提取效率較高，但是本法存在溶劑用量大，提取時(shí)間較長(zhǎng)等缺點(diǎn)。

2.1.2 加熱回流法

楊連春等將粉碎的紅背絲綢根，用95％乙醇回流提取3次，合并提取液，并減壓回收溶劑得到含有白藜蘆醇的膏狀物^[7]?；亓魈崛》ㄖ腥軇┑倪x擇主要根據(jù)溶劑極性、被提取成分的性質(zhì)、共存成分的性質(zhì)三方面綜合考慮。選擇的溶劑應(yīng)對(duì)有效成分溶解度大，對(duì)其他成分溶解度小；同時(shí)溶劑應(yīng)具有易回收、安全、低毒、廉價(jià)等特點(diǎn)。

2.1.3 超聲提取法

曾里等用超聲波輔助提取虎杖中白藜蘆醇，并用HPLC-MS分析提取物并比較其化學(xué)成分。在使用占空比較小的超聲波輔助提取時(shí)，有利于保持較高的白藜蘆醇相對(duì)含量^[8]。

超聲提取具有設(shè)備簡(jiǎn)單，操作方便，提取時(shí)間短，產(chǎn)率高，無(wú)需加熱等優(yōu)點(diǎn)，在天然化學(xué)成分提取應(yīng)用上已經(jīng)顯示出明顯的優(yōu)勢(shì)，并且已經(jīng)被人們所重視。在國(guó)家有關(guān)項(xiàng)目資助下，超聲提取的工程放大問(wèn)題得以解決，但對(duì)其作用機(jī)制研究有限，缺少針對(duì)多數(shù)中藥成分的提取工藝參數(shù)，故其推廣運(yùn)用受到了很大的限制。

2.1.4 微波提取法（microwave assisted extraction，MAE）

范華均等采用微波輔助提取虎杖中白藜蘆醇，采用掃描電鏡觀察提取后樣品的表面細(xì)胞結(jié)構(gòu)，研究了提取過(guò)程的動(dòng)力學(xué)機(jī)理。結(jié)果表明虎杖微波提取過(guò)程基于細(xì)胞破壁引起的界面反應(yīng)控制，降低了表觀活化能，使得組分表觀速率常數(shù)明顯增大^[9]。

微波提取應(yīng)用于天然藥物，具有穿透力強(qiáng)、選擇性高、速度快、溶劑消耗低、污染小、設(shè)備簡(jiǎn)單及提取收率高等優(yōu)點(diǎn)，受到天然藥物研究和中藥保健品及許多領(lǐng)域的關(guān)注。微波提取過(guò)程中產(chǎn)生熱量，特別適于對(duì)熱穩(wěn)定的成分，而在對(duì)熱敏感物質(zhì)的應(yīng)用上受到一定限制。

2.1.5 堿提取法

蘇文強(qiáng)等采用對(duì)虎杖中白藜蘆醇先用堿水提取，再調(diào)節(jié)溶液pH的方法加以分離，通過(guò)實(shí)驗(yàn)確立了堿提酸沉的最佳提取條件。與有機(jī)溶劑提取法相比，具有工藝簡(jiǎn)單，操作方便，有機(jī)溶劑用量少，成本低，選擇性強(qiáng)，提取率高等特點(diǎn)^[10]。堿提取法原理是利用白藜蘆醇在和某些無(wú)機(jī)堿、堿性鹽作用時(shí)形成酚鹽而溶解，再通過(guò)調(diào)節(jié)溶液pH值使其游離，以此來(lái)富集提取白藜蘆醇。

2.1.6 超臨界流體提取術(shù)（supercritical fluid extraction，SFE）

井山林等以提取液含固量、有效成分提取率為指標(biāo)，采用SFE提取了山葡萄藤中的白藜蘆醇。雖然提取率不高，但溶劑用量少，萃取產(chǎn)物含固量低，說(shuō)明SFE是切實(shí)可行的，但萃取條件有待于進(jìn)一步優(yōu)化^[11]。SFE提取具有常溫?zé)o毒、環(huán)境友好、安全簡(jiǎn)便、產(chǎn)品質(zhì)量高等特點(diǎn)，主要用于低極性小分子、熱敏性及易氧化成分的萃取，加入夾帶劑可改善其提取選擇性。

采用生物發(fā)酵技術(shù)、酶法提取技術(shù)對(duì)原料進(jìn)行預(yù)處理，可提高直接提取法產(chǎn)品的萃取率，降低其在生產(chǎn)過(guò)程中的氧化損失，進(jìn)一步降低生產(chǎn)成本。直接提取法所得產(chǎn)品為混合物或有效成分，通過(guò)柱層析、高速逆流色譜、大孔吸附樹(shù)脂等純化手段^[12]，可以提高白藜蘆醇的純度，從而滿足生產(chǎn)與研究的不同需要。

2.2 化學(xué)合成

王世盛等以3，5-二羥基苯甲醇為原料，經(jīng)甲基化、溴代、Arbuzov重排、Wittig-Homer縮合、脫甲基反應(yīng)合成了白藜蘆醇。該合成路線反應(yīng)步驟少、操作簡(jiǎn)便、生成反式目標(biāo)產(chǎn)物的選擇性高^[13]。Marcella等利用Heck反應(yīng)合成了單一的反式白藜蘆醇，產(chǎn)率達(dá)到70%以上，但是關(guān)鍵中間體3，5-二乙酰氧基苯乙烯需經(jīng)保護(hù)、Wittig反應(yīng)、再保護(hù)三步反應(yīng)方可獲得^[14]。

白藜蘆醇市場(chǎng)需求量大，但在植物中含量低，提取成本高，從而限制了在醫(yī)藥、保健食品上的應(yīng)用。化學(xué)法合成白藜蘆醇，原料簡(jiǎn)單，成本較低，已成為開(kāi)發(fā)白藜蘆醇的主要手段之一。

2.3 生物合成

2.3.1 植物組織細(xì)胞培養(yǎng)法

將植物細(xì)胞在生物反應(yīng)器中進(jìn)行培養(yǎng)以生產(chǎn)白藜蘆醇，具有生產(chǎn)成本低、產(chǎn)品品質(zhì)好等優(yōu)勢(shì)^[15]。研究表明，植物組織細(xì)胞培養(yǎng)法生產(chǎn)白藜蘆醇的產(chǎn)量是直接提取法的近三倍，并且不受季節(jié)限制，不破壞自然資源，植物組織的生長(zhǎng)周期可以人為控制。

現(xiàn)代生物技術(shù)的快速發(fā)展，為植物組織培養(yǎng)奠定了基礎(chǔ)，為實(shí)現(xiàn)昂貴中藥的規(guī)?；a(chǎn)提供了可能。植物組織細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)標(biāo)志著我國(guó)一種新的中藥原料和藥材生產(chǎn)方法正在形成，將會(huì)帶動(dòng)我國(guó)藥用植物提取產(chǎn)業(yè)的發(fā)展和中草藥快速走出國(guó)門進(jìn)入國(guó)際市場(chǎng)。

2.3.2 芪合酶轉(zhuǎn)基因技術(shù)

Hipskind和Paiva^[16]將花生中的芪合酶基因?qū)胲俎＃谵D(zhuǎn)基因植株中沒(méi)有檢測(cè)到游離的白藜蘆醇，但檢測(cè)到白藜蘆醇甙。中國(guó)科學(xué)院遺傳研究所將葡萄的芪合酶基因轉(zhuǎn)入水稻^[17]和普通春小麥^[18]并獲得轉(zhuǎn)基因植株。

3 制劑

3.1 納米粒

姚倩等以白藜蘆醇為模型藥物，采用氯化鈉沉淀法制備了殼聚糖納米粒，并對(duì)含不同固化劑的殼聚糖納米粒的相關(guān)性質(zhì)行考察，所得白藜蘆醇?xì)ぞ厶羌{米粒的粒徑相對(duì)較小，并且表面氨基游離，從而為設(shè)計(jì)殼聚糖納米粒主動(dòng)靶向給藥系統(tǒng)奠定了基礎(chǔ)^[19]。

3.2 脂質(zhì)體（1iposome）

王莉等將白藜蘆醇分別制成普通脂質(zhì)體和半乳糖苷修飾的脂質(zhì)體，并以小鼠為對(duì)象比較靶向作用，修飾后的白藜蘆醇脂質(zhì)體在提高藥物療效，減少用藥劑量，降低藥物毒副作用等方面具有顯著作用，同時(shí)也為其臨床應(yīng)用奠定了良好理論依據(jù)與實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)^[20]。脂質(zhì)體作為一種新型藥物載體，能包裹脂溶性或水溶性藥物。脂質(zhì)體在體內(nèi)具有無(wú)毒性、無(wú)免疫性、靶向性、緩釋性等特點(diǎn)，可以提高藥物治療指數(shù)，降低藥物毒性，減少藥物劑量。

3.3 膠囊劑

紫金膠囊由葡萄、虎杖等原料經(jīng)現(xiàn)代提取工藝制成，具有抗癌、降血脂、美容和減肥的功效^[21]。白藜蘆醇膠囊的主要有效成分屬多酚類化合物，具有廣泛生物活性，故開(kāi)發(fā)利用白藜蘆醇有著十分重要意義。

3.4 保健品

美國(guó)的Paradise herb Resveratrol、life extension，加拿大的Natrol resveratrol以及我國(guó)生產(chǎn)的天獅活力康均為含有白藜蘆醇的保健品^[22]。由于白藜蘆醇廣泛存在于人們?nèi)粘Ｊ澄镏?，故很多食物現(xiàn)在已經(jīng)被認(rèn)為具有了保健品的功效。

白藜蘆醇在日本、美國(guó)、加拿大等國(guó)家已被消費(fèi)者廣泛接受，但國(guó)內(nèi)人們對(duì)白藜蘆醇研究起步較晚，對(duì)其功能認(rèn)識(shí)不足，白藜蘆醇尚未能打開(kāi)市場(chǎng)。相信隨著人們對(duì)白藜蘆醇研究和認(rèn)識(shí)的不斷深入，白藜蘆醇及其相關(guān)產(chǎn)品會(huì)逐步為國(guó)人所接受。隨著白藜蘆醇相關(guān)產(chǎn)品的不斷問(wèn)世和產(chǎn)業(yè)化的形成，其應(yīng)有的藥用價(jià)值與社會(huì)價(jià)值將得到充分發(fā)掘，同時(shí)必將產(chǎn)生良好的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。

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（責(zé)任編輯：陳涌濤）