鼻腔－鼻竇葡萄球菌感染檢測及耐藥性分析

王　慧　黃和贊

【摘要】 目的 了解鼻腔-鼻竇葡萄球菌感染及耐藥狀況，為臨床診斷治療及防止醫院感染提供依據。方法 對鼻腔-鼻竇分泌物標本分離葡萄球菌經API 20STAPH證實，再采用K-B紙片法頭孢西丁（FOX）紙片法、苯唑西林（OXA）紙片法和肉湯稀釋（MIC）法GPS藥敏卡對耐甲氧西林葡萄球菌檢測比較，并進行耐藥性分析。結果 340株葡萄球菌中MRSA占67.54%（129/191），MRCNS占65.10%（97/149）（P>0.05）。FOX紙片法與OXA紙片法、MIC法檢測MRSA的敏感性和特異性差異無統計學意義（P>0.05）；檢測MRCNS的特異性FOX紙片法明顯優于OXA紙片法（69.23%）和MIC法（59.62%）（P＜0.01），敏感性差異無統計學意義（P>0.05）。替考拉寧和萬古霉素無耐藥，替考拉寧有11株中敏；MRSA+MRCNS耐藥率為11.5-97.34%高于MSSA+MSCNS耐藥率3.51%～86.84%（P＜0.01），且多重耐藥。結論 鼻腔-鼻竇耐甲氧西林葡萄球菌檢出率高，而且耐藥壓力增大，檢測MRSA和MRCNS應選擇操作簡單、敏感性和特異性高的FOX紙片法，治療應根據藥敏結果選擇抗菌藥物。

【關鍵詞】 鼻竇;感染; 耐甲氧西林葡萄球菌; 耐藥性

葡萄球菌是引起鼻腔、鼻竇和傷口感染的常見病原菌，近年來隨著β-內酰胺類廣譜抗菌藥物廣泛使用，導致產生mecA基因介導的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）增多，耐藥程度日益嚴重并呈多重耐藥，引起醫院感染，給臨床治療帶來極大困難^[1]。為了解鼻腔-鼻竇葡萄球菌感染狀況，筆者從臨床患者鼻腔-鼻竇分泌物標本分離葡萄球菌340株，經鑒定后采用K-B紙片法頭孢西丁（FOX）紙片法，苯唑西林（OXA）紙片法和微量肉湯稀釋（MIC）法GPS藥敏卡檢測），并對其耐藥性進行比較分析。

1 資料與方法

1.1 菌株來源 2007年3月至2008年5月從南昌市第二醫院耳鼻喉科-頭頸外科鼻-鼻竇分泌物及鼻內鏡手術的患者鼻-鼻竇分泌物標本中分離出葡萄球菌340株，其中金黃色葡萄球菌191株，凝固酶陰性葡萄球菌149株。質控菌株：金黃色葡萄球菌ATCC25923（甲氧西林敏）、ATCC433300（甲氧西林耐藥）購自衛生部臨床檢驗中心。

1.2 抗菌藥物 FOX紙片（30μg/片）、OXA紙片（1μg/片）、青霉素、頭孢唑啉、頭孢三嗪、阿奇霉素、紅霉素、慶大霉素、四環素、氯霉素、利福平、環丙沙星、左氧氟沙星、復方新諾明、替考拉寧、萬古霉素共16種抗菌藥物，購自天壇藥物生物技術開發公司。API 20STAPHGPS藥敏卡購自生物梅里埃公司。

1.3 耐甲氧西林葡萄球菌檢測 ①菌株分離鑒定及藥敏試驗按操作常規進行，葡萄球菌再用API 20STAPH證實；②FOX紙片法、OXA紙片法、MIC法根據CLSI 2007年標準判斷結果，FOX紙片法抑菌環直徑≤19 mm 為MRSA，≥20 mm為甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌（MSSA）；≤24 mm 為MRCNS，≥25 mm為甲氧西林敏感凝固酶陰性葡萄球菌（MSCNS）。OXA紙片法抑菌環直徑≤10 mm為MRSA，≥13 mm為MSSA；≤17 mm為MRCNS，≥18 mm為MSCNS；MIC法以≥4 μg/ml為MRSA，≤2 μg/ml為MSSA；≥0.5 μg/ml為MRCNS，≤0.25 μg/ml為MSCNS。

１.4 統計學方法 計數資料采用χ²檢驗。

２ 結果

2.1340株葡萄球菌FOX紙片法MRSA和MRCNS檢出率（%）見表1。

2.2 FOX紙片法、OXA紙片法、MIC法檢測MRSA、MRCNS敏感性和特異性結果 FOX紙片法、OXA紙片法、MIC法檢測MRSA敏感性分別為100%、99.22%、97.67%，差異無統計學意義(χ²=1.004；3.035，均P>0.05)，檢測MRCNS敏感性分別為100%、96.77%、98.39%差異無統計學意義(χ²=3.047；2.021，均P>0.05) 檢測MRSA特異性分別為100%、96.91%、97.94%,差異無統計學意義(χ²=2.033；1.008，均P>0.05)檢測MRCNS特異性分別為100%、69.23%、59.62%差異有統計學意義(χ²=18.909；26.313，均P＜0.01)見表2。

2.3 340株葡萄球菌對14種抗菌藥物耐藥結果 MRSA+MRCNS耐藥率明顯高于MSSA+MSCNS（P＜0.01） (紅霉素差異無統計學意義P>0.05)。有6種抗生素同時耐藥占52.3%。對替考拉寧有11株中敏，未檢出替考拉寧和萬古霉素耐藥菌株。見表3。

3 討論

葡萄球菌在20世紀80年代后感染率、耐藥范圍及程度逐年增加，特別是MRSA+MRCNS具有毒性、耐藥廣泛、療效差易于傳播等特點，引起急性、亞急性、慢性、急性復發性、慢性急性發作各型鼻腔、鼻竇炎癥，成為院內感染和社區感染重要致病菌。MRSA、MRCNS檢出率文獻報道不一，陳俊^[2]等為37.6%、38.3%；張卉^[3]為53.85%、61.76%；本試驗結果為67.54%、65.10%。檢出率相互存在差異其原因可能與檢測方法敏感性和特異性差異，病程標本選擇差異及區域性差異有關。目前檢測MRSA和MRCNS方法普遍采用OXA紙片法和MIC法（GPS藥敏卡），檢測MRSA的敏感性和特異性與陳穎^[4]報道的99.10%、100.00%和97.10%、100.00%結果相近，與FOX紙片法比較差異無統計學意義（P>0.05）。但FOX紙片法能檢出低水平異質性MRSA，敏感性高。OXA紙片法和MIC法檢測MRCNS特異性低，分別為69.23%和59.62%，有較高假陽性，臨床容易導致誤診和耐藥菌株產生，應引臨床高度起重視。FOX紙片法檢測MRCNS特異性明顯優于OXA紙片法和MIC法（P＜0.01），但其敏感性差異無統計學意義（P>0.05），與文獻報道相同^[5]。

染色體介導的基因編碼PBP2a和質粒轉導、轉化或插入是導致葡萄球菌的耐藥主要原因。340株葡萄球菌藥敏結果顯示，MRAS和MRCNS對14種抗菌藥物耐藥率>50%有7種（青霉素、阿奇霉素、紅霉素、四環素、氯霉素、環丙沙星、左氧氟沙星），青霉素類、頭孢菌素類、氯霉素類、多數氨基糖苷類、四環素類、大環內酯類、喹諾酮類）體外敏感，臨床治療無效；MSSA+MSCNS耐藥率>50%有3種（青霉素、阿奇霉素、紅霉素）；葡萄球菌對利福平有較高敏感性。MRSA+MRCNS耐藥率明顯高于MSSA+MSCNS（P＜0.01），且多重耐藥。有11株對替考拉寧中敏，提示對糖肽類抗生素耐藥壓力增大^[6]，未檢出替考拉寧和萬古霉素耐藥菌株。

總之，鼻腔-鼻竇葡萄球菌MRSA和MRCNS檢出率高，對多種抗生素耐藥壓力增大，應引起耳鼻咽喉-頭頸外科醫師的重視。鼻腔-鼻竇感染治療前或術后出現不明原因發熱、頭痛、鼻分泌物明顯增多的患者及時進行分泌物微生物培養，對MRSA和MRCNS分離鑒定，選擇有效藥物治療，防止MRSA和MRCNS醫源性感染。

參 考 文 獻

［1］ 張文紅. 耐甲氧西林葡萄球菌醫院感染耐藥性分析. 中華醫院感染學雜志,2007，17（8）：998-999.

［2］ 陳俊，傅愛清，朱秋萍，等.慢性鼻竇炎耐甲氧西林葡萄球菌對抗生素的耐藥分析.山東大學耳鼻喉眼學報,2007，21（2）:130-135.

［3］ 張卉. 葡萄球菌耐藥性監測及分析. 實用醫技雜志, 2006，13（08）：1284.

［4］ 陳穎，周建黨，郭建軍. 頭孢西丁擴散法檢測耐甲氧西林葡萄球菌異質性耐藥菌株的評價.中南大學學報（醫學版）,2007， 32(1): 179-181.

［5］ 趙瑞珍，陳乾，劉彬，等. 頭孢西丁紙片法檢測mecA基因介導的MRS. 中華醫院感染雜志, 2006，16（07）：839-840.

［6］ 張遠春，李爽，李鳳蓮，等.耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌對糖肽類耐藥的檢測與分析. 中華醫院感染雜志,2007，17（9）:1152-1155.