大慶地區ＲＨ陰性血人群普查報告

馬振華　關興麗　李　暉

Rh血型系統是僅次于ABO血型系統的第二大紅細胞血型系統。對于一個地區血站來說，能有一個穩定的RH陰性獻血隊伍，及時提供臨床所需的RH陰性血液尤為重要。自從2001年7月份開始，大慶市血站對所有公民義務獻血者進行RhD抗原篩查，現將RhD抗原篩查情況總結分析如下。

1材料與方法

1.1 標本來源 2001年7月1日至2005年6月30日大慶公民義務獻血樣本共79 602份，年齡18~55歲，平均33.6歲。

1.2 檢測試劑 抗D、抗-E、抗-C、抗-e、抗-c、抗人球蛋白（以上六種試劑均由美國DBL公司生產），5%Rh陽性紅細胞（我站自制）。

1.3 主要設備一次性96孔U行微量板，德國賀利氏400R臺式低溫水平離心機，日本久保田KA-2200細胞洗滌離心機，普通光學顯微鏡，恒溫水浴箱，7號注射頭（將針頭斜面磨成平頭）。

1.4 檢測方法 常規應用微量板法檢測，微量板法檢測RhD抗原陰性者進一步應用試管法確定。

1.4.1 微量板方法 向U型微量板底部每個孔內加抗D試劑3~5 ul，用竹簽蘸取獻血者的壓積紅細胞，混入微量板U 型孔內，每快板加待測血樣93份，最后三孔作為對照孔。即陽性對照一孔（用抗D試劑加Rh陽性紅細胞5 μl），細胞陰性對照一孔（用抗D試劑加5%Rh陰性細胞5 μl）血清陰性一孔（用AB型血清5 ul加5%Rh陽性紅細胞5 ul）。用震蕩儀溫和振搖微量板，混勻，最后用水平離心機，1000 r/min離心1 min，判讀、記錄反應結果。1.4.2 試管法 微量板法的樣本需用試管法反復測，試管法具體步驟：將每支試管標記后加抗Ｄ試劑一滴。然后加３％～５％待檢紅細胞懸液一滴，室溫放置5 min。以1000 r/min離心15 s后觀察結果。每批試驗均要三管對照，即陽性對照一管。細胞陰性對照一管，血清陰性對照一管。

1.5 應用微量球蛋白試驗方法和試管法檢測均陰性標本，需進一步做抗人球蛋白試驗以排除Du型。抗人球蛋白試驗方法：向試管內加抗D血清3%~5%的受檢者細胞各一滴，37℃水浴30 min用生理鹽水洗滌3次，末次洗滌將上清傾干后，每管內各加抗人球蛋白試劑一滴，振搖懸浮后，離心看結果。如仍為陰性結果，即判定為受檢者為RH陰性。Rh陰性樣本確定后，需要確定后，需進一步鑒定E、e、C、c。

2 結果與討論

檢測的79602名無償獻血者，Rh抗原陽性79 418人，占99.77%。RhD抗原陰性184人，占0.23%。基本符合Rh陰性0.2%~0.5%的占有比例。但由于在此79 602名無償獻血者中，有很多獻血者都是多次獻血，致使Rh陰性血占比例相對較低，(即在0.2%~0.5%的下限)。詳細結果見表1。

沒有檢出Du型。 對184例Rh陰性樣本E.e.C.c抗原檢測結果：ccdee有93人，ccdE有4人，CcdE有3人，Ccdee有57人，CdE有1人，Cdee有6人，ccdEc有17人，CcdEe有3人，可以看出：ccdee此抗原類型占有比例大約占50.5%^[1]。

Rh陰性在ABO血型系統中的分布：在184例RH陰性無償獻血者中，A型43例占23.4%，B型為65例占35.3%，O型69人占32.6%，AB型16人占8.7%。與大慶地區群ABO抗原頻率相比差異無統計學意義^[2]。

自2002年7月1日至2005年6月30日，大慶地區共采集Rh陰性血124人次（其中大部分為一次性300~400 ml），約37.2 L，約占采血總量的0.18，低于Rh陰性血源所占的0.23%，可以說明大慶地區現有Rh血緣基本滿足大慶地區Rh陰性用血的需要，各型供求比例平衡。

參 考 文 獻

［1］ 趙桐茂.人類血型遺傳學.北京科學出版社，1998:231-233.

［2］ 王來法.大慶地區ABO血型分布黑龍江省第二屆輸血專業學術交流匯匯編，1993:69.